国家自然科学基金(30840042)
- 作品数：9 被引量：76H指数：5
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- 罗格列酮抑制糖基化终产物诱导大鼠血管平滑肌细胞钙化机制被引量：1
- 2011年
- 目的探讨罗格列酮抑制糖基化终产物(AGEs)诱导大鼠血管平滑肌细胞(VSMCs)钙化的可能机制。方法在含10 mmol·L^(-1)β-甘油磷酸培养液中加入200 mg·L^(-1)的AGEs及不同浓度(10^(-7)～10^(-5)mol·L^(-1))的罗格列酮体外培养VSMCs,采用甲-酚酞络合酮方法测定细胞钙含量,real time-PCR检测肿瘤坏死因子α(Tnf-α)、白细胞介素6(Il-6)及糖基化终产物受体(Rage)mRNA表达,Western blotting检测Rage蛋白表达,ELISA法检测细胞上清Tnf-α、Il-6水平。结果 AGEs可使VSMCs钙含量增加,Tnf-α、Il-6及Rage mRNA和蛋白表达增加(P<0.01);罗格列酮组均可降低VSMCs细胞层钙含量,抑制上述影响(P<0.05)。结论罗格列酮可能通过抑制VSMCs Rage表达,降低Tnf-α、Il-6表达和分泌,减轻AGEs诱导的VSMCs钙化。
- 任晓妹任利群邵华魏芹刘乃丰
- 关键词：钙质沉着症罗格列酮
- 糖基化终末产物促进大鼠血管平滑肌细胞钙化被引量：18
- 2009年
- 目的观察糖基化终末产物对体外培养的血管平滑肌细胞钙化的影响。方法在含10 mmol/Lβ-甘油磷酸钠培养液中加入不同浓度(0、50、100、200 mg/L和400 mg/L)的糖基化终末产物与大鼠血管平滑肌细胞孵育不同时间。采用磷酸苯二钠法检测碱性磷酸酶活性,甲-酚酞络合酮方法测定钙含量,实时定量逆转录聚合酶链反应检测成骨细胞特异性核心结合因子、碱性磷酸酶以及骨桥蛋白基因表达,蛋白免疫印迹检测成骨细胞特异性核心结合因子及骨桥蛋白蛋白表达。结果与对照组相比,糖基化终末产物随作用时间延长和浓度增加,细胞钙含量增加(P<0.05),升高碱性磷酸酶活性和基因表达(P<0.05),促进成骨细胞特异性核心结合因子及骨桥蛋白基因及蛋白表达(P<0.01)。结论糖基化终末产物可促进体外培养的大鼠血管平滑肌细胞钙化。
- 任晓妹刘乃丰郭秀芳魏芹
- 关键词：糖基化终末产物血管平滑肌细胞细胞钙化
- 血管钙化形成与消退机制的新进展被引量：13
- 2010年
- 血管钙化是由于高钙磷环境以及局部或全身矿化诱导子上调、抑制子下调所导致的骨特异性羟基磷灰石结晶主动沉积在血管壁的病理过程。在这一过程中,血管壁矿化防御机制被耗竭,平滑肌细胞等间叶细胞丢失原有表型而获得成骨表型,释放矿化脂质小泡。脂质小泡(在动脉壁至少存在基质小泡和凋亡小体两种形式)为钙化结晶提供了合适的成核微环境,而血管壁弹性蛋白则为羟基磷灰石沉积提供了支架结构。因此在钙沉积(成骨细胞样细胞介导)与钙吸收(破骨细胞样细胞介导)之间的平衡被打破后,血管壁内膜、中膜或主动脉瓣膜就可能形成异位钙化。针对钙化形成的机制及钙化危险因素进行干预和调控,有可能对血管钙化的逆转和消退带来有益的影响,尤其是对钙化灶内破骨细胞或破骨细胞样细胞数量与活性的上调可能是一个更有效的治疗策略。但由于骨-血管轴钙化异象的存在,如何将正位骨形成与异位钙吸收有机的协调在一起尚是今后研究的一个难题。
- 王中群刘乃丰
- 关键词：钙化弹性蛋白平滑肌细胞破骨细胞
- 血管钙化的病理分型及临床新进展被引量：11
- 2011年
- 血管钙化是动脉粥样硬化（AS）、糖尿病、慢性肾病等多种疾病状态下血管病理学改变的一个显著特征，表现为钙盐在细胞介导下主动沉积于血管组织的一种高度可调可逆转过程。
- 王中群刘乃丰
- 关键词：动脉粥样硬化钙代谢障碍超声心动描记术钙质沉着症
- 细胞凋亡与动脉粥样硬化关系的研究进展被引量：23
- 2010年
- 细胞凋亡是指机体细胞在正常生理或病理状态下发生的一种自发的程序化死亡过程,细胞凋亡途径的失控会引发相关疾病。目前认为,细胞凋亡是动脉粥样硬化病变的独立危险因素。动脉粥样硬化斑块内细胞过度凋亡,在促进不稳定斑块形成的过程中起着重要的作用。本文就血管内皮细胞、血管平滑肌细胞及巨噬细胞凋亡与动脉粥样硬化的关系及细胞凋亡对粥样斑块稳定性影响方面的研究作一综述。
- 方丽娟刘乃丰
- 关键词：细胞凋亡动脉粥样硬化斑块稳定性
- 冠心病与外周动脉硬化的相关性研究被引量：1
- 2010年
- 目的:以超声观测颈动脉(CA)、股动脉(FA)、髂总动脉(CIA)和胸部X线片观测主动脉弓(AA)的动脉硬化(AS),评价其与冠心病(CHD)之间的关联性。方法:对74例冠状动脉造影(CAG)受检者行体表动脉超声及胸部X线片检测,观测CA、FA、CIA及AA的AS,并以此同CAG结果进行比较分析。结果:(1)CHD组病例外周动脉IMT比对照组显著增厚(P<0.05);(2)CHD组与对照组间外周动脉斑块检出率差异显著(P<0.05)。(3)半定量斑块级别增加与冠脉病变增加之间显著相关(P<0.05)。(4)CHD组与对照组间AA钙化检出率差异显著(P<0.05);(5)CA斑块、FA斑块、CIA斑块和AA钙化联合检测来评价CHD的价值高于单独检测。结论:外周动脉AS和AA钙化的检测有助于对CHD的总体评估。胸部X线片可用于检测AA钙化,而高分辨率超声是检测外周动脉AS的有效方法。
- 刘元税李华梅马根山冯毅沈成兴刘乃丰
- 关键词：外周动脉动脉硬化斑块钙化冠状动脉硬化性心脏病
- 罗格列酮抑制糖基化终产物诱导心肌成纤维细胞增殖和结缔组织生长因子及Smad的表达被引量：4
- 2010年
- 目的 探讨糖基化终产物（AGE）对培养乳鼠心肌成纤维细胞增殖、结缔组织生长因子（CTGF）和Smad2、Smad4蛋白表达的影响及罗格列酮的干预作用.方法 采用胰酶消化法和差速贴壁分离法获取心肌成纤维细胞,应用MTT法、流式细胞仪法分别观察不同浓度AGE及罗格列酮对心肌成纤维细胞的细胞增殖、细胞周期的影响,ELISA方法 检测细胞培养上清中TGF-β1水平,Westem印迹技术检测CTGF及Smad2、Smad4蛋白质表达.结果 在一定浓度范围内,AGE干预心肌成纤维细胞,随浓度的增加,细胞增殖更加显著,TGF-β1分泌增加,CTGF蛋白表达增加.罗格列酮（0.1、1、10μmoVL）干预后,随浓度的增加,抑制心肌成纤维细胞增殖（分别为0.823±0.072、0.785±0.060、0.601±0.081对0.981±0.049,P〈0.05）、抑制心肌成纤维细胞分泌TGF-β1（分别为257.77±9.09、230.29±6.56、200.84±10.26对300,68±8.56,P〈0.01）、抑制CTGF蛋白表达的作用都更加显著（分别为0.769±O.108、0.590±0.095、0.534±0.115对1.021±0.113,P〈0.01）.罗格列酮（1和10μmol/L）干预后可显著减少AGE诱导的Smad2的蛋白表达（分别为0.424±0.059对0.572±0.073,P〈0.05;0.396±0.080对0.572±0.073,P〈0.01）,同时可显著减少AGE诱导的Smad4的蛋白表达（分别为0.580±0.063对0.672±0.059,P〈0.05;0.556±0.051对0.672±0.059,P〈0.01）.结论 AGE刺激心肌成纤维细胞增殖及分泌TGF-β1,同时诱导CTGF、Smad2及Smad4蛋白表达,罗格列酮在一定程度上抑制AGE上述作用,表明罗格列酮抑制心肌成纤维细胞增殖的效应与CTGF/Smad通路密切相关.
- 李洁刘乃丰魏芹
- 关键词：罗格列酮糖基化终产物心肌成纤维细胞结缔组织生长因子SMAD
- 二甲双胍对糖基化终产物诱导血管平滑肌细胞钙化的抑制作用被引量：5
- 2011年
- 目的:在细胞水平观察二甲双胍对晚期糖基化终产物(AGEs)诱导的血管平滑肌细胞钙化的抑制作用。方法:应用大鼠血管平滑肌细胞株(A7R5)进行体外实验,分别设对照组、牛血清白蛋白(BSA)组、AGE-BSA组、二甲双胍与AGE-BSA共干预组。将200 mg.L-1 AGE-BSA与不同浓度(10-4、5×10-5、10-5 mol.L-1)的二甲双胍在含10 mmol.L-1β-甘油磷酸的钙化培养液中共培养血管平滑肌细胞,观察不同浓度二甲双胍对血管平滑肌细胞钙化的影响。采用全自动生化分析仪测定细胞层钙含量,磷酸苯二钠法检测碱性磷酸酶活性,RT-PCR检测骨形成蛋白-2(BMP-2)mRNA表达,Western blotting检测BMP-2蛋白表达。结果:与对照组相比较,AGE-BSA组细胞层钙含量增加,碱性磷酸酶活性升高,细胞BMP-2 mRNA表达升高,BMP-2蛋白表达增加(P<0.01);不同浓度二甲双胍与AGE-BSA共干预可降低AGEs诱导的上述指标升高。结论:AGE-BSA可促进血管平滑肌细胞钙化,二甲双胍可剂量依赖性地抑制AGE-BSA诱导的钙化促进作用。
- 方丽娟刘乃丰
- 关键词：二甲双胍糖基化终产物血管平滑肌细胞骨形成蛋白-2
- 糖尿病大鼠钙化血管中Msx2和Wnt3a的表达被引量：4
- 2010年
- 目的研究糖尿病对血管钙化的影响及Msx2和Wnt3a基因在钙化血管中的表达变化。方法将48只雄性Wistar大鼠随机分为四组:维生素D3和尼古丁诱导的单纯血管钙化组(n=12)、链脲佐菌素诱导的单纯糖尿病组(n=12)、链脲佐菌素联合维生素D3和尼古丁诱导的糖尿病合并血管钙化组(n=12)和正常雄性Wistar大鼠为正常对照组(n=12)。测定大鼠血糖、血清胰岛素、总胆固醇和甘油三酯水平,以血管von Kossa染色、血管钙含量和碱性磷酸酶活性作为判断血管钙化程度的指标,测定大鼠血管中Msx2和Wnt3a mRNA的表达。结果与正常对照组相比,单纯血管钙化组大鼠血管中Msx2和Wnt3a mRNA相对表达量有所升高(P<0.05),但血管钙含量和碱性磷酸酶活性无明显变化。与正常对照组及单纯血管钙化组相比,糖尿病合并血管钙化组大鼠的血管中,可见沿中膜弹力层内广泛分布的钙盐沉积,大鼠血管中钙含量和碱性磷酸酶活性以及血管内Msx2和Wnt3amRNA相对表达量明显增高(P<0.05)。结论糖尿病可以明显加速血管钙化的发生和发展。在糖尿病大鼠钙化血管中,骨形成过程中的转录因子Msx2和Wnt3a表达增高,提示血管钙化是一个类似于骨形成的过程,Msx2和Wnt3a参与血管钙化病变的发生。
- 谈君任晓妹刘乃丰
- 关键词：糖尿病血管钙化WNT3A
