重庆市自然科学基金(2008BB5015)
- 作品数：1 被引量：2H指数：1
- 相关作者：孙中义梁培禾靳凤烁张克勤聂志林更多>>
- 相关机构：第三军医大学大坪医院更多>>
- 发文基金：重庆市自然科学基金国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 人PSCA基因真核载体的构建与表达被引量：2
- 2009年
- 目的克隆人PSCA(prostate stem cell antigen)分子的cDNA,构建PSCA基因的真核表达载体,并在体外进行表达和鉴定。方法从PSCA阳性细胞系LNCaP中提取总RNA,逆转录为cDNA。根据编码人PSCA的基因序列设计引物,以cDNA为模板,采用PCR技术扩增PSCA基因,将该基因插入到pcDNA3.1(+)真核载体,构建pcDNA3.1(+)-PSCA表达质粒。经限制性酶切鉴定和DNA序列测定结果证实后,将重组质粒pcDNA3.1(+)-PSCA转染Hela细胞,检测其体外瞬时表达。结果测序证实得到人PSCA基因序列,序列分析显示没有发生无义突变。RT-PCR和免疫细胞化学分析结果分别表明转染细胞有目的基因和分子的表达。结论成功克隆人PSCA基因,并在真核细胞中获得表达,为进一步构建基于PSCA的肿瘤疫苗奠定了基础。
- 张克勤聂志林梁培禾孙中义李彦锋靳凤烁
- 关键词：PSCA前列腺癌DNA疫苗
