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玉米PDI基因cDNA的克隆及生物信息学分析被引量：5: 2008年; 利用RT-PCR技术,从玉米花丝中克隆得到了玉米蛋白质二硫键异构酶(PDI)基因cDNA编码序列(GenBank登录号为EF532321)。生物信息学技术分析表明:该序列开放阅读框为1 542个碱基,编码513个氨基酸,组成的蛋白质分子式C2577H3980N648O771S11,分子量为56.7 kDa,等电点pI为5.01。基因进化树分析表明玉米中的PDI基因与水稻中的PDI基因具有较近的亲缘关系。亚细胞定位预测分析表明,该基因编码的蛋白定位于细胞的内质网。; 王秀堂黄亚群李会勇石云素宋燕春黎裕王天宇; 关键词：玉米蛋白质二硫键异构酶克隆生物信息学

应用实时荧光定量PCR技术分析玉米水分胁迫诱导基因的表达模式被引量：24: 2007年; 应用实时荧光定量PCR(real-time quantitative PCR)技术,研究了玉米中10个水分胁迫诱导基因的相对表达量及表达模式。结果表明,在花丝中,除基因Mads和Grp外,其他8个基因均随干旱胁迫程度加重,相对表达强度增加;在幼穗中,除基因Mads外,其他9个基因均随干旱胁迫程度加重,相对表达强度增加。应用实时荧光定量PCR和宏阵列技术的研究表明,在水分胁迫条件下,基因Arf3、Mads、Trx和F15相对表达量较高,可能在玉米应答水分胁迫过程起更重要的作用。; 张中保李会勇石云素宋燕春黎裕王天宇; 关键词：实时荧光定量PCR 玉米水分胁迫

应用抑制差减杂交法分离玉米幼苗期叶片土壤干旱诱导的基因被引量：8: 2007年; 【目的】分离土壤干旱胁迫条件下玉米幼苗期叶片诱导表达的基因。【方法】本研究利用抑制差减杂交(suppression subtractive hybridization,SSH)的方法,以耐旱自交系CN165为材料,构建了土壤干旱胁迫下玉米幼苗叶片的正向抑制差减cDNA文库。【结果】在这个文库中,随机挑取了672个阳性克隆,并进行PCR验证,对所有的单克隆进行了测序。得到了598个有效序列,经过EST聚类分析后,共得到了80个uniESTs。其中57个为contigs。23个为singlets。BLASTN的结果表明,所有的uniESTs都可以在玉米的核酸数据库中找到同源序列。BLASTX的结果表明:68个uniESTs和已知功能的蛋白有高度的相似性,8个uniESTs为未知功能蛋白和假定蛋白,4个uniESTs没有蛋白质的相似性。【结论】在这个cDNA文库中发现了大量抗旱相关的基因,这些基因涉及到植物代谢的多种途径。; 李会勇黄素华赵久然王凤格张中保毛毅辉王秀堂石云素宋燕春王国英黎裕王天宇; 关键词：玉米干旱诱导耐旱基因

玉米液泡ATP酶亚基A基因的克隆及表达分析被引量：3: 2008年; V-ATPase在植物应对非生物胁迫中起着十分重要的作用,对其关键亚基基因的克隆及分析有助于阐释其在逆境下的调节及响应机制。本文利用RACE技术从玉米自交系CN165花期水分胁迫下的总RNA中克隆出液泡ATP酶亚基A基因,命名为ZmVHA-A。该基因cDNA全长2414bp,含5′-UTR(293bp)、3′-UTR(257bp)及编码区(1863bp),编码620个氨基酸。序列比对及结构域预测结果表明,ZmVHA-A基因编码的氨基酸序列与亲缘关系比较接近的禾本科作物如水稻、小麦和大麦的氨基酸序列同源性分别达92.7%、89.8%和89.8%,且在编码蛋白的氨基酸序列上有两个与核苷酸的磷酸基团相互作用的保守结构域"GAFGCGKT"和"PSVNWLISYS",可见该亚基是相对保守的。Northern杂交分析结果表明,ZmVHA-A基因在花丝中被水分胁迫诱导表达且在苗期对盐胁迫、冷处理和ABA处理具有不同的表达响应方式,因此认为VHA-A基因是一个比较保守的功能亚基,并且通过转录表达调节参与了V-ATPase对逆境胁迫的适应。; 毛毅辉李会勇王天宇荣廷昭石云素宋燕春刘颖慧黎裕; 关键词：RACE 胁迫玉米

玉米V-ATPase B亚基基因(ZmVHA-B)的克隆及其表达分析被引量：3: 2009年; 根据玉米基因组数据MaizeGDB(http://www.maizegdb.org/)已经公布的玉米VHA-B(V-ATPase subunit B)基因的mRNA序列(AY104180),从干旱处理玉米材料CN165的花丝中利用RT-PCR技术获得VHA-B基因的编码序列,并进行了序列分析和Northern杂交分析。结果表明:VHA-B基因编码487个氨基酸,含有1个保守的ATP结合位点,其编码的蛋白分子量为54.09kD,等电点为4.99。氨基酸同源性分析表明:V-ATPase B亚基是一个较为保守的蛋白亚基。Northern杂交结果表明:在干旱处理下,B亚基存在两个不同的转录本,它们对干旱的响应不同;在盐胁迫下,同样也存在两个转录本,它们都对盐胁迫做出了响应;在冷处理下,仅存在1个转录本,且它的表达较强,仅仅在6h有一些微小地反复;在ABA处理下,也仅存在1个转录本,处理1h后表达明显上调,此后一直保持较高的表达水平。玉米VHA-B基因对花期干旱有响应,但在花丝和雌穗中的表达响应方式不同,在花丝中干旱诱导表达明显,而在雌穗中存在表达没有明显差异的两个转录本。; 毛毅辉王天宇荣廷昭石云素宋燕春黎裕; 关键词：玉米 V-ATPASE 低温胁迫干旱胁迫

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国际科技合作与交流专项项目(0502)