山东省自然科学基金(Y2006C125)
- 作品数:7 被引量:25H指数:4
- 相关作者:孙钦峰杨丕山杜芳吴婷徐岩更多>>
- 相关机构:山东大学南京市口腔医院徐州医学院更多>>
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- 相关领域:医药卫生生物学更多>>
- 超声介导微泡破裂法促进外源性基因在小鼠NIH3T3细胞中的表达被引量:4
- 2008年
- 目的观察超声介导微泡破裂法对目的基因重组人骨形态发生蛋白-2(hBMP-2)转染靶细胞NIH3T3效率的影响。方法复苏NIH3T3细胞并传至3~4代,待细胞生长状态良好后接种至六孔培养板;将六孔板中细胞随机分为2组,分别采用质粒DNA和脂质体法(脂质体组),质粒DNA、超声和微泡法(超声介导微泡破裂组)转染目的基因;转染24~48h后在荧光倒置显微镜下对各组细胞分别计数以计算转染效率,并采用ELISA实验测定转染后hBMP-2蛋白质量浓度;使用SPSS11.5软件包分析实验结果。结果脂质体组的转染效率为(7.30±1.58)%,超声介导微泡破裂组为(11.77±3.16)%(P<0.05);脂质体组转染后hBMP-2蛋白质量浓度为(1164.35±724.67)pg/mL,超声介导微泡破裂组为(2932.70±656.27)pg/mL(P<0.05)。结论超声介导微泡破裂法可以明显提高外源性基因hBMP-2在体外NIH3T3细胞中的转染效率和蛋白质量浓度,可以为牙周再生基因治疗提供一种新型基因转移系统。
- 孙钦峰刘玉杨丕山杜芳
- 关键词:超声微泡人骨形态发生蛋白-2基因治疗
- 超声微泡破裂法促进骨形态发生蛋白-2在小鼠骨骼肌表达的研究被引量:4
- 2009年
- 目的探讨超声微泡破裂法对基因重组人骨形态发生蛋白-2(rhBMP-2)质粒pIRES-rhBMP2-EGFP在小鼠骨骼肌的转染、表达的促进作用。方法24只BALB/c小鼠随机分为4组,每组6只。A组和B组选择右侧胫前肌为注射点,其中A组注射质粒,B组注射质粒与微泡造影剂混合物后用超声辐照,质粒注射量为30μg;C组和D组选择右侧股四头肌为注射点,其中C组注射质粒,D组注射质粒和微泡造影剂混合物后用超声辐照,质粒注射量为100μg。7d后处死A组和B组小鼠,取胫前肌在荧光显微镜下观察绿色荧光蛋白的表达情况;14d后处死C组和D组小鼠,取股四头肌行免疫组化检测rhBMP-2表达情况。结果7d后B组阳性肌纤维百分率高于A组(P<0.05);14d后,C组和D组都可检测到rhBMP-2的表达,但D组rhBMP-2表达量比C组多。结论超声介导微泡破裂法能增加外源性rhBMP-2基因在小鼠体内骨骼肌转染率和表达水平,有望为牙周病的基因治疗提供一种新型方法。
- 孙钦峰杜芳徐岩杨丕山
- 关键词:超声微泡基因治疗人骨形态发生蛋白-2
- 白细胞介素与牙周炎的研究进展被引量:7
- 2009年
- 白细胞介素(Interleukin)是非常重要的细胞因子家族,它们在免疫细胞的成熟、活化、增殖和免疫调节等一系列过程中均发挥重要作用。近年来许多研究发现,白细胞介素在牙周炎的免疫发病机制中发挥着重要作用。深入研究白细胞介素和牙周炎的关系,对牙周炎的病因研究、预防、治疗以及预后判断有深远意义。
- 吴婷孙钦峰
- 关键词:白细胞介素牙周炎基因多态性
- 苯妥英钠致牙龈增生机制的研究进展被引量:6
- 2009年
- 苯妥英钠是临床上常用的抗癫痫药物,其主要副作用是引起牙龈增生,严重者对患者口腔的美观和功能造成影响,但是其发病机制尚不十分明确。本文从其对牙龈成纤维细胞、胶原代谢平衡以及对细胞因子的影响等方面进行综述。
- 张延慧孙钦峰杨丕山
- 关键词:苯妥英钠牙龈增生发病机制
- 患者依从性对慢性牙周病治疗的影响及因素分析被引量:3
- 2009年
- 目的分析牙周炎患者依从性的影响因素。方法调查93例已进入牙周支持治疗阶段的慢性牙周炎患者,根据其依从性的程度,分为完全依从性组和不稳定依从性组,记录简化软垢指数、简化牙石指数、菌斑指数、探诊出血指数;同时进行问卷调查,分析影响患者依从性的因素。结果患者对牙周病的认知程度是影响依从性最重要的因素,年龄也对依从性有很大的影响。但是性别、收入、付费方式、文化程度等对依从性无明显影响。结论医生应对患者进行完善细致的口腔卫生宣教,努力提高患者的认知程度,增强患者的依从性,有利于牙周炎疗效的长期稳定。
- 鲍煊孙钦峰徐岩
- 关键词:牙周病依从性
- 含增强型绿色荧光蛋白rhBMP-2基因真核表达载体的构建被引量:2
- 2007年
- 目的:构建含增强型绿色荧光蛋白的重组人骨形成蛋白-2(rhBMP-2)基因真核表达质粒。方法:采用PCR方法扩增rhBMP-2基因,并在两端添加合适的酶切位点;利用定向克隆技术将rhBMP-2基因和增强型绿色荧光蛋白(EGFP)基因分别插入到载体pIRES的上下游多克隆位点中,两者通过IRES连接,以防止融合表达;重组的pIRES-rhBMP2-EGFP在大肠杆菌DH5α内扩增后,通过酶切电泳鉴定和DNA测序证明质粒构建成功。结果:通过对重组质粒pIRES-rhBMP2-EGFP进行酶切鉴定以及DNA序列测定分析,证明真核表达重组质粒pIRES-rhBMP2-EGFP构建成功,开放阅读框架正确。结论:利用PCR、T/A克隆等分子生物学技术,可成功地将编码rhBMP-2的DNA片段和EGFP片段克隆到载体pIRES中,构建出重组子pIRES-rhBMP2-EGFP。
- 刘玉孙钦峰杨丕山杜芳
- 关键词:绿色荧光蛋白
- 辅助性T细胞1和2与牙周病的关系被引量:1
- 2009年
- CD4+T细胞是具有免疫活性的T细胞,是机体重要的免疫调节细胞,根据其产生细胞因子的不同分为辅助性T细胞1和2(Th1和Th2)2种亚型,Th1和Th2可相互调节,影响免疫应答。在一个正常的免疫应答中,Th1和Th2是处于动态平衡的。牙周破坏常发生于局部环境中Th1和Th2应答的失衡。任何以Th2主导的保护性应答和以Th1主导的破坏性应答的平衡转变,都可成为牙周病始发和进展的危险因素。
- 吴婷孙钦峰杨丕山
- 关键词:辅助性T细胞牙周病免疫治疗