国家教育部博士点基金(20010422005)
- 作品数：8 被引量：23H指数：2
- 相关作者：高英茂邴鲁军杨振纲杨琳孙晋浩更多>>
- 相关机构：山东大学天津中医药大学更多>>
- 发文基金：国家教育部博士点基金国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 新生昆明小鼠睾丸支持细胞和精原细胞的共培养及支持细胞的作用被引量：2
- 2009年
- 目的分离、纯化、培养小鼠睾丸支持细胞,通过与精原细胞共培养,研究体外培养的支持细胞对精原细胞的影响。方法用复合酶消化、密度梯度离心和差异贴壁法分离、纯化、培养新生小鼠睾丸支持细胞,以苏丹Ⅳ染色鉴定支持细胞;用丝裂霉素-C处理支持细胞后作为饲养层,与精原细胞共培养;以直接分离培养的精原细胞作对照。倒置相差显微镜观察,细胞培养第3天,四甲基偶氮唑盐（MTT）法测定精原细胞的增殖率;膜联蛋白Ⅴ-异硫氰酸荧光素/磷脂酰肌醇（ANNEXIN-Ⅴ-FITC/PI）染色;激光扫描共焦显微镜观察记录精原细胞的凋亡率,比较精原细胞克隆大小、存活时间、增殖率和凋亡率的不同。结果分离、纯化后经苏丹Ⅳ染色鉴定的小鼠支持细胞纯度可达95%以上,与支持细胞共培养的精原细胞的克隆大小、存活时间和细胞增殖率明显高于对照组,而凋亡率则明显低于对照组。结论支持细胞可以促进精原细胞的增殖,抑制其凋亡。
- 张晓丽高英茂赵舒武邴鲁军
- 关键词：支持细胞精原细胞饲养层共培养小鼠
- 怀孕可增加小鼠海马齿状回的细胞增殖和神经发生被引量：1
- 2003年
- 目的 观察怀孕对小鼠海马齿状回 (DG)和脑室下层 (SVZ)的细胞增殖和神经发生的影响。 方法 5 溴 2 脱氧尿苷 (BrdU)标记新生细胞结合免疫组织化学方法对脑切片进行BrdU、TuJ1及GFAP单标或双标染色。结果 怀孕小鼠齿状回的细胞增殖和神经发生明显高于正常未孕成年雌性小鼠 ,脑室下层中细胞增殖的数目在两者却无明显差异。在齿状回新生的细胞中大约有 80 %为新生的神经元 ,3%～ 5 %为神经胶质细胞。 结论 成年小鼠海马齿状回的细胞增殖和神经发生可能因怀孕而显著增多 ,这些新生的细胞对海马的功能可能有重要的影响。
- 杨振纲杨琳高英茂孙晋浩李振华
- 关键词：怀孕神经发生齿状回免疫组织化学小鼠
- P_(16)抑癌基因在人完全性葡萄胎和正常胎盘组织中的表达被引量：2
- 2006年
- 目的研究P16抑癌基因与葡萄胎发生的关系。方法分别取完全性葡萄胎和正常早孕流产标本各30例,用SABC免疫组织化学染色方法,检测P16抑癌基因在两种组织中的表达,并采用图像分析技术,对正常早孕绒毛组和葡萄胎组P16抑癌基因的表达情况进行对比分析。结果与正常绒毛相比,P16抑癌基因在完全性葡萄胎组织中的表达部位和表达量有显著性差异。结论P16抑癌基因与人完全性葡萄胎发生密切相关。
- 张晓丽高英茂王富武武玉玲邴鲁军李少玲
- 关键词：P16抑癌基因葡萄胎组织胎盘绒毛免疫组织化学染色
- 脊髓神经管神经上皮干细胞的分离培养和诱导分化被引量：10
- 2003年
- 目的 从胚胎大鼠脊髓神经管中分离神经上皮干细胞并诱导其向多巴胺能神经元方向分化。 方法 利用无血清悬浮培养、单细胞克隆技术分离神经上皮干细胞 ;采用 5 溴 2 脱氧尿苷 (BrdU)标记新生细胞 ,免疫细胞化学单标或双标染色技术 ,检测神经上皮干细胞蛋白 (nestin)和分化后特异性神经细胞抗原的表达 ;用纹状体组织提取液 ,诱导神经上皮干细胞向多巴胺能神经元方向分化。 结果 从胚胎大鼠脊髓神经管中分离的细胞可以连续传代 ,表达nestin ,它们分化后可以表达神经元、星形胶质细胞和少突胶质细胞的特异性抗原 ;与对照组 3%相比 ,纹状体组织提取液可以诱导这些细胞中的 12 %分化成为多巴胺能神经元。 结论 分离自脊髓神经管的细胞具有自我更新能力和多分化潜能 (multipotent) ,是增殖能力很强的神经干细胞 ;这些干细胞在一定的体外环境中能被诱导成为特定的神经元 。
- 杨振纲杨琳高英茂孙晋浩李振华
- 关键词：神经上皮干细胞神经管多巴胺能神经元分化
- 血小板源性生长因子受体α与高温致神经管畸形发生关系的研究被引量：2
- 2004年
- 目的 探讨PDGFR α在高温致神经管畸形 (NTDs)中的作用。方法 在高温致神经管畸形动物模型上 ,采用免疫组织化学和图像分析技术 ,研究血小板源性生长因子受体α (PDGFR α)在发育不同阶段的神经上皮中的表达 ,并观察高温对其表达的影响。结果 在正常对照组 ,PDGFR α广泛分布于神经管及其周围组织中 ;在高温致畸组 ,神经上皮中PDGFR α的表达明显减弱 ,甚至不表达。结论 PDGFR α的表达与神经管正常发育密切相关 ,其表达的减少可能是高温致NTDs机制中的重要环节。
- 张静高英茂李少玲邴鲁军宋卫华
- 关键词：神经管畸形高温NTDSPDGFR-Α神经管
- 胚胎中脑细胞植入帕金森病模型大鼠脑内的实验研究被引量：1
- 2003年
- 目的:观察胚胎中脑细胞脑内移植治疗帕金森病(PD)模型大鼠的长期疗效。方法:将取自11.5天胚胎(E11.5)大鼠的中脑细胞植入PD模型大鼠的纹状体,观察大鼠旋转行为的改变,并于移植手术1年后用免疫组织化学的方法检测移植细胞的存活及其分化为多巴胺能神经元的状况。结果:E11.5大鼠中脑细胞在植入脑内后能够明显改善PD大鼠的旋转行为,但只有不到0.1%的移植细胞能够分化成为多巴胺能神经元,这些分化良好的多巴胺能神经元可以在脑内长期存活。结论:E11.5大鼠的中脑细胞植入PD模型大鼠的纹状体后,虽然有一定的疗效,但其最终分化成为多巴胺能神经元的比例却较低,提示E11.5大鼠胚胎中脑细胞不如E13-E15大鼠胚胎中脑细胞脑内移植治疗PD的效果好。
- 杨振纲杨琳高英茂孙晋浩李振华
- 关键词：脑内移植胚胎中脑帕金森病
- 温度对体外培养精原细胞增殖和凋亡的影响被引量：4
- 2008年
- 目的:探讨精原细胞最适培养条件并观察环境温度对体外培养的精原细胞增殖和凋亡的影响。方法:将分离、富集的小鼠精原细胞分别置于不同温度条件下进行体外培养,观察其贴壁、增殖、形态学变化和存活时间;MTT法检测精原细胞活性,Annexin V-FITC/PI染色法检测精原细胞的凋亡。结果:32℃、34℃、37℃条件下均可以看到精原细胞的贴壁、分裂和增殖,39℃培养条件下,精原细胞极少贴壁,基本看不到细胞增殖,细胞很快发生凋亡。随着培养时间延长,精原细胞增殖形成的精原细胞克隆数和精原细胞存活时间明显不同,其中34℃条件下精原细胞增殖最多,存活时间最长。结论:温度对体外培养的精原细胞的增殖和凋亡有明显的影响,34℃为精原细胞体外培养的最适温度。
- 张晓丽高英茂赵舒武邴鲁军
- 关键词：精原细胞温度细胞增殖细胞凋亡
- 高温致畸金黄地鼠神经管cDNA文库的构建与鉴定被引量：1
- 2005年
- 目的:构建高温致畸金黄地鼠神经管cDNA文库.方法:在高温致神经管畸形动物模型上,提取高温致畸金黄地鼠胚胎神经管总RNA,用SMARTTM cDNA文库构建试剂盒反转录合成cDNA第1链,经LD-PCR合成全长双链cDNA,去除小于500bp的片断后与λTriplEx2噬菌体左、右臂连接,体外包装,构建成未扩增cDNA文库,再进行文库扩增.测定未扩增和扩增文库的滴度及重组率;随机挑取噬菌斑,经PCR扩增,电泳检测所构建cDNA文库的质量.结果:未扩增文库滴度为2.03×106pfu/ml,重组率为98.4%,文库扩增后滴度达2.503×109 pfu/ml,重组率为97.6%.插入片段长度分布于500～3000bp之间.结论:成功地构建了高质量的高温致畸金黄地鼠神经管cDNA文库.
- 张静高英茂李少玲王立言
- 关键词：神经管畸形高温CDNA文库金黄地鼠
