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安徽省科技攻关计划(08010302179)

作品数：18 被引量：61H指数：4
相关作者：王明丽赵俊汤仁树陈敬贤王兴满更多>>
相关机构：安徽医科大学哥伦比亚大学中山大学附属第一医院更多>>
发文基金：安徽省科技攻关计划国家自然科学基金安徽省自然科学基金更多>>
相关领域：医药卫生农业科学生物学更多>>

文献类型

  • 18篇中文期刊文章

领域

  • 13篇医药卫生
  • 5篇农业科学
  • 1篇生物学

主题

  • 9篇细胞
  • 8篇巨细胞
  • 8篇病毒
  • 7篇巨细胞病毒
  • 6篇人巨细胞病毒
  • 3篇疫苗
  • 3篇重组猪Α干扰...
  • 3篇猪Α干扰素
  • 3篇免疫
  • 2篇蛋白
  • 2篇逃逸
  • 2篇疱疹
  • 2篇小鼠
  • 2篇免疫逃逸
  • 2篇抗病毒
  • 2篇抗病毒活性
  • 2篇活性
  • 2篇PP65
  • 2篇HCMV
  • 2篇病毒活性

机构

  • 18篇安徽医科大学
  • 3篇哥伦比亚大学
  • 1篇中山大学附属...
  • 1篇合肥市妇幼保...

作者

  • 18篇王明丽
  • 8篇赵俊
  • 6篇汤仁树
  • 5篇王兴满
  • 5篇陈敬贤
  • 4篇甘霖
  • 3篇俞海洋
  • 2篇任鹏
  • 2篇胡勇
  • 2篇葛俊
  • 2篇汪晓婷
  • 2篇吴琼
  • 1篇姚娟
  • 1篇金艳
  • 1篇张文昌
  • 1篇李京培
  • 1篇江龙凤
  • 1篇刘伯玉
  • 1篇李法锦
  • 1篇毛有胜

传媒

  • 5篇国际生物制品...
  • 4篇安徽医科大学...
  • 3篇安徽农业科学
  • 2篇中国生物制品...
  • 2篇微生物与感染
  • 1篇安徽医学
  • 1篇现代农业科技

年份

  • 1篇2014
  • 1篇2013
  • 2篇2012
  • 3篇2011
  • 6篇2010
  • 5篇2009
共 18 条 记 录，以下是 1-10
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排序方式：
人巨细胞病毒基因工程疫苗研究新进展
2011年
人巨细胞病毒（human cytomegalovirus，HCMV）在人群中感染普遍，而HCMV感染是导致免疫抑制或免疫缺陷患者发病率和死亡率高的重要原因，也是目前胎儿出生缺陷的主要病因。因此，研制HCMV疫苗具有重要意义。研究发现，抗病毒体液免疫应答主要针对病毒包膜糖蛋白gB，而细胞免疫应答主要针对被膜蛋白pp65。以这些蛋白设计的候选基因工程疫苗，包括亚单位疫苗、DNA疫苗、病毒载体疫苗等，已得到了较广泛的临床研究。此文就上述疫苗的研究进展做一综述。
葛俊王明丽
关键词：巨细胞病毒糖蛋白类病毒包膜蛋白质类
动物细胞培养物中支原体污染的检测被引量：14
2010年
[目的]建立检测细胞培养物中支原体快速有效的方法。[方法]从6种常见污染细胞的支原体16sRNA中选择2段高度保守的核酸序列作为引物,用PCR和DNA荧光染色法来检测实验室中25种动物细胞株。[结果]用DNA荧光染色法检测实验室中25种动物细胞株阳性率为24%,可疑阳性为16%;而用PCR法检测阳性率为36%。[结论]PCR法较DNA荧光染色法灵敏度更高、特异性更强,将2种方法结合应用效果更好。
赵俊王兴满胡勇陈敬贤王明丽
关键词：支原体细胞培养聚合酶链反应
HCMV pp65 DNA疫苗的纯化与检定
2010年
目的研究HCMV pp65 DNA疫苗（pcDNA3.1-pp65）的纯化工艺,并建立质控标准。方法对工程菌（DH5α/pcDNA3.1-pp65）的高效发酵菌体采用碱裂解法进行质粒初提;三步柱层析（依次为分子筛层析、亲和层析、阴离子层析）对质粒进行纯化,检测质粒含量、超螺旋比例、内毒素等,最后对终产品质粒溶液进行全面质量检定。结果质粒初提液通过分子筛层析后,去除了大量RNA、宿主DNA、内毒素等,再经亲和柱纯化后获得了高比例的超螺旋质粒DNA,达95%,经阴离子柱层析有效去除内毒素,质粒得率为0.8-0.95 mg/g菌,质粒总回收率达72.7%。三批终产品全面质量检定均符合规定。结论建立了稳定的HCMV pp65 DNA疫苗（pcDNA3.1-pp65）纯化工艺及质量控制标准,为进一步研究奠定了重要基础。
王兴满汤仁树赵俊陈敬贤王明丽
关键词：HCMVPP65DNA疫苗质粒纯化
MCMV感染同种异型皮肤移植小鼠间质性肺炎模型的建立被引量：1
2011年
目的建立小鼠巨细胞病毒(MCMV)经鼻腔急性感染同种异型皮肤移植BALB/c小鼠间质性肺炎模型。方法①25只供体C57BL/6雌鼠与100只受体BALB/c雌鼠背部皮肤移植后,每只小鼠腹腔注射环孢素A(CsA,12 mg/kg),连续14 d。②移植受体小鼠随机分为5组,其中4组每只鼻腔接种30μl不同剂量MCMV悬液(102、103、104、105PFU/只),另一组为正常对照组,小鼠鼻腔接种原代小鼠胚胎成纤维细胞(MEF)悬液30μl/只。在接种后第5、9、14、21天处死小鼠,无菌取肺组织分别做HE染色、透射电镜、PCR、RT-PCR检测MCMV Smith毒株的即刻早期(IE)和晚期基因糖蛋白B(gB)基因转录产物,并进行原位杂交和免疫组织化学实验。结果 104、105 PFU实验组小鼠肺组织有局灶性的病理损害,并发现感染后第14天肺组织病理改变最明显;透射电镜检测到疱疹样病毒颗粒;PCR、RT-PCR检测实验组MCMV IE和gB基因及其转录产物均为阳性;两组原位杂交和免疫组织化学检测均可见肺间质上皮细胞中存在病毒核酸和蛋白;并在感染后的21 d内,105 PFU组小鼠相比对照组有明显的临床表现。结论成功建立同种异型皮肤移植后MCMV急性感染所致的小鼠间质性肺炎模型。
倪德群赵纪强张玮甘霖陈敬贤王明丽
关键词：疾病模型动物
人巨细胞病毒相关肿瘤调节作用的研究新进展被引量：4
2011年
人巨细胞病毒(HCMV)可感染肿瘤细胞,并增加肿瘤恶性程度。最近一些研究者对恶性胶质瘤患者的临床研究发现,HCMV感染的肿瘤细胞数量与肿瘤的恶性程度有关。HCMV通过影响细胞周期进展、阻断受感染细胞凋亡、影响肿瘤细胞恶性行为等发挥肿瘤调节作用。探讨HCMV肿瘤调节作用的具体机制,对将HCMV作为肿瘤治疗的一个靶目标,拓展肿瘤预防和治疗的新思路有重要意义。本文就HCMV诱导肿瘤调节作用分子机制的研究现状作一综述。
汪晓婷王明丽
关键词：人巨细胞病毒肿瘤
人巨细胞病毒通过调控自然杀伤细胞的免疫逃逸机制研究进展被引量：1
2012年
人巨细胞病毒（human cytomegalovirus，HCMV）是疱疹病毒p亚科的DNA病毒，基因组为线状双链DNA，全长约240kb，编码200种以上基因产物。这些基因产物除参与病毒复制增殖外，还与免疫逃逸有关。HCMV感染后，宿主终身带毒并表现为持续性感染。免疫系统对HCMV有持续的选择压力，HCMV存在于宿主体内的关键是逃逸免疫清除。自然杀伤（NK）细胞是人体的固有免疫淋巴细胞，是抵抗感染和清除病变细胞的第一道防线，在体内阻止感染的发生发展中起到重要作用。NK细胞表面表达多种抑制性和激活性受体，如杀伤细胞凝集素样受体（KLR）中的CD94／NKG2C和免疫球蛋白样转录体受体1（LIR1／ILT2）为抑制性受体；NKG2D、NKp30则为激活性受体。NK细胞清除靶细胞的能力由抑制性和激活性受体所产生的抑制和激活信号的平衡所控制。HCMV感染细胞对NK细胞介导的细胞毒具有明显的抗性作用。迄今为止，已经发现HCMV7个基因（UL16、UL18、U／AO、UL83、UL112、UL141和UL142）可以编码相应产物，通过不同机制调节NK细胞抑制或激活信号，抑制NK细胞激活，从而对抗NK细胞的清除作用。
任鹏王明丽
关键词：巨细胞病毒免疫逃逸
人巨细胞病毒感染老龄小鼠的外周血T细胞亚群检测与分析被引量：1
2010年
目的在人巨细胞病毒(HCMV)感染的BALB/c小鼠模型基础上,研究小鼠细胞免疫应答状态。方法建立先天性潜伏感染的老龄小鼠(平均月龄≥18个月)模型,分别为HCMV先天性潜伏感染组(A)、先天性潜伏感染再激活组(B)及正常对照组(C),每组小鼠数均为6只。分别取各组小鼠外周血白细胞进行病毒分离、PCR和RT-PCR检测HC-MVUL83基因DNA和相应mRNA来验证模型小鼠感染状态。采用流式细胞术对小鼠外周血T细胞亚群进行检测。结果 A组和B组小鼠病毒分离出HCMV,C组为阴性。A组小鼠可以用PCR检测出HCMVUL83DNA,但RT-PCR检测不出相应的mRNA;B组小鼠用PCR、RT-PCR均可检测出相应产物;而C组均为阴性。A、B、C三组小鼠外周血中CD3+细胞构成比值分别为0.3305、0.0658和0.4318,组间差异有显著性(P<0.01);A、B、C三组中CD4+细胞的构成比值依次为0.6608、0.5998、0.6578,B组与A组及C组差异均有显著性(P<0.01),而在A组和C组间差异无显著意义(P>0.05);CD8+细胞比在A、B、C三组中的构成比值依次为0.2327、0.1150、0.1862,组间差异均有显著性(P<0.01);CD4+CD8+细胞在A、B、C三组中的比值依次为0.0990、0.1682、0.1192,组间差异有显著性(P<0.05)。结论 HCMV先天性潜伏感染及HCMV先天性潜伏感染再激活均可使老龄小鼠的细胞免疫功能降低,尤以后者显著。表明HCMV对先天性潜伏感染再激活老龄小鼠的细胞免疫状态有明显的抑制作用。
吴琼赵俊王明丽
关键词：巨细胞病毒感染
犬干扰素α的原核表达及其抗病毒活性被引量：4
2009年
目的原核表达犬重组干扰素α(rCaIFNα),并检测其抗病毒活性。方法PCR扩增CaIFNα成熟蛋白基因,并克隆至pGEX-5X-1表达载体中,转化大肠杆菌BL21(DE3),IPTG低温诱导表达。表达的重组蛋白经亲和层析纯化后,进行SDS-PAGE及Westernblot鉴定,并检测其效价及抗犬细小病毒活性。结果PCR、双酶切及序列分析证实CaIFNα成熟序列已插入pGEX-5X-1载体中。表达产物经SDS-PAGE分析,可见相对分子质量约45000的目的蛋白条带,表达量约占菌体总蛋白的(32±2.4)%。纯化的重组蛋白纯度约为85%,且具有良好的反应原性。制备的3批rCaIFNα效价均达到1.1×106IU/ml以上。并可抑制犬细小病毒对MDCK细胞的致病变作用。结论已成功地在大肠杆菌中高效表达了rCaIFNα,表达产物具有良好的抗病毒活性。
王新满张玮赵俊王明丽
关键词：原核表达抗病毒活性
178名新生儿单纯疱疹病毒1型和巨细胞病毒血清抗体检测分析
2012年
目的了解新生儿单纯疱疹病毒1型（herpes simplex virus type 1, HSV-1 ）和人巨细胞病毒（ human cytomegalovirus, HCMV）血清抗体阳性情况及其与早产儿临床表现的关系。方法收集新生儿血清共178份（其中健康产妇顺产新生儿脐带血血清114份，早产儿外周血血清64份），分别用HSV-1和HCMVIgG、IgMELISA试剂盒进行检测。采用矿检验对结果进行比较。结果178名新生儿中，血清HSV-1IgG阳性率为83．70％，IgM为阴性；HCMVIgG和IgM阳性率分别为94．38％和0．56％。在114名顺产新生儿中，HSV-1IgG和IgM阳性率分别为78．07％和0．00％，HCMVIgG和IgM阳性率分别为94．74％和0．88％，HSV-1IgG和HCMVIgG共阳性率为73．68％。在64名早产儿中，HSV-1IgG和IgM阳性率分别为93．75％和0．00％，HCMVIgG和IgM阳性率分别为93．75％和0．00％，HSV-1IgG和HCMVIgG共阳性率为87．50％。早产儿与顺产儿的HCMVIgG阳性率差异无统计学意义（χ1=0．07，P〉0．05）；但早产儿HSV-1IgG阳性率以及HSV-1IgG和HCMVIgG共阳性率均高于顺产儿，且差异有统计学意义（χ2值分别为7．38和4．65，P值均〈0．05）。HSV-1IgG和HCMVIgG阳性早产儿出现胎膜早破、胎盘早剥、羊水过少、羊水污染和皮肤异常的几率明显高于阴性早产儿。结论本次检测的新生儿HSV-1IaG和HCMVIzG阳性率较高，且两者阳性的早产儿可能伴随胎膜早破等临床表现。
任鹏姚娟金艳汪晓婷葛俊李法锦赵蕾吉阳江龙凤王明丽
关键词：巨细胞病毒酶联免疫吸附测定婴儿
婴幼儿先天性巨细胞病毒感染性感觉神经性耳聋的研究进展被引量：3
2010年
先天性巨细胞病毒感染是引起婴幼儿感觉神经性耳聋的重要原因,也是先天性巨细胞病毒感染最常见的后遗症。耳聋的症状可在新生儿期出现,也可在出生后一段时间(通常在1岁左右)出现。对患儿使用安全范围内的抗病毒药物治疗可以改善听力。本文就婴幼儿先天性巨细胞病毒感染性感觉神经性耳聋的研究进展作一综述。
丁婷婷王明丽
关键词：巨细胞病毒感觉神经性耳聋
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