武汉市卫生局科研项目(WX08C16)
- 作品数：1 被引量：1H指数：1
- 相关作者：黄巍李小鸥周丽荣刘桥黄晓刚更多>>
- 相关机构：武汉市医学科学研究所武汉大学更多>>
- 发文基金：武汉市卫生局科研项目国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- ADAM10真核表达载体的构建及其对MCF-7增殖迁移的影响被引量：1
- 2012年
- 目的构建ADAM10真核表达载体,观察稳定转染乳腺癌细胞MCF-7后对其增殖和迁移的影响。方法利用PCR技术扩增人ADAM10的基因片段,克隆入pcDNA3.1真核表达载体,阳性克隆通过PCR、酶切和测序鉴定。脂质体法将重组质粒转染MCF-7细胞,通过G418筛选出稳定转染ADAM10的细胞株,通过Western blot检测细胞ADAM10的表达,通过MTT法和Transwell法分别检测细胞的增殖和迁移变化。结果经PCR、酶切和测序鉴定证明ADAM10真核表达载体构建成功,Western blot结果显示稳定转染细胞的ADAM10蛋白高表达,MTT实验显示转染细胞增殖速度稍快于对照(P<0.05),Transwell结果显示转染细胞迁移能力比对照强(P<0.01)。结论成功构建ADAM10真核表达载体,稳定转染MCF-7细胞后可增强细胞的增殖和迁移,为进一步研究ADAM10生物学作用奠定基础。
- 黄巍李小鸥周丽荣黄晓刚刘桥
- 关键词：MCF-7细胞细胞迁移
