国家级星火计划(2008GA780032)
- 作品数:11 被引量:73H指数:6
- 相关作者:杨胜远李云刘祥流陈郁娜麦真真更多>>
- 相关机构:韩山师范学院南京农业大学玉林师范学院更多>>
- 发文基金:国家级星火计划广东省自然科学基金国家高技术研究发展计划更多>>
- 相关领域:生物学轻工技术与工程化学工程更多>>
- 细胞转化液γ-氨基丁酸的精制
- 2011年
- 对Streptococcus salivarius subsp.thermophilus Y-2细胞转化液GABA的纯化进行探讨,通过等电点沉淀和732强酸阳离子交换树脂处理。结果表明:GABA的总回收率达到84.13%;纯化的GABA的外观为白色粉末状固体,GABA含量(97.81±0.67)%,灰分(0.449±0.002)%,干燥质量损失率(1.79±0.06)%,铅、砷和汞的含量分别为(0.4093±0.0001)、(0.0511±0.0001)、(0.0950±0.0000)mg/kg,纯化的GABA质量符合食品添加剂标准。该方法可高效纯化细胞转化液中的GABA。
- 杨胜远陆兆新别小妹吕凤霞
- 关键词:纯化Γ-氨基丁酸生物转化唾液链球菌嗜热亚种
- 嗜热链球菌谷氨酸脱羧酶基因及其侧翼区序列分析被引量:1
- 2011年
- 从嗜热链球菌Streptococcus thermophilus Y-2的谷氨酸脱羧酶基因(gadB)及其两侧旁邻序列出发,在GenBank中分别用Blastn、Blastx搜索同源序列。gadB在核酸水平上无法找到同源序列,在蛋白质水平上与多种细菌的谷氨酸脱羧酶同源。根据谷氨酸脱羧酶的氨基酸序列构建系统发育树,菌株Y-2与具核梭杆菌Fusobacterium nucleatumsubsp.polymorphum ATCC10953的亲缘关系最近。gadB的上游侧翼区与嗜热链球菌LMG18311的插入序列IS1216转座酶基因具有很高的相似性。gadB的下游侧翼区在核酸水平上未找到同源序列,在蛋白质水平上与谷氨酸/γ-氨基丁酸转运蛋白有很高的相似性。菌株Y-2的gadB、gadC排列方式与大肠杆菌、弗氏志贺菌的相同,而与乳酸乳球菌、短小乳杆菌的相反。在已完成全基因组测序的3个模式株Streptococcus thermophilus LMG18311、CNRZ1066、LMD-9中均含有插入序列IS1216,但未发现谷氨酸脱羧酶基因gadB、谷氨酸/γ-氨基丁酸转运蛋白基因gadC。
- 林谦杨胜远陆兆新吕凤霞别小妹邹晓葵
- 关键词:嗜热链球菌谷氨酸脱羧酶Γ-氨基丁酸
- 产γ-氨基丁酸屎肠球菌的鉴定及其谷氨酸脱羧酶酶学性质被引量:7
- 2010年
- 目的:鉴定1株产γ氨基丁酸(γ-aminobutyric acid,GABA)的乳酸菌HS3,并研究了其谷氨酸脱羧酶(Glutamate decarboxylase,GAD)粗酶酶学性质。方法:根据形态培养特征、生理生化特征和16S rDNA序列比对及系统发育分析对菌株HS3进行了鉴定。采用菌体细胞破碎后的粗酶液,研究了温度、pH和金属离子对酶活的影响。结果:菌株HS3的形态培养和生理生化特征符合肠球菌属(Enterococcus)特征,其16S rDNA序列与Enterococcus faecium(EU717962)16S rDNA序列同源性达99%,鉴定菌株HS3为屎肠球菌(Enterococcus faecium),菌株HS3 GAD最适作用温度为40℃,最适作用pH4.5。酶的热稳定较好,50℃处理4h,在pH3.5~6.0酶活基本稳定。Ca2+对酶有激活作用,5mmol/L和50mmol/L浓度酶活分别提高了37.41%和17.43%。Ba2+和Zn2+在5mmol/L浓度时激活作用明显,而Mg2+在5mmol/L浓度激活作用较好。结论:菌株HS3的GAD活力较高,稳定性较好,为生物合成GABA提供了新的微生物菌种资源。
- 李云杨胜远杨韵晴黄荣城陈郁娜刘祥流
- 关键词:Γ-氨基丁酸谷氨酸脱羧酶屎肠球菌
- 唾液链球菌嗜热亚种Y-2细胞转化法制备γ-氨基丁酸被引量:5
- 2011年
- 研究反应pH值、反应温度、重金属盐、表面活性剂、底物浓度、菌体质量浓度和磷酸吡哆醛添加量对Streptococcus salivarius subsp.thermophilus Y-2细胞转化法生产γ-氨基丁酸的影响。获得反应体系的最佳组成为:湿菌体25g/L、BaCl2 40mmol/L、Triton X-100体积分数0.02%、L-谷氨酸单钠盐(L-monosodium glutamate,MSG)47.5g/L和L-谷氨酸(L-glutamic acid,L-Glu)90.0g/L。该体系在40℃、pH 4.5和搅拌速度100r/min的最适转化条件下进行反应72h,转化液GABA产量达到了(87.16±4.33)g/L,细胞平均生产力为(48.42±2.41)mg/(h.g),摩尔转化率为(97.60±4.71)%。
- 杨胜远陆兆新吕凤霞别小妹
- 关键词:唾液链球菌嗜热亚种谷氨酸脱羧酶Γ-氨基丁酸生物转化
- 一株产抗菌活性物质解淀粉芽孢杆菌的筛选及鉴定被引量:28
- 2010年
- 从菜园土壤中分离筛选到1株产广谱抗菌活性物质的菌株K6,其抗菌活性物质对藤黄微球菌、大肠杆菌、铜绿假单孢菌、枯草芽孢杆菌、蜡样芽孢杆菌、巨大芽孢杆菌、苏云金芽孢杆菌、酿酒酵母、匍枝根霉和白色念珠菌均有抑制作用,其中对革兰氏阳性菌的抑菌作用最强,对霉菌的抑制作用相对较弱。通过形态特征、16SrDNA序列分析和系统发育分析,菌株K6与B.amyloliquefaciens位于同一簇群,同源性达99%,将其初步鉴定为解淀粉芽孢杆菌。
- 杨胜远韦锦李云姚虹黄月丹
- 关键词:抗菌活性物质RDNA系统发育分析解淀粉芽孢杆菌
- 两株植物内生巨大芽孢杆菌的生物学特性比较被引量:6
- 2010年
- 分别从爬山虎和金银花的茎中分离和鉴定获得了两株植物内生巨大芽孢杆菌(Bacillus megaterium),并对其形态特征、生理生化特征、培养及生理特征进行研究和比较。结果显示,在菌体的大小、耐盐能力、利用柠檬酸盐和在10°C下生长情况、D-木糖的代谢和产卵黄磷脂酶情况等方面,不同植物的内生巨大芽孢杆菌间以及植物内生菌与外源菌间都存在较大差异。结果表明,表型分类法在植物内生菌的鉴定中存在一定局限。
- 杨胜远韦锦李云
- 关键词:爬山虎植物内生菌巨大芽孢杆菌生物学特性
- 产谷氨酸脱羧酶片球菌的鉴定及其酶学性质被引量:5
- 2010年
- 从发酵蔬菜中分离一株产谷氨酸脱羧酶(glutamate decarboxylase,GAD)的乳酸菌HS2,其菌体细胞转化Glu1h,转化液中γ-氨基丁酸含量可达(3.114±0.133)g/L,通过形态培养特征、生理生化特征、16S rDNA序列比对及系统发育分析,鉴定菌株HS2是戊糖片球菌(Pediococcus pentosaceus)。菌株HS2GAD最适作用温度为35℃,最适作用pH4.5。酶的热稳定较好,在pH4.0~6.5于50℃处理4h,酶活基本稳定。Ca2+对酶有激活作用,5mmol/L和50mmol/L Ca2+浓度使酶活分别提高了37.21%和23.02%。Mg2+和Mn2+在50mmol/L浓度时激活作用明显,而Co2+在5mmol/L浓度激活作用较好。
- 李云杨胜远陈郁娜刘祥流麦真真陈燕
- 关键词:谷氨酸脱羧酶戊糖片球菌Γ-氨基丁酸菌种鉴定
- 产细菌素苏云金芽孢杆菌的鉴定及其所产抗菌物质性质被引量:13
- 2010年
- 从腌制蔬菜表面分离到一株产细菌素的菌株K2,其中和后的无细胞发酵液主要抑制革兰氏阳性细菌,特别是对芽孢杆菌有强烈的抑制作用。发酵上清液经硫酸铵盐析和透析后,仍然有很强的抗菌活性,并对多种蛋白酶敏感,表明抗菌活性物质为蛋白类物质。通过形态培养特征、生理生化特征、16S rDNA序列比对及系统发育分析,鉴定菌株K2是苏云金芽孢杆菌(Bacillus thurin giensis)。菌株K2产生的抗菌物质在pH6~9条件下80℃处理30min仍保持稳定的抗菌活性,其对敏感菌的作用主要是杀菌,而且对芽孢萌发有很好的抑制作用。该抗菌物质在菌体生长对数中期产生,在稳定期中期抗菌活性达到最大。
- 李云杨胜远林晓东钟瑜红苏婷刘湘嘉
- 关键词:苏云金芽孢杆菌细菌素抗菌物质
- 戊糖片球菌HS2细胞制备γ-氨基丁酸的研究被引量:7
- 2010年
- 采用戊糖片球菌(Pediococcus pentosaceus)HS2细胞转化L-谷氨酸一钠制备γ-氨基丁酸(γ-aminobutyric acid,GABA)。通过对转化反应温度、pH值、金属离子、底物浓度、菌体浓度和菌体培养时间等因素对HS2细胞转化法生产GABA的影响进行了考查,确定转化反应体系最优的组成为:采用培养12h的菌体、湿菌体50mg/mL、Ca2+50mmol/L、L-谷氨酸一钠10g/L和L-谷氨酸50g/L。当该体系在pH值4.5、35℃、120r/min搅拌下反应48h,转化液中GABA的浓度达到(39.89±2.12)g/L,摩尔转化率为(97.00±5.16)%。
- 李云杨胜远陈郁娜刘祥流麦真真苏婷刘湘嘉
- 关键词:戊糖片球菌Γ-氨基丁酸细胞转化
- 利用戊糖片球菌HS2制备γ-氨基丁酸
- 从发酵蔬菜中分离了一株产γ-氨基丁酸(γ-aminobutyric acid,GABA)的乳酸菌HS2,通过16SrDNA序列比对及系统发育分析,将菌株HS2鉴定是戊糖片球菌(Pediococcus pentosaceu...
- 李云杨胜远
- 关键词:谷氨酸脱羧酶戊糖片球菌菌种鉴定
- 文献传递