中国博士后科学基金(20080440214)
- 作品数：2 被引量：4H指数：1
- 相关作者：张志晓叶锋平范泉水郑颖杨彦更多>>
- 相关机构：成都军区疾病预防控制中心云南农业大学中国医学科学院北京协和医学院更多>>
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- 相关领域：医药卫生更多>>
- 尖吻蝮蛇蛇毒金属蛋白酶cDNA序列抗原位点分析及免疫保护效果观察被引量：4
- 2010年
- 目的采用生物信息学方法分析尖吻蝮蛇蛇毒金属蛋白酶cDNA序列的关键抗原位点,并观察根据这些位点设计合成的新型免疫原的免疫保护效果。方法扩增尖吻蝮蛇蛇毒金属蛋白酶cDNA序列,采用Jameson-Wolf方法和ClustalX软件结合的生物信息学方法分析其抗原位点,人工合成筛选的抗原位点序列,并连接到pIRESneo表达载体,3次(0、2、4周)对BALB/c小鼠进行核酸免疫,ELISA法测定免疫后机体抗体水平,出血中和实验和攻毒实验初步观察其免疫保护效果。结果生物信息学方法分析得到6个关键抗原位点(MPA-1～MPA-6);ELISA法检测抗血清结果表明,抗原位点序列诱导小鼠产生的抗血清相对未免疫的小鼠血清稀释100倍后仍能表现出阳性结果;出血中和实验和攻毒实验表明,将抗原位点序列免疫小鼠可以诱导机体产生免疫反应,使体内产生抗体,能有效中和蛇毒,从而对尖吻蝮蛇蛇毒引起的出血有防护作用。结论用生物信息学方法成功获得尖吻蝮蛇蛇毒金属蛋白酶cDNA序列的6个关键抗原位点,针对这些位点设计合成的新型免疫原展示出初步免疫保护效果。
- 张志晓杨彦叶锋平范泉水李东江张希符云新郑颖
- 关键词：尖吻蝮蛇蛇毒液类
- 尖吻蝮蛇毒金属蛋白酶多表位抗原肽的原核表达和免疫原性研究
- 2013年
- 目的研究人工合成的尖吻蝮蛇毒金属蛋白酶抗原位点的原核表达蛋白对小鼠的免疫效果。方法将人工合成的尖吻蝮蛇毒金属蛋白酶关键抗原位点序列连接到表达载体pET-28a(+)进行原核表达,溶解的包涵体蛋白免疫Balb/c小鼠,用ELISA法检测抗体水平,并进行出血中和实验和攻毒实验,观察其免疫保护效果。结果成功表达蛇毒金属蛋白酶抗原位点重组蛋白,诱导表达的蛋白免疫小鼠能使小鼠产生中和抗体,ELISA检测抗体表明,抗血清稀释10倍后相对对照组结果为阳性;皮下注射尖吻蝮蛇毒,免疫小鼠的出血面积显著减少;在全数致死剂量的尖吻蝮蛇毒攻毒下,实验组3只小鼠存活2只。结论原核表达的蛇毒金属蛋白酶多表位抗原肽免疫后能够有效刺激小鼠的免疫应答反应,产生中和尖吻蝮蛇毒的抗体。
- 吴梦叶锋平张志晓崔庆华胡挺松张富强邱薇郭平范泉水郑颖
- 关键词：尖吻蝮蛇金属蛋白酶原核表达
