山东省自然科学基金(ZR2011CQ027)
- 作品数：3 被引量：25H指数：2
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- 核基质结合区在番茄转基因表达调控中的应用
- 2011年
- 核基质结合区(matrix attachment region,MAR)的应用是提高植物基因转化和表达效率的有效方法之一。将烟草(Nicotiana tabacum)核基质结合区TM2构建在植物表达载体pBI121上报告基因GUSA表达盒和选择标记基因NPTII表达盒的两侧翼,利用农杆菌介导的子叶浸染转化番茄(Lycopersicon esculentum)。结果表明,MAR序列能够显著提高转基因植株的转化效率和转基因的表达水平。不同长度的CaMV35S启动子比较表明,TM2的调控活性依赖于启动子的存在,并且具有一定的功能重叠。热诱导型启动子的研究表明,TM2仅提高热诱导的表达强度,而不改变启动子的热诱导表达调控特性。TM2的表达调控特性符合转基因的表达要求,该MAR序列可广泛应用于各种植物的基因工程中。
- 孙爱清葛淑娟张杰道
- 关键词：农杆菌转化核基质结合区番茄
- 花生干旱胁迫响应基因的数字表达谱分析被引量：21
- 2013年
- 以抗旱性强的花生品种丰花5号为材料,利用Solexa高通量测序技术对15%PEG处理后的花生叶片cDNA文库进行差异基因表达谱分析。结果表明,转录组基因表达表现出高度的不均一性和冗余性,低于10个拷贝的标签占总标签种类的73.1%,但其表达量只占总标签表达量的9.0%。根据已知序列信息鉴定出935个差异表达基因,其中64.5%下调表达。基因功能分析表明,差异表达基因广泛涉及糖、蛋白、核酸和脂类等生物大分子代谢、能量代谢以及次生代谢过程。在花生干旱响应基因表达谱分析中,发现9个类黄酮代谢相关基因在干旱胁迫下显著上调表达,其中4个编码类黄酮合成酶类,3个编码甲基转移酶,2个编码MYB转录因子。通过半定量RT-PCR对花生苯丙氨酸解氨酶基因(AhPAL)表达分析表明,15%PEG干旱胁迫6h诱导该基因显著表达。推测类黄酮代谢在花生干旱胁迫响应中起重要作用。
- 孙爱清张杰道万勇善刘风珍张昆孙利
- 关键词：花生干旱高通量测序基因表达谱
- 花生植株类黄酮提取技术优化研究被引量：4
- 2015年
- 分别以花生叶片、根系为材料,研究提取剂、料液比、提取时间、提取温度等因素对类黄酮提取效率的影响。结果表明,花生叶片根系干样类黄酮提取的最佳条件是：以70%乙醇作为提取剂,料液比为1∶233,25℃黑暗振荡提取18h,或者70%乙醇,60℃提取1h。花生叶片鲜样类黄酮提取的最佳条件是：以无水乙醇作为提取剂,料液比为1∶40,在25℃黑暗条件下提取18h,或者80℃提取1h。最后过滤提取液,用Al（NO3）3显色法进行类黄酮含量测定。不同花生品种叶片类黄酮含量差异显著,其变异范围为2.97～11.1mg/gDW,正常生长条件下农大818、大白玉、花育20号等品种叶片类黄酮含量较高。
- 孙爱清万勇善孙利张杰道
- 关键词：花生类黄酮
