重庆市建设科技计划项目(2009121)
- 作品数：1 被引量：4H指数：1
- 相关作者：王大勇张春秀谢朝新方振东敖漉更多>>
- 相关机构：国家工程研究中心中国人民解放军后勤工程学院更多>>
- 发文基金：重庆市科技攻关计划重庆市建设科技计划项目更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 十三种致病菌多重PCR技术检测被引量：4
- 2011年
- 目的探讨致病菌多重PCR检测方法。方法利用13种在突发公共事件中可能出现在饮用水水源水体中的致病细菌的特异性序列为靶序列,设计了14对特异性引物并分成3组进行多重PCR反应,建立并优化了多重PCR检测体系。结果通过实验确定适宜的退火温度为66-68℃;3组检测引物的添加比例分别为：第1组引物添加比例为Shi∶Sa∶O157∶Ec∶Sen=1∶1∶1∶2∶3-1∶1∶1∶3∶4,第2组引物添加比例为Lm∶Lp∶Kp∶Hp=1∶1∶4∶1,而第3组引物添加比例为MT∶VC∶BA∶YP∶16S=8∶1∶8∶4∶4;混合引物的用量为0.6~0.8μL。多重PCR的基因组DNA检测灵敏度可达到2×10-2ng/μL;配合浓缩集菌设备,使用研究中建立的多重PCR体系,肠炎沙门菌培养液的检测下限可以达到103cfu/mL。结论该多重PCR检测方法操作简单,速度快,灵敏度高,稳定性和重复性好,具有较广阔的应用前景和较大的经济与社会效益。
- 王大勇方振东谢朝新敖漉肖进文张春秀
- 关键词：致病菌多重PCR检测
