辽宁省科学技术计划项目(2013225303) 作品数:36 被引量:220 H指数:9 相关作者: 刘志 涂巍 金光华 曲文志 杨蕾 更多>> 相关机构: 中国医科大学附属第一医院 中国医科大学 中国医科大学附属第四医院 更多>> 发文基金: 辽宁省科学技术计划项目 国家自然科学基金 辽宁省自然科学基金 更多>> 相关领域: 医药卫生 文学 理学 生物学 更多>>
RNA干扰沉默Smad3基因对百草枯致小鼠肺间质纤维化的治疗作用 被引量:2 2015年 目的通过RNA干扰技术沉默小鼠肺组织中Smad3基因,观察其对百草枯(PQ)所致肺间质纤维化是否具有保护作用。方法利用小鼠L929成纤维细胞,体外验证抑制Smad3基因表达的有效shRNA,并进一步将其合成进重组腺病毒。实验小鼠分为三组,在小鼠染毒后2h,气管内分别注入PBS、非靶向重组腺病毒和靶向重组腺病毒。不同时间点(0d,7d,28d)对每组6只小鼠进行处理,留取肺组织标本。提取肺组织中总RNA,Real time PCR检测肺组织中Smad3、I型前胶原mRNA表达,Western Blot检测肺组织细胞核中Smad3蛋白表达,羟脯氨酸检测试剂盒分析肺组织中羟脯氨酸的含量以及肺组织HE染色后观察组织病理学变化。结果同PBS组、非靶向重组腺病毒组相比,靶向重组腺病毒有效抑制了肺组织内Smad3 mRNA和蛋白表达。重组腺病毒介导的shRNA转染进一步抑制了肺组织中I型前胶原mRNA表达和羟脯氨酸的产生,减轻了PQ所致的肺间质纤维化的形成。结论Smad3对百草枯引起的肺间质纤维化有重要作用,RNA干扰抑制肺组织Smad3基因表达可能是一种有效的治疗该病的方法。 董雪松 王蕊 刘志关键词:百草枯 肺间质纤维化 SMAD3 RNA干扰 小鼠 英夫利昔单抗治疗溃疡性结肠炎的效果及对炎症因子水平的影响 被引量:16 2017年 目的探讨英夫利昔单抗治疗溃疡性结肠炎的效果及对炎症因子水平的影响。方法选取2013年7月~2015年10月在中国医科大学附属盛京医院就诊的中度溃疡性结肠炎患者240例,将其随机分为观察组和对照组,每组120例。对照组给予常规药物硫唑嘌呤进行治疗,观察组在此基础上给予英夫利昔单抗,连续治疗30 d。观察两组临床疗效,比较两组治疗前后血清C反应蛋白(CRP)、红细胞沉降率(ESR)、白蛋白(Alb)、血红蛋白(Hb),以及炎症因子水平。结果观察组总有效率(80.83%)显著高于对照组(61.67%),差异有统计学意义(P<0.05)。两组治疗后CRP、ESR、Alb、Hb均较治疗前明显改善,差异有统计学意义(P<0.05),且观察组治疗后CRP、ESR水平显著低于对照组,Alb、Hb水平显著高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。两组治疗后白细胞介素-6(IL-6)、白细胞介素-8(IL-8)、白细胞介素-23(IL-23)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)水平均较治疗前显著下降,差异有统计学意义(P<0.05),且观察组治疗后IL-6、IL-8、IL-23、TNF-α水平均显著低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论英夫利昔单抗治疗溃疡性结肠炎效果确切,其可有效改善患者的肠道黏膜状态,同时对降低炎症因子水平有重要意义,有利于患者预后恢复,值得临床推广应用。 杨俊 金玉 潘迪 王东旭 林艳 郑长青关键词:英夫利昔单抗 溃疡性结肠炎 炎症因子 白介素-17A在急性百草枯中毒小鼠肺损伤中的作用 被引量:3 2017年 目的探讨白介素-17A(IL-17A)在急性百草枯中毒致小鼠肺损伤中的作用。方法120只健康SPF级ICR雄性小鼠,随机(随机数字表法)分为3组:生理盐水对照组(NS)、百草枯染毒组(PQ)和抗体中和组(PQ+Ah),每组40只。PQ组和PQ+Ab组小鼠以25mg/kg的剂量一次性经口灌胃5mg/mL的PQ溶液建立中毒模型,抗体中和组每只小鼠于染毒后立即经腹腔注射5μg IL-17A中和性抗体;NS组小鼠给予相应量的生理盐水。染毒后每组按8h、1d、3d、5d、7d各取6只存活小鼠进行实验,测定小鼠肺湿干比(W/D),HE染色光镜下观察小鼠肺组织病理变化并评分,酶联免疫吸附法(ELISA)检测血清细胞因子IL-17A、白介素-22(IL-22)、白介素-6(IL-6)、转化生长因子-β(TGF-B)含量,免疫组化法检测肺组织白介素-23受体(IL-23R)表达,实时荧光定量PCR(qRT—PCR)法测定肺组织维甲酸相关孤核受体(RORyt)mRNA表达,SPSS22.0软件分析数据。结果PQ灌胃后,PQ组和PQ+Ab组小鼠肺W/D显著升高(P〈0.01),肺组织出现急性损伤的病理改变,血清细胞因子(IL-17A、IL-22、IL-6、TGF—B)含量增多(P〈0.05)、肺组织中IL-23R和RORYt mRNA的表达升高(P〈0.01);抗体中和IL-17A后,PQ+Ab组小鼠肺W/D降低(P〈0.05),肺病理损伤减轻,血清细胞因子水平下降(P〈0.05),肺组织中IL-23R和RORYt mRNA的表达降低(P〈0.05)。结论IL-17A参与急性百草枯中毒致小鼠肺损伤过程,阻断IL-17A能够明显减轻小鼠肺急性损伤。 宋宏伟 杨琛 刘晓伟 刘志关键词:百草枯 小鼠 TH17细胞 视网膜下瘢痕形成小鼠视网膜色素上皮-脉络膜中血管内皮生长因子、促纤维化因子及炎症因子的表达 被引量:2 2014年 目的 观察视网膜下瘢痕形成小鼠视网膜色素上皮(RPE)-脉络膜组织中血管内皮生长因子(VEGF)、促纤维化因子及炎症因子的表达.方法 7~8周龄雌性C57BL/6(B6)小鼠64只,应用激光结合视网膜下注射炎症巨噬细胞的方法建立视网膜下瘢痕动物模型.建模后7d,摘除小鼠眼球行Masson染色,同时选取部分眼球作脉络膜铺片胶质纤维酸性蛋白(GFAP)免疫荧光染色,确认视网膜下瘢痕模型是否建立成功.建模前及建模后1、2、3、5、7d,采用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测小鼠RPE-脉络膜中VEGF、转化生长因子(TGF)-β、白细胞介素(IL)-6、IL-10、IL-13的mRNA表达.分别于建模前及上述因子mRNA表达峰值时,取RPE-脉络膜组织行酶联免疫吸附试验(ELISA)检测,测量小鼠RPE-脉络膜组织中VEGF、总TGF-β1、活性TGF-β1、总TGF-β2、活性TGF-β2、IL-6、IL-10、IL-13的蛋白含量.结果 建模后7d,Masson染色和脉络膜铺片GFAP免疫荧光染色检查发现,小鼠视网膜下有大量胶原纤维形成,证实视网膜下瘢痕模型建立成功.RT-PCR检查结果显示,VEGF、TGF-β1、TGF-β2mRNA表达均于建模后2d明显增加,建模后5d达到峰值.IL-6、IL-10、IL-13 mRNA表达于建模后1~2 d表达明显增加,并于建模后2d达到峰值.建模前后均未检测到TGF-β3 mRNA表达.建模前与建模后2、3、5、7 d VEGFmRNA表达比较,差异有统计学意义(t=2.38、3.65、4.03、2.26,P<0.05).建模前与建模后2、3、5、7dTGF-β1(t=2.58、2.30、3.89、4.15)、TGF-β2(t=4.37、4.20、3.77、3.98)mRNA表达比较,差异均有统计学意义(P<0.05).建模前与建模后1、2、3 d IL-6 mRNA表达比较,差异均有统计学意义(t=2.36、4.54、4.01,P<0.05).建模前与建模后2、3 d IL-10、IL-13 mRNA表达比较,差异均有统计学意义(t=3.87、4.20、2.44、2.58,P<0.05).建模后5d,小鼠RPE-脉络膜组织中VEGF、总TGF-β1、活性TGF-β1、总TGF-β2、� 张含 刘哲丽 孙鹏 谷峰关键词:瘢痕 病理生理学 飞秒激光辅助的猫角膜基质板层切割界面光滑度的研究(英文) 被引量:1 2017年 目的:评估飞秒激光FS200在不同模式下切割猫角膜基质板层界面的光滑度。方法:新鲜的猫眼球20只,随机平均分为4组(A、B、C、D组),分别在不同的模式下进行飞秒激光角膜基质板层切割:A组为常规切割组:负压吸引环吸引、角膜完全压平,压平直径约为13mm;B组不使用负压吸引环、角膜完全压平,压平直径约13mm;C组负压吸引环吸引、角膜压平直径约为8mm;D组不使用负压吸引环、角膜压平直径约为8mm。采用5分制的评分标准,对切割后的猫角膜基质界面的电子显微镜扫描照片进行评分,以评估切割后的角膜基质界面的光滑度。结果:裂隙灯显微镜图片显示出四组角膜基质界面光滑度的结果,D组最光滑,A组最粗糙。30倍扫描电镜照片的评分结果显示D组光滑度明显优于A组(P=0.007),D组光滑度明显优于B组(P=0.007),D组光滑度明显优于C组(P=0.016)。100倍电镜照片评分结果显示D组光滑度明显优于A组(P=0.01),D组光滑度明显优于B组(P=0.016)。其余各组间差异无统计学意义。结论:在无负压环吸引且压平面积小的模式-对角膜组织的压缩变形较小的切割状态下,飞秒激光辅助的猫角膜基质后板层切割界面的光滑度可得以部分改善。 张涛 李绍伟 何景良 康艳伟 石帅 李巍关键词:飞秒激光 电子显微镜 飞秒激光辅助的板层角膜移植术的临床疗效观察 被引量:3 2015年 目的 探讨飞秒激光辅助的板层角膜移植术的疗效及特点.方法 回顾性研究.收集17例(20只眼)行飞秒激光辅助的板层角膜移植术患者,术前裸眼视力0.02~ 0.4,根据病变性质及范围不同,利用飞秒激光制作不同厚度的供体和受体的角膜瓣,厚度400~ 600 μm,术后按常规板层角膜移植术治疗.结果 术后1年时,18只眼(18/20)裸眼视力较术前有不同程度提高,其中1只眼达0.8;最佳矫正视力0.5及以上者18只眼(18/20),其中1只眼可达1.0.15只眼术后散光度数3.00 D.术中2只眼发生轻度偏中心切割,2只眼出现角膜混浊,2只眼出现较大散光,1只眼于术后1年时出现免疫排斥反应.结论 飞秒激光辅助的板层角膜移植术中角膜瓣切削精确,患者术后恢复快、散光小、瘢痕轻. 李绍伟 宁建华 刘畅 郭作锋 吕芳奇 陈铁红关键词:激光 飞秒 角膜移植 肠黏膜屏障损伤在溃疡性结肠炎的作用研究进展 被引量:23 2018年 溃疡性结肠炎是一类炎症性肠病,以肠黏膜屏障的完整性受损为特征,与肠道内菌群失调、T细胞过度活化、Treg细胞的功能缺陷相关。肠黏膜免疫屏障则主要由肠相关淋巴组织(GALT)发挥功能,GALT是肠黏膜内诱导免疫耐受及免疫反应启动的场所;肠黏膜机械屏障、化学屏障、微生物屏障三者形成抵抗外来抗原的第一道防线;以上共同构成肠黏膜屏障的完整性。自噬是一项进化保守的生命活动,参与肠道稳态平衡和蛋白降解以及肠黏膜免疫屏障的调节,自噬的调节失控同样也是溃疡性结肠炎的致病因素之一。通过对肠黏膜屏障损伤在溃疡性结肠炎发生的作用机制的分析,为进一步改善临床治疗效果提供依据。 倪杰明 刘维新关键词:肠黏膜屏障 肠相关淋巴组织 溃疡性结肠炎 T细胞活化 肝硬化患者血浆B型利尿肽水平的变化及其临床意义 被引量:15 2016年 目的检测肝硬化患者血浆B型利尿肽(BNP)水平,分析其与肝功能分级、消化道出血、肝硬化腹水、血红蛋白、肾功能、凝血功能的关系。方法选取我院收治的肝硬化患者161例为实验组,同时选取161例健康体检者作为对照组。收集基本信息,测定血浆BNP、血红蛋白、肾功能、凝血功能及是否合并消化道出血和肝硬化腹水。观察实验组与对照组血浆BNP水平是否存在差异,实验组中不同性别、年龄、肝功能分级以及是否合并消化道出血、腹水等并发症时BNP水平的变化,以及BNP水平与血红蛋白、肾功能、凝血功能、便潜血结果的相关性。结果实验组血浆BNP水平较对照组升高(P<0.05)。实验组中,不同年龄及性别间血浆BNP水平无明显差异(P>0.05);Child-Pugh C级患者血浆BNP水平明显高于Child-Pugh A级和B级患者,且Child-Pugh B级患者高于Child-Pugh A级患者(P<0.05)。实验组中合并消化道出血、腹水、贫血、便潜血阳性、肾功能异常的患者,血浆BNP高于不合并上述症状的患者(P<0.05)。实验组中血浆BNP水平与血红蛋白、肌酐、胱抑素C、血尿素氮呈正相关,与血浆凝血酶原时间、活化的部分凝血活酶时间、纤维蛋白原无相关性。结论血浆BNP水平同性别、年龄等基本因素无关。BNP水平可反映肝硬化患者病情的严重程度,并且受消化道出血、肝硬化腹水、贫血、肾功能异常等因素的影响。BNP对肝脏合成功能无明显影响。 王莹 刘维新 邢俊伟 周凤 于艳红 王婷关键词:肝硬化 消化道出血 腹水 血红蛋白 肾功能 Ghrelin抑制多柔比星诱导人乳腺癌细胞MDA-MB-231凋亡的实验研究 2016年 目的:探讨Ghrelin抑制多柔比星诱导人乳腺癌细胞MDA-MB-231凋亡的机制。方法 :通过细胞培养、MTT、流式细胞检测、Tunnel法和Western blot观察酰基化Ghrelin对多柔比星诱导的人乳腺癌细胞MDA-MB-231凋亡和凋亡相关蛋白表达的影响。结果:MTT检测证实多柔比星能有效诱导人乳腺癌细胞MDA-MB-231凋亡。流式细胞检测及Tunnel法检测发现Ghrelin能有效抑制多柔比星诱导的人乳腺癌细胞MDA-MB-231的凋亡。Western blot检测发现Ghrelin抑制多柔比星诱导人乳腺癌细胞MDA-MB-231凋亡的同时伴有bcl-2表达增加、bax表达下降、bcl-2/bax值升高。结论:Ghrelin能有效抑制多柔比星诱导人乳腺癌细胞MDA-MB-231凋亡,推测其抑凋亡机制可能与抗线粒体凋亡因子释放有关。 曲文志 杨蕾 涂巍 张云微 金光华 温健关键词:GHRELIN 多柔比星 BCL-2 BAX 英夫利西单抗治疗中重度活动性克罗恩病的疗效及安全性 被引量:13 2018年 目的 观察英夫利西单抗(IFX)治疗克罗恩病(CD)的疗效与安全性。方法 回顾性分析42例传统药物疗效差或再次复发的CD患者应用IFX治疗的疗效,评估疾病活动度、血生化指标、并发症、结肠镜结果及药物的安全性。结果 42例患者经IFX治疗14周,39例达到临床有效,34例达到临床缓解,CD活动指数(CDAI)评分、C反应蛋白(CRP)、血沉、血小板计数均明显下降(P<0.05)。21例患者经IFX治疗38周,CDAI评分、CRP、血沉、血小板计数明显下降(P<0.05),而血红蛋白、白蛋白明显升高(P<0.05)。7例肛瘘均有不同程度缓解。不良反应仅5次。结论 IFX对经传统药物治疗效果不佳或再次复发的CD患者效果良好,近期不良反应率较低,总体安全。 兰雨桐 刘威宇 邢俊伟 来爽 杨慧珊 李虹 邓秋萍 刘维新关键词:英夫利西单抗 克罗恩病 疗效 安全性