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国家重点基础研究发展计划(2006CB504001)

作品数:5 被引量:8H指数:1
相关作者:缪时英王琳芳武岚王勇钱忠更多>>
相关机构:中国医学科学院北京协和医学院清华大学中央民族大学更多>>
发文基金:国家重点基础研究发展计划国家自然科学基金北京市自然科学基金更多>>
相关领域:生物学医药卫生更多>>

文献类型

  • 5篇中文期刊文章

领域

  • 3篇生物学
  • 2篇医药卫生

主题

  • 3篇睾丸
  • 2篇精子
  • 2篇精子发生
  • 1篇蛋白
  • 1篇蛋白质
  • 1篇蛋白质纯化
  • 1篇蛋白质功能
  • 1篇凋亡
  • 1篇新基因
  • 1篇原核表达
  • 1篇人睾丸
  • 1篇人睾丸组织
  • 1篇生精
  • 1篇生精细胞
  • 1篇嗜热
  • 1篇嗜热厌氧菌
  • 1篇特异
  • 1篇特异表达
  • 1篇腾冲嗜热厌氧...
  • 1篇内吞

机构

  • 2篇清华大学
  • 2篇中国医学科学...
  • 1篇中国科学院
  • 1篇中央民族大学

作者

  • 4篇王琳芳
  • 4篇缪时英
  • 1篇乔原
  • 1篇胡廷徽
  • 1篇陈轶男
  • 1篇付俊
  • 1篇宋伟
  • 1篇陈叙
  • 1篇崔箭
  • 1篇徐斯凡
  • 1篇李树春
  • 1篇钱忠
  • 1篇王勇
  • 1篇武岚

传媒

  • 2篇中国医学科学...
  • 1篇生命的化学
  • 1篇Scienc...
  • 1篇医学研究杂志

年份

  • 1篇2010
  • 3篇2009
  • 1篇2007
5 条 记 录,以下是 1-5
排序方式:
睾丸高表达蛋白质HSD-14对小鼠精子发生的影响
2009年
目的研究睾丸高表达基因HSD-14及其编码蛋白质对小鼠精子发生的影响。方法利用本实验室构建的人睾丸特异ESTs文库,通过电子克隆方法获得一新基因命名为HSD-14基因。纯化原核表达的HSD-14蛋白,并制备兔多克隆抗体。通过HE染色观察腹腔注射HSD-14纯化蛋白或睾丸曲细精管显微注射HSD-14纯化抗体后小鼠睾丸组织的生精变化,并进行TUNEL凋亡检测。结果电子克隆获得HSD-14基因,在原核表达系统中表达成功。小鼠腹腔注射HSD-14纯化蛋白或睾丸曲细精管显微注射HSD-14纯化抗体后,均发现曲细精管中生精细胞大量脱落,生精细胞的层次紊乱,管腔内有时可见成团脱落的生精细胞,附睾中几乎观察不到成熟精子。TUNEL凋亡检测结果表明,抗体注射组小鼠曲细精管中生精细胞(以精母细胞为主)凋亡程度较正常小鼠睾丸和免疫前血清注射组明显,且多数细胞停留在精母细胞甚至精原细胞的阶段。结论HSD-14通过诱导精母细胞凋亡抑制小鼠精子发生。
宋伟胡廷徽陈叙缪时英王琳芳
关键词:精子发生精母细胞细胞凋亡
腾冲嗜热厌氧菌新型变旋酶的表达、纯化及晶体分析
2009年
目的纯化腾冲嗜热厌氧菌新型变旋酶TTE1925,用于晶体生长和三维结构分析。方法将tte1925基因克隆至原核表达载体pGEX-6P-1中,将菌落PCR和测序鉴定正确的重组质粒转化E.coliBL21(DE 3)后获得表达菌株。该菌株经异丙基-β-D-硫代半乳糖苷诱导高效表达出带有谷胱甘肽S转移酶标签的可溶性融合蛋白,经过GlutathioneSepharoseTM4B亲和层析、Resource Q 6 mL离子交换层析和10/300 superdex 200分子筛层析纯化后,得到目的蛋白TTE1925。结果纯化后蛋白的纯度达到99%以上。蛋白采用悬滴气相扩散法得到衍射至1.9的棒状晶体。结论成功制备了高纯度TTE1925蛋白,获得TTE1925蛋白质晶体,为进一步解析变旋酶的三维结构及其生物学功能分子机制研究奠定了基础。
武岚钱忠付俊缪时英王琳芳
关键词:原核表达蛋白质纯化
人睾丸组织特异表达新基因HSD-9的克隆及其编码蛋白质功能
2007年
目的利用本室建立的人睾丸组织中不同细胞特异表达的ESTs文库克隆新基因HSD-9,初步研究HSD-9蛋白的特性及功能。方法采用电子克隆手段获得新基因HSD-9,生物信息学手段分析基因及编码蛋白质的特点,Northern blot研究HSD-9基因的表达谱,原核表达方法得到HSD-9蛋白并制备特异性多克隆抗体,免疫荧光结合激光共聚焦显微镜技术研究HSD-9蛋白在生精细胞中的定位及在哺乳动物细胞中的表达特点。结果HSD-9基因在人睾丸组织特异表达,其大鼠同源物可在大鼠各级生精细胞中表达;HSD-9-EGFP在CHO细胞和S4细胞中表达呈现沿细胞膜分布的小颗粒和偏心分布于胞内一侧的粗大颗粒;HSD-9-EGFP和网格蛋白clathrin可以部分共定位。结论HSD-9是人睾丸组织特异表达新基因,其编码蛋白质在CHO细胞和S4细胞中表达特点非常类似于内吞小体蛋白的表达特点,推测其可能参与了细胞中内吞过程的调节。
王勇陈轶男乔原缪时英王琳芳
关键词:CLATHRIN内吞
Molecular basis of cryptorchidism-induced infertility被引量:8
2010年
Artificial cryptorchidism or local testicular heat treatment can induce reversible oligospermia or azoospermia in monkeys and rats via germ cell apoptosis. Local warming of monkey testes in water at 43°C for 2 consecutive days (30 min per day) decreased the number of sperm in the semen by up to 80% on d 28, and the effect was completely reversed on d 144. Germ cells rely heavily on Sertoli cells for structural and nutritional support. Specialized junctions that play a pivotal role in spermatogenesis occur at sites of Sertoli-Sertoli and Sertoli-germ cell contact in the seminiferous epithelium. We demonstrated that expression of tight junction (TJ)-associated molecules, such as occludin and zonula occludens-1 (ZO-1), were greatly reduced 24–48 h after heat treatment, while the permeability of the blood-testis barrier (BTB) was simultaneously increased, but recovered 10 d later. These results indicate a reversible disruption of the BTB associated with transient inductions of transforming growth factor (TGF) β2 and β3 expression, p38 mitogen-activated protein kinase and extracellular signal-regulated kinase activation, and concomitant loss of occludin and ZO-1. This suggests that expression of TJ-associated molecules and the BTB was reversibly perturbed by mild testicular hyperthermia, and that the heat-induced induction of TGF-β might be involved in downregulating TJ-associated proteins, leading to cell junction reduction. This review discusses the changes in total gene expression patterns after experimental cryptorchidism in adult mouse testes, and the cloning of several novel, physiologically significant spermatogenesis-specific genes.
LIU YiXun & LI XiXia State Key Laboratory of Reproductive Biology, Institute of Zoology, Chinese Academy of Sciences, Beijing 100101, China
关键词:CRYPTORCHIDISMSPERMATOGENESISSERTOLITIGHTJUNCTION
生精细胞和生精细胞移植
2009年
精子发生是一个高度有序的细胞分化过程。由于精子发生的高度复杂性和对体内微环境的依赖性,故迄今为止尚无满意的培养系统能够在体外完成精子发生过程。探索研究精子发生的新方法是摆在我们面前亟待解决的课题,在此方面,生精细胞移植技术被寄予厚望。因此,这里对该技术的历史、原理及应用前景进行综述。
李树春崔箭徐斯凡缪时英王琳芳
关键词:精子发生睾丸精原干细胞
共1页<1>
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