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灰树花gpd-Gf启动子的功能分析被引量：4: 2007年; 利用从灰树花菌丝体中克隆的gpd-Gf(615bp)启动子片段串联于报告基因gfp上游,构建启动子功能活性检测表达质粒pGg-gfp。采用PEG介导法把表达质粒pGg-gfp与辅助质粒pCc1001(含有trp1基因)共转化进色氨酸营养缺陷型的灰盖鬼伞粉孢子的原生质体中。经过选择培养基筛选、假定转化子的分子鉴定以及GFP荧光检测,结果表明:灰树花gpd-Gf启动子在灰盖鬼伞菌丝中具有较强驱动gfp基因表达的活性,在荧光显微镜和共聚焦显微镜下可以观察到转化子菌丝发出的强烈荧光。; 郭丽琼王秀旭舒薇柳永林俊芳; 关键词：灰树花灰盖鬼伞共转化

安全选择标记的转基因食用菌研究进展被引量：15: 2007年; 在食用菌外源基因转化过程中,目的基因的导入常需要串联易于识别的选择标记基因,用于转化子的筛选。当筛选完成后,选择标记基因特别是抗性标记基因的存在即是多余的,甚至是有害的,存在生物安全隐患。有鉴于此,本文对获得安全选择标记基因的转基因食用菌作一综述。; 赵姝娴林俊芳王杰郭丽琼; 关键词：选择标记基因生物安全性

食用菌DNA提取方法研究被引量：18: 2008年; 采用不同的方法,对白灵菇(Pleurotus nebrodensis)和赤芝(Ganoderma lucidum)的总DNA进行提取,通过对不同方法所提取到的总DNA经琼脂糖凝胶电泳和酶切鉴定分析,结果表明:不同菌种的最佳提取方法不同,白灵菇最佳提取方法是CTAB改良法,赤芝的最佳提取方法是FDEB法。; 王艺红林俊芳张炜阳郭丽琼; 关键词：白灵菇赤芝 DNA提取

木霉LaTr01菌株产漆酶发酵的条件被引量：10: 2007年; 从华南地区采集土样,采用愈创木酚平板筛选产漆酶菌株,获得了一株短周期产漆酶的小型丝状真菌。通过观察菌落特征、生长情况以及显微镜下菌丝和孢子的形态,初步鉴定该菌株为木霉属的一个种(Trichodermaspp.),命名为木霉LaTr 01菌株。通过单因素方法研究该菌产漆酶的发酵条件,结果表明:LaTr 01的产酶培养基以麦芽糖为最佳碳源;以酵母提取物为最适氮源;培养24 h后加入Cu2+比培养开始加入Cu2+LaTr 01产酶活高出约1倍。采用麦芽糖、酵母提取物、Cu2+浓度L9(33)的正交试验优化漆酶发酵条件,结果表明,氮源是影响该菌产漆酶的最重要因素,碳源次之,Cu2+浓度影响较小;LaTr 01菌株产生漆酶的最佳条件为:5 g/L酵母提取物、20 g/L麦芽糖、1.5 mmol/L Cu2+,Cu2+加入时间为培养24 h后。在优化的培养条件下,该菌酶活可达480.556 U/L。; 郑晓冰郭丽琼付小燕刁惠萍林俊芳; 关键词：木霉漆酶正交试验

灵芝TR6号漆酶的分离纯化及性质研究被引量：10: 2008年; 采用硫酸铵盐析、DEAE Sepharose Fast Flow柱层析和Sephadex G100凝胶柱层析对灵芝TR6号漆酶发酵液进行分离纯化，得到电泳纯漆酶．SDS-PAGE电泳结果显示，该漆酶表观分子量为62×10^3．Native-PAGE鉴定该漆酶由一种同工酶组成，为单体酶．试验结果表明，该漆酶的最适反应温度为60℃，与ABTS的最适反应pH为4．5，Km为0．188mmol／L，在pH6．0～8．0之间较稳定．Fe^2＋、SDS和Tris对该漆酶活性具有抑制作用，EDTA和Tween80则对该漆酶活性具有促进作用．; 韩君莉郭丽琼郑晓冰周伟坚林俊芳; 关键词：灵芝漆酶纯化酶活

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广东省科技攻关计划(2004B20101001)