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国家自然科学基金(81360199)

作品数：31 被引量：60H指数：5
相关作者：禹文峰官志忠吴昌学杨梅董智慧更多>>
相关机构：贵州医科大学贵阳医学院贵阳中医学院更多>>
发文基金：国家自然科学基金教育部科学技术研究重点项目贵州省国际科技合作计划更多>>
相关领域：医药卫生更多>>

文献类型

  • 31篇中文期刊文章

领域

  • 31篇医药卫生

主题

  • 21篇细胞
  • 11篇蛋白
  • 11篇星形
  • 11篇星形胶质
  • 11篇星形胶质细胞
  • 11篇胶质
  • 11篇胶质细胞
  • 8篇凋亡
  • 8篇多巴
  • 8篇多巴胺
  • 7篇帕金森
  • 6篇胆碱
  • 6篇胆碱能
  • 6篇胆碱能受体
  • 6篇受体
  • 6篇帕金森病
  • 5篇淀粉样
  • 4篇淀粉样蛋白
  • 4篇热休克
  • 4篇羟化酶

机构

  • 30篇贵州医科大学
  • 1篇贵州大学
  • 1篇贵阳中医学院
  • 1篇贵阳医学院

作者

  • 29篇禹文峰
  • 19篇官志忠
  • 16篇吴昌学
  • 8篇杨梅
  • 6篇董智慧
  • 5篇焦玲
  • 4篇韩飞
  • 3篇张春林
  • 3篇何婧
  • 2篇刘颖
  • 2篇周波
  • 1篇罗坤
  • 1篇孔欣
  • 1篇汤婷婷
  • 1篇周冰峰

传媒

  • 18篇贵州医科大学...
  • 4篇贵阳医学院学...
  • 3篇中国老年学杂...
  • 2篇中风与神经疾...
  • 1篇神经解剖学杂...
  • 1篇中国细胞生物...
  • 1篇中华地方病学...
  • 1篇Curren...

年份

  • 1篇2022
  • 5篇2021
  • 6篇2020
  • 4篇2019
  • 1篇2018
  • 7篇2017
  • 6篇2016
  • 1篇2014
共 31 条 记 录，以下是 1-10
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排序方式：
激活原代星形胶质细胞α7尼古丁胆碱能受体对PI3K/Akt/HSP70信号通路的影响被引量：2
2019年
目的研究尼古丁激活星形胶质细胞α7尼古丁胆碱能受体(nAChR)对热休克蛋白(HSP)70表达的影响,探讨激活α7nAChR对阿尔茨海默病(AD)的神经保护作用及其机制。方法从刚出24 h内的小鼠的大脑皮质中分离出原代星形胶质细胞,培养并进行细胞纯度鉴定。将培养好的星形胶质细胞分为空白对照组、尼古丁组、α7nAChR阻断剂MLA组、MLA+尼古丁组、PI3K/Akt信号通路阻断剂LY294002组和LY294002+尼古丁组。用Western印迹法检测细胞内HSP70及P-Akt蛋白的表达情况。结果与对照组相比,尼古丁组中HSP70的表达水平显著升高(P<0.01);与尼古丁组相比,MLA+尼古丁组中HSP70蛋白表达水平受到明显抑制(P<0.05);LY294002+尼古丁组中HSP70蛋白表达水平明显受到抑制(P<0.05);且尼古丁可以显著上调P-Akt蛋白水平(P<0.05),该上调效应能被MLA或LY294002抑制(P<0.05)。结论尼古丁激活星形胶质细胞α7nAChRs,可通过PI3K/Akt信号通路上调HSP70蛋白表达水平。
董智慧吕菊谢鹏任真奎官志忠禹文峰
关键词：热休克蛋白70星形胶质细胞
Deprivation/Reperfusion-induced Apoptosis by Inhibiting Endoplasmic Reticulum Stress and Autophagy in PC12 Cells被引量：4
2020年
This study aimed to elucidate the molecular mechanisms by which berberine protects against cerebral ischemia/reperfusion(I/R)injury.The oxygen-glucose deprivation/reperfusion(OGD/R)PC12 model was established.Cell counting kit-8(CCK-8)was used to detect the toxicity of berberine and the viability of PC12 cells.Hoechst 33258 staining and flow cytometry were used to observe the nuclear morphology,and changes of apoptosis and reactive oxygen species(ROS),respectively.Western blotting and immunofluorescence assay were employed to detect autophagy-related proteins[microtubule-associated protein 1A/1B-light chain 3(LC3),P62/SQSTM-1,Beclin-1]and endoplasmic reticulum(ER)stress-related markers[glucose-regulated protein 78(GRP78),C/EBP homologous protein(CHOP),Bcl-2-associated X(Bax)and cleaved caspase-3].The GFP-RFP-LC3 adenovirus was used to assay the change of autophagic flux.Our results showed that berberine could increase the viability of PC12 cells,decrease the concentrations of ROS after OGD/R treatment,and suppress OGD/R-induced ER stress and autophagy.Moreover,the results revealed the involvement of the mammalian target of rapamycin(mTOR)pathway in the induction of autophagy,and berberine could activate the phosphorylation of mTOR and thus mitigate autophagy.In conclusion,our study suggested that berberine may protect against OGD/R-induced apoptosis by regulating ER stress and autophagy,and it holds promises in the treatment of cerebral I/R injury.
Peng XIEZhen-kui RENJu LVYu-Mei HUZhi-zhong GUANWen-feng YU
关键词：AUTOPHAGYBERBERINE
过表达Seipin对大鼠肾上腺嗜铬细胞瘤细胞凋亡的影响
2021年
目的构建Seipin过表达PC12细胞株,探讨Seipin过表达后PC12细胞的凋亡情况。方法将PC12细胞分为正常组(未经任何处理的PC12细胞)、阴性组(不带Seipin过表达基因的慢病毒感染的PC12细胞株)和过表达组(带Seipin过表达基因的慢病毒感染的PC12细胞株);进行相应处理后培养24 h,采用荧光显微镜观察红色荧光基因(慢病毒携带的Seipin基因和空载体都包含了红色荧光基因)在细胞中的表达,采用Real time PCR检测BSCL2 mRNA表达水平,Western blot检测凋亡相关蛋白BCL2-Associated X蛋白质(Bax)的表达水平;TUNEL染色观察细胞内断裂DNA情况。结果正常组未观察到红色荧光,阴性组和过表达组均出现红色荧光,感染效率>80%,提示成功构建Seipin过表达的PC12细胞株;Real time PCR结果显示,过表达组BSCL2 mRNA水平相较正常组和阴性组升高,差异有统计学意义(P<0.05);Western blot结果显示,过表达组Seipin蛋白表达水平高于正常组和阴性组、凋亡相关蛋白Bax低于正常组和阴性组,差异有统计学意义(P<0.01),TUNEL染色观察到过表达组细胞核荧光强度弱于正常组和阴性组。结论Seipin可能对PC12细胞有保护作用。
胡玉梅任真奎郭冬芬刘颖吴昌学禹文峰
关键词：慢病毒感染细胞凋亡TUNEL
Seipin变化对6-OHDA诱导的PC12帕金森细胞模型自噬及凋亡的影响
2021年
目的探究Seipin蛋白对6-OHDA诱导的PC12帕金森细胞模型凋亡及自噬的影响。方法PC12细胞分为正常组和加药组(加入6-OHDA构建帕金森模型细胞);将前期构建成功的Seipin敲低及其敲低对照细胞株、Seipin过表达及其过表达对照细胞株分为Seipin敲低对照组(KD-control)、Seipin敲低组(KD)、Seipin敲低对照加药组(KD-control+6-OHDA)及Seipin敲低加药组(KD+6-OHDA),Seipin过表达对照组(OE-control)、Seipin过表达组(OE)、Seipin过表达对照加药组(OE-control+6-OHDA)、Seipin过表达加药组(OE+6-OHDA);采用Western blot检测Seipin、哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mammalian target of rapamycin,mTOR)、磷酸化mTOR(p-mTOR)、自噬相关蛋白Beclin1、微管相关蛋白1A/1B-轻链3(LC3-1A/B)及凋亡相关蛋白BCL2-Associated X蛋白质(Bax)、B淋巴细胞瘤-2(Bcl-2)、裂解型半胱氨酸水解酶3(Cleved caspase-3)蛋白表达水平。结果6-OHDA处理的PC12细胞中,与正常组比较,6-OHDA处理后Seipin表达降低、p-mTOR/mTOR的比值降低、Beclin1、LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ、Bax/Bcl-2、Cleved caspase-3的表达升高(P<0.01);在Seipin敲低后,KD相较于KD-control,p-mTOR/mTOR的比值升高、自噬相关蛋白Beclin1及LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ的表达均降低,凋亡相关蛋白Bax/Bcl-2和Cleved caspase-3表达均升高(P<0.05),过表达Seipin与敲低Seipin结果相反;加药处理后KD+6-OHDA相对KD-control+6-OHDA,Seipin含量降低,p-mTOR/mTOR的比值升高、自噬相关蛋白Beclin1及LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ的表达均降低,凋亡相关蛋白Bax/Bcl-2和Cleved caspase-3表达均升高(P<0.05);在Seipin过表达组中,过表达Seipin与敲低Seipin结果相反。结论6-OHDA诱导的细胞损伤可能是通过减少Seipin蛋白的表达实现,上调Seipin蛋白的表达可对6-OHDA诱导的细胞损伤具有抑制作用。
胡玉梅郭冬芬任真奎刘颖吴昌学禹文峰
关键词：帕金森自噬凋亡
氧糖剥夺再灌注后BV2细胞中差异表达关键基因的筛选及鉴定
2022年
目的筛选氧糖剥夺再灌注后BV2细胞中差异表达的基因。方法取小鼠小胶质细胞BV2分为正常组(control组)和氧糖剥夺再灌注组(OGD/R组),对两组细胞进行转录测序筛选差异表达基因,在线网站(https://www.xiantao.love/products)对差异表达基因进行基因本体论(GO)和京都基因与基因组百科全书(KEGG)功能富集分析;数据库String(https://cn.string-db.org/)对差异表达基因进行蛋白质互作网络分析后,Cytoscape软件中选择cytoHubba插件筛选出评分较高的关键基因;实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测两组关键基因的mRNA表达水平。结果与control组比较,OGD/R组有122个基因发生明显差异表达(P<0.01),其中108个基因表达上调,14个基因表达下调;GO分析显示,122个差异表达基因与受体配体激活、静脉曲张、正调控STAT信号通路等相关;KEGG分析显示,差异表达基因主要富集到白细胞介素-17(IL-17)信号通路中;蛋白质互作网络分析筛选出差异表达基因中10个评分较高的基因;qRT-PCR结果显示,与control组比较,OGD/R组中IL-6、粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子(Csf 2)、IL-1β、丝氨酸(或半胱氨酸)肽酶抑制剂B分支成员2(Serpinb 2)mRNA表达增加(P<0.05),而粒细胞集落刺激因子(Csf 3)、Cd 40抗原(Cd 40)、前列腺素内过氧化物合酶2(Ptgs 2)、IL-10、CXC基序趋化因子配体2(Cxcl 2)以及IL-12 b mRNA表达降低(P<0.05)。结论OGD/R处理可诱导BV2细胞基因差异表达,生物信息学分析可筛选出差异表达基因中的关键基因,qRT-PCR可检测关键基因发生差异表达的情况。
郭冬芬任真奎安小琼陈明孙嫚彬吴昌学禹文峰
关键词：脑卒中BV2细胞生物信息学分析差异表达基因
尼古丁上调星形胶质细胞内源性Cryab抑制Aβ聚集的研究被引量：1
2016年
目的研究尼古丁激活星形胶质细胞α7胆碱能受体(α7 nicotinic receptors,7 n AChRs)上调内源性B-晶状体蛋白(αB-crystallin,Cryab)并抑制β淀粉样蛋白(Amyloid,Aβ)集聚的现象及其机制。方法分离24 h内新生乳鼠大脑皮质培养原代星形胶质细胞并鉴定;体外制备Aβ_(1-42)寡聚体;将细胞分为对照组、尼古丁组、α7n AChRs阻断剂(methyllycaconitine,MLA)组、Aβ_(1-42)组、尼古丁+Aβ_(1-42)组、PI3K信号通路阻断剂LY294002+尼古丁+Aβ_(1-42)组。用蛋白印迹法(Western blotting)检测细胞内Cryab、P-Akt(ser473)、Aβ寡聚体的表达水平。结果尼古丁可以显著上调星形胶质细胞内源性Cryab蛋白(P<0.05);尼古丁能够显著上调磷酸化Akt蛋白水平(P<0.05);在细胞裂解液及培养基中,尼古丁显著增强星形胶质细胞对Aβ聚集的抑制作用(P<0.01)。结论尼古丁通过激活星形胶质细胞α7 nAChRs上调内源性Cryab从而抑制Aβ集聚;PI3K/Akt信号通路可能参与尼古丁激活星形胶质细胞α7 n AChRs上调内源性Cryab蛋白抑制Aβ集聚的过程。为进一步研究尼古丁抑制Aβ集聚的可能机制提供了实验基础。
任真奎杨梅官志忠禹文峰
关键词：星形胶质细胞阿尔茨海默氏病尼古丁Β淀粉样蛋白
α7胆碱能受体激动剂PNU刺激SD大鼠星形胶质细胞钙调蛋白的表达被引量：1
2017年
目的:探讨α7胆碱能受体(α7nAChRs)激动剂(PNU)对SD大鼠星形胶质细胞钙调蛋白(CaM)表达水平的影响。方法:将培养第3~4代的星形胶质细胞分为对照组、PNU处理组(PNU组)、α7nAChRs阻断剂(MLA)联合PNU处理组(联合组);对照组不加PNU和MLA处理,PNU组以1、5及10μmol/L的PNU处理星形胶质细胞6、12、18及24 h,联合组以0.05、0.1及0.15μmol/L浓度的MLA预先处理星形胶质细胞2 h后,选择加入上调CaM蛋白表达水平最高的PNU浓度和最佳时间(PNU组筛选后所得)处理细胞;运用蛋白印迹(Western blotting)方法检测3组星形胶质细胞CaM的蛋白表达水平。结果 :与对照组比较,1、5及10μmol/L PNU刺激星形胶质细胞6、12、18及24 h可使CaM蛋白表达水平升高(P<0.05);加入5μmol/L PNU培养12 h后,上调作用最明显;联合组(0.05、0.1及0.15μmol/L的MLA预先处理星形胶质细胞2 h后,再加入PNU 5μmol/L培养12 h)与PNU组比较,星形胶质细胞裂解液中CaM蛋白的表达受到抑制,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:PNU激活星形胶质细胞后可提高CaM的蛋白表达水平,MLA可阻断该表达。
何婧任真奎官志忠禹文峰吴昌学
关键词：星形胶质细胞激动剂钙调蛋白阿尔茨海默病
星形胶质细胞α7神经型尼古丁受体激动剂Nicotine和PNU对钙调蛋白水平的影响
2017年
目的:探讨星形胶质细胞α7神经型尼古丁受体(α7nAChRs)激动剂Nicotine和PNU对钙调蛋白(CaM)表达水平的影响。方法:第3~4代乳鼠大脑星形胶质细胞分为对照组和实验组,对照组不加α7nAChRs激动剂,实验组分别加入α7nAChRs激动剂Nicotine或PNU处理细胞,Nicotine或PNU的浓度为1、5及10μmol/L,处理时间为6、12、18及24 h;采用蛋白印迹(Western blotting)方法检测Nicotine或PNU不同浓度及不同时间点细胞裂解液中的CaM蛋白水平。结果:5μmol/L Nicotine处理6、12、18及24 h和10μmol/L Nicotine处理12、18及24 h的星形胶质细胞裂解液中的CaM蛋白表达水平高于对照组(P<0.05),其余Nicotine浓度和处理时间点星形胶质细胞裂解液中CaM蛋白表达水平虽略高于对照组,但差异无统计学意义(P>0.05);浓度为1、10μmol/L的PNU处理24 h,CaM蛋白表达与对照组比较差异无统计学意义(P>0.05),其他浓度及时间点的CaM蛋白表达水平均高于对照组(P<0.05)。结论 :星形胶质细胞α7 nAChRs的激活可以使CaM的蛋白表达水平增加。
何婧任真奎官志忠禹文峰吴昌学
关键词：星形胶质细胞激动剂钙调蛋白阿尔茨海默病
蛋白激酶Cδ在6-OHDA诱导大鼠多巴胺能神经元损伤过程中的作用被引量：2
2021年
目的:探究蛋白激酶Cδ(PKCδ)对6-羟基多巴胺(6-OHDA)诱导的帕金森病(PD)模型大鼠多巴胺能神经元损伤的影响及其机制。方法:50只2月龄雄性SD大鼠,随机分为对照组(control)和6-羟基多巴胺注射组(6-OHDA)。通过大鼠右侧纹状体注射6-OHDA溶液构建PD模型。运用旋转实验和圆筒实验检测平均旋转速率和右上肢使用率,利用免疫组化染色观察大鼠黑质致密部(SNc)酪氨酸羟化酶(TH)的表达,利用Western Blot检测大鼠SNc部位线粒体中PKCδ和胞质中细胞色素c(Cyt c)及TH的表达情况,通过免疫荧光染色观察PKCδ定位。结果:6-OHDA组大鼠平均旋转速率及右上肢使用率明显增加,TH阳性神经元形态及分布异常且TH蛋白表达减少,线粒体PKCδ表达增多,胞质中Cyt c增多,免疫荧光染色显示PKCδ与线粒体蛋白发生共定位现象。结论:PKCδ可能通过线粒体转移参与调节6-OHDA诱导的大鼠多巴胺能神经元损伤。
韩飞夏克明杨斌李成朋吴昌学禹文峰
关键词：6-羟基多巴胺帕金森病
miR-214-3p对缺糖缺氧再灌注诱导PC12细胞凋亡的作用及机制被引量：1
2021年
目的探讨miR-214-3 p对缺糖缺氧再灌注诱导PC12细胞凋亡的作用及机制。方法利用数据库TargetScan 7.2预测miR-214-3 p和B淋巴细胞瘤因子2样蛋白2(BCL2L2)之间的结合位点;选取人胚肾293T细胞共转染分为BCL2L2 mRNA 3′UTR野生型荧光素酶报告载体+miR-214-3 p mimic(wt+mimic)组、BCL2L2 mRNA 3′UTR野生型荧光素酶报告载体+mimic negative control(wt+NC)组、BCL2L2 mRNA 3′UTR突变型荧光素酶报告载体+miR-214-3 p mimic(mut+mimic)组及BCL2L2 mRNA 3′UTR突变型荧光素酶报告载体+mimic NC(mut+NC组),检测4组293T细胞荧光素酶的发光活性;肾上腺嗜铬神经细胞瘤12(PC12)细胞转染miR-214-3 p mimic(mimic组)、miR-214-3 p mimic NC(mimic NC组)、miR-214-3 p inhibitor(inhibitor组),miR-214-3 p inhibitor NC(inhibitor NC组),采用蛋白免疫印迹法检测BCL2L2蛋白表达;PC12细胞作为对照(Control组),用缺氧缺糖(OGD/R)处理PC12细胞构建缺血再灌注细胞模型(OGD/R组),用miR-214-3 p mimic转染PC12细胞,然后用OGD/R处理PC12细胞(OGD/R+mimic组),采用实时荧光定量聚合酶链式反应检测Control组和OGD/R组miR-214-3 p及BCL2L2 mRNA表达,采用蛋白免疫印迹法检测Control组、OGD/R组及OGD/R+mimic组裂解胱天蛋白水解酶3(Cleaved-caspase3)、B淋巴细胞瘤-2相关X(Bax)及B淋巴细胞瘤因子2(Bcl2)的蛋白表达。结果数据库Targetscan 7.2预测结果表明,miR-214-3 p与BCL2L2的3′UTR区之间存在结合位点;荧光素酶报告基因实验结果表明,wt+mimic组荧光素酶活性低于wt+NC组,mut+mimic组和mut+NC中荧光素酶活性无明显差异;mimic NC组BCL2L2的蛋白表达高于mimic组,inhibitor NC组BCL2L2的蛋白表达低于inhibitor组(P<0.05);与Control组比较,OGD/R组PC12细胞中BCL2L2 mRNA和蛋白表达水平降低、miR-214-3 p mRNA表达升高,差异有统计学意义(P<0.05);OGD/R组Cleaved-caspase-3和Bax表达分别高于Control组、低于OGD/R+mimic组,但Bcl2表达分别低于Control组、高于OGD/R+mimic组(P<0.05)。结论过�
郭冬芬任真奎胡玉梅吴昌学禹文峰
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