广东省自然科学基金(34064)
- 作品数：8 被引量：49H指数：4
- 相关作者：黄良宗顾万军李丹冼琼珍王淑敏更多>>
- 相关机构：佛山科学技术学院东莞市动物疫病预防控制中心华南农业大学更多>>
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- 中药体外对Marc-145细胞的影响及抗PRRSV突变株的作用被引量：2
- 2011年
- 将板蓝根、甘草和鱼腥草3种单味中药各含量为100mg/mL的中药粗提物作连续倍比稀释后,采用CPE和MTT法将其在Marc-145细胞上进行最大安全质量浓度和对细胞增殖的影响试验,同时采用体外细胞培养的方法在Marc-145细胞上进行抗猪繁殖与呼吸综合征病毒突变株(PRRSV PX株)作用试验。结果显示,3种中药粗提物最大安全作用质量浓度板蓝根和甘草均为3.125g/L、鱼腥草为1.563g/L;板蓝根、甘草、鱼腥草分别在3.125～0.049、3.125～0.195、1.563～0.391g/L时测得细胞D值大于细胞对照组,对细胞分裂增殖均有促进效果,最佳作用质量浓度均为1.563g/L;3种中药粗提物有不同程度的抗PRRSV PX株作用,板蓝根和甘草粗提物阻断、抑制PRRSV PX株感染及直接灭活PRRSV PX株效果最好的质量浓度;阻断为3.125、3.125g/L、抑制为1.563、0.391g/L:阻断、直接灭活为0.782、0.782g/L,鱼腥草粗提物在0.782g/L时阻断和抑制PRRSV PX株效果为好,但其对PRRSV PX株基本没有直接灭活作用。
- 曾强黄良宗李丹朱燕秋谢海燕顾万军
- 关键词：板蓝根甘草鱼腥草MARC-145细胞
- 伪狂犬病的诊断与防控
- 2006年
- 黄良宗谢权中徐璘顾万军
- 关键词：猪伪狂犬病猪瘟弱毒疫苗猪传染性胃肠炎猪流行性腹泻紧急免疫接种
- H1N1亚型猪流感病毒的生物学特性测定及其HA基因序列分析被引量：3
- 2006年
- 测定了A／Swine／Guangdong／1／01（H1N1）猪流感病毒的部分生物学特性；运用RT—PCR方法扩增其HA基因，并对其进行了克隆和序列分析。结果表明，该株病毒的EID50／0．2mL及TCID50／0．1mL分别为10^-2.3和10^-2.1，小鼠感染试验亦说明该病毒具有致病性。序列分析表明，HA基因全长为1701bp，与国内外流行株同源性达90．8％～99．0％。
- 马祥顾万军刘镇明黄良宗彭启明
- 关键词：猪流感逆转录-聚合酶链反应
- H1N1亚型猪流感病毒血凝素基因的克隆与表达被引量：1
- 2006年
- 应用RT-PCR方法扩增了1株H1N1亚型猪流感病毒的血凝素基因,并克隆到pMD 18-T Simple载体中,经PCR、酶切和测序验证克隆正确后,亚克隆到真核表达载体pcDNA3.1(+)中,构建了重组质粒pcDNA-HA。在脂质体作用下重组质粒pcDNA-HA转染Vero细胞。间接免疫荧光试验结果表明,血凝素基因在Vero细胞中成功进行了瞬时表达,这为猪流感病毒DNA疫苗的进一步研究奠定了基础。
- 马祥顾万军刘镇明黄良宗彭启明
- 关键词：猪流感病毒血凝素基因克隆VERO细胞
- 3种中药体外抗猪繁殖与呼吸综合征病毒的作用被引量：13
- 2010年
- 为研究板蓝根、甘草和鱼腥草3种中药粗提物体外抗猪繁殖与呼吸综合征病毒(porcine reproductive and respiratory syndrome virus,PRRSV)的作用,采用体外细胞培养法,在Marc-145单层细胞上,对3种中药粗提物进行直接抗PRRSV活性试验.结果表明,板蓝根和甘草粗提物阻断PRRSV的最佳质量浓度分别为3.125、0.391mg/mL,抑制PRRSV感染的最佳质量浓度分别为3.125、0.782mg/mL,直接灭活PRRSV的最佳质量浓度分别为1.563、0.782mg/mL;鱼腥草粗提物质量浓度为0.782mg/mL时,阻断和抑制PRRSV感染的效果最好,但对PRRSV没有直接灭活作用.3种中药粗提物均有不同程度的体外抗PRRSV活性作用,其中板蓝根的效果最好.
- 曾强黄良宗李丹朱燕秋谢海燕顾万军
- 关键词：板蓝根甘草鱼腥草猪繁殖与呼吸综合征病毒
- H3亚型猪流感病毒分离与鉴定被引量：10
- 2006年
- 从东莞和鹤山等地不同猪场采集的40份鼻拭子或病死猪的肺、气管病料中分离到4株有血凝活性的病毒,其中3株病毒与新城疫病毒阳性血清的HI试验为阳性,另外1株病毒与抗猪流感H3亚型猪流感病毒阳性血清的HI试验为阳性;根据猪流感病毒M基因设计引物,扩增出预期的约315 bp片段,表明该病毒为H3亚型猪流感病毒。
- 黄良宗顾万军王淑敏冼琼珍
- 关键词：猪流感病毒血凝抑制试验逆转录-聚合酶链反应
- 中药体外对猪繁殖与呼吸综合征病毒的影响被引量：4
- 2009年
- 采用细胞培养的方法测定了黄芪、板蓝根等6种中药在细胞安全浓度范围内抵抗猪繁殖与呼吸综合征病毒感染细胞的作用。试验结果表明,药物的最大无毒作用浓度为黄芪12.5 mg/mL、板蓝根3.125 mg/mL、甘草3.125 mg/mL、山楂3.125 mg/mL、鱼腥草1.526 mg/mL、青蒿1.526 mg/mL。先加药物后加病毒时,6种中药的保护作用均显著;先加病毒后加药物时,鱼腥草的作用比较稳定,而板蓝根在3.125 mg/mL、1.562 mg/mL保护率较高;药物与病毒孵育后加药,板蓝根在3.125 mg/mL、1.562 mg/mL的作用比较明显。
- 李丹向华黄良宗娄华柴家前顾万军
- 关键词：中药猪繁殖与呼吸综合征病毒抗病毒
- 多重PCR检测猪伪狂犬病病毒、猪繁殖与呼吸综合征病毒和猪流感病毒被引量：18
- 2006年
- 应用Primer3.0和Omega2.0,根据猪伪狂犬病毒(PRV)、猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)和猪流感病毒(SIV)保守基因设计了3对多重PCR引物,建立PRRSV,SIV和PRV单项PCR检测方法,并在优化单项PCR反应条件(引物浓度、Mg2+浓度、退火温度等)基础上,初步建立了PRRSV-PRV-SIV多重PCR检测方法,并分别用多重PCR和单项PCR/RT-PCR检测10份临床病料,两者符合率为96.6%,表明该多重PCR检测方法有较高的敏感度,可以用于临床病料的检测。
- 黄良宗顾万军王淑敏冼琼珍
- 关键词：伪狂犬病病毒猪繁殖与呼吸综合征病毒猪流感病毒多重PCR
