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重组质粒DNA在热处理过程中的降解/变性规律研究被引量：2: 2008年; 生物实验室产生的废弃重组基因片段的排放是造成"基因污染"的途径之一.热处理是目前生物实验室处置废弃重组基因片段、核酸等物质的主要手段.以pET-28b质粒为材料,采用定量PCR技术结合电泳和质粒转化等手段分析了重组基因片段在热处理过程中的降解与失活规律,以及不同离子强度对重组质粒热降解的影响.结果显示,100℃热处理过程中质粒pET28b的降解随时间变化较为明显,降解半衰期约为2.7min;处理30min后仍存在具有转化活性的质粒;实验结果表明,100℃热处理后的废弃重组基因片段排入自然生态系统后仍存在基因转移的可能性.; 李梦南任大明王磊肖伟郑广宏; 关键词：质粒DNA

六价铬还原细菌Bacillus cereus S5.4的筛选鉴定及还原特性研究被引量：10: 2007年; 六价铬生物毒性极大，是造成环境污染的主要重金属之一，其生物治理策略已引起了广泛关注。已经发现许多微生物具有六价铬抗性和还原性，但能工业应用的还十分有限。从宝钢电镀污泥中分离得到一系列高六价铬抗性菌株，其中一株S5．4显示出高六价铬还原性，经形态和生理生化特征及16s rDNA序列比对，鉴定为Bacillus cereus。该菌株好氧生长，在固体LB培养基上培养48h能耐受40mmol／L Cr^6＋，并对Mn^2＋、Ba^2＋和Mo^6＋也显出高抗性；在液体LB培养基中培养72h完全还原2mmol／L Cr^6＋，并能在补充培养基和六价铬的条件下连续还原。该菌株还原六价铬时，最适浓度为2mmol／L Cr^6＋，最适温度范围30～37℃，最适pH7～9。; 肖伟王磊张思维乔文杰付小花任大明; 关键词：BACILLUS CEREUS 微生物鉴定

Treatment of engine-oil polluted wastewater with a mixed bacterial flora and kinetics of biodegradation: 2007年; A mixed bacterial flora was isolated from the soil of two petroleum-contaminated sites, then cultivated and domesticated in an open environment. The bacteria were used to degrade engine oil in wastewater. The optimum biodegradation conditions for all engine oil concentrations of respectively 489 mg L-1, 1 075 mg L-1 and 2 088 mg L-1 are bacterial inoculum concentration of 0.1%, temperature at 30 °C to 35 °C, pH 7.0 to 7.5, and rotation at 190 r min-1 to 240 r min-1. The second-order kinetic model proposed by Quiroga and Sales describes the characteristics of the biodegradation of the engine oil very well. Engine oil concentration barely changes the growth rate of the bacterial consortium. The mixed bacterial flora has a high biodegrading capability for engine oil.; 王亮王磊

机油高效降解菌群筛选及降解效果初探被引量：5: 2007年; 从多处受石油污染的土壤中经过初步筛选、混合驯化得到以机油为唯一碳源进行生长代谢的混合菌群。利用此混合菌群进行的降解实验结果表明,该菌群对高浓度机油废水具有较强的降解能力,初始含机油约2.0g/L的人工废水,接种量为0.1%(菌体湿重/培养液体积),经过7d的降解,机油可降至403mg/L,降解率达81.4%;对不同浓度机油废水的降解实验结果表明,在静态实验条件下,机油质量浓度在不高于1000mg/L(含1075mg/L),混合菌群在降解过程中能自行从降解产酸的不良环境中恢复,机油质量浓度在2000mg/L以上,初期产酸较多,pH下降幅度较大,在7d的周期内,废水pH无法恢复,说明在降解后期仍有大量有机酸积累而未被彻底降解;与葡萄糖共基质的降解实验结果表明,经过7d的降解,不超过150mg/L的葡萄糖与1000mg/L机油组成的共基质体系中,机油降解基本不受葡萄糖加入的影响,但可加强早期的降解速率。而葡萄糖高于150mg/L时,则会对混合菌群的除油率产生抑制,抑制程度随着葡萄糖浓度的提高而加大。; 王亮王磊李风亭张士萍刘华; 关键词：混合菌群机油含油废水生物降解

DGGE和qPCR联用定量分析环境样品中优势菌群被引量：4: 2012年; 精确定量环境样品中特定微生物类群的数量对阐明环境生物治理/修复过程中微生物的功能和效应具有重要意义。该文以土壤样品为例,将PCR-DGGE技术与定量PCR(qPCR)技术联用,定量检测样品中优势微生物类群数量。方法:抽提样品DNA,针对16SrDNA进行PCR-DGGE分析,明确样品中的优势菌群;再根据特定优势菌群的基因序列设计适合的定量引物,通过针对特定优势菌群的定量PCR分析,得到样品中优势菌群的数量信息。该方法灵敏度高、重复性好,并且无需培养,最大限度地保持了样品原始群落信息。; 付小花李艳丽乐毅全王磊; 关键词：优势菌群 DGGE

废弃重组质粒DNA热处理效率的环境影响因素被引量：1: 2009年; 为了解环境因素对质粒DNA热处理效率的影响以及热处理过程的有效性和安全性,以pET-28b质粒为材料,采用定量PCR技术结合质粒转化等方法分析了pH、NaCl、牛血清白蛋白(BSA)及EDTA浓度等因素对质粒DNA热处理的影响.结果表明,NaCl、BSA及EDTA的存在对热处理过程中的质粒DNA具有保护作用,且保护作用依次增强.在纯水中热处理30min后的质粒DNA可扩增的片段数仅是在0.1%的EDTA中热处理30min后质粒DNA可扩增片段数目的1.7%.由于生物实验室废水中通常含有上述有机或无机物质,因此,实际热处理过程中质粒DNA的降解半衰期可能远长于先前报道的2.7～4min,残留的转化活性也可能更高,这必须引起我们高度关注.但是,研究结果也表明,酸性条件下的热处理能加速质粒DNA的失活和降解,因此建议热处理过程可在弱酸性条件下完成,以强化其处理效果.; 李梦南郑广宏付小花乐毅全肖伟王磊任大明; 关键词：质粒DNA 降解环境因素定量PCR

重组基因的生物安全问题及其对策被引量：9: 2007年; 随着现代生物技术,特别是基因工程技术的高速发展,其对生态环境与人民健康的可能危害越来越引起人们的重视。该文介绍了现代生物技术安全问题的由来,讨论了重组基因的安全性及其对生态环境和人类健康的潜在影响,着重探讨有关重组基因片段的实验室泄露问题,最后阐述了近年来基因安全研究的重点和有关防治措施。; 李梦南郑广宏王磊; 关键词：基因生物安全转基因作物基因污染生态安全实验室安全

高效复合微生物处理含机油废水的工艺优化被引量：3: 2007年; 从受石油污染的土壤中培养获得试验用菌群,经开放式筛选驯化后得到以机油为唯一碳源进行生长代谢的混合菌群。用实验室配置的含机油废水,对此菌群的除油能力进行了摇瓶试验研究。结果表明,混合菌群的最佳生长条件为:温度30～35℃,pH7.0～7.5,摇床转速190～240r/min;废水中不超过6000mg/L的氯离子对菌群除油没有明显影响,但高于9000mg/L就会对菌群活性产生抑制,抑制度随氯离子浓度增高而加大;增溶剂SDS浓度不超过100mg/L时可促进菌群对机油的降解,但更高浓度的SDS则对菌群活性产生抑制,抑制度随SDS浓度增高而加大;与葡萄糖共基质的降解试验结果表明,经过7d的降解,不超过150mg/L的葡萄糖与1000mg/L机油组成的共基质体系中,机油去除基本不受葡萄糖加入的影响,但葡萄糖浓度高于500mg/L时,则会对菌群的除油率产生抑制,抑制程度随着葡萄糖浓度的提高而加大;铜离子浓度5mg/L以下时不会对菌群产生不利影响,但10mg/L的铜离子对菌群活性有较大影响,菌群5d的除油率只有17.0%。; 王亮王磊张士萍李风亭刘华; 关键词：混合菌群机油含油废水生物降解

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国家自然科学基金(40571145)

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