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Development of a novel conductance-based technology for environmental bacterial sensing被引量：1: 2013年; In this study, a simple impedance based technology for measuring bacterial concentrations was developed. The measurement system includes the signal amplification, copper probes and a sample loader. During the experiments, the conductance of Bacillus subtilis var niger, Pseudomonas fluorescens, and Escherichia coli were measured using the combination of a pre-amplifier and a lock-in amplifier. The conductance data were modeled verses the bacterial concentrations. Results indicated that the relationship between the conductance of bacterial suspensions and their concentrations follows a generic model: Y=C1+C2×e ( X/C3 ) , where Y is the conductance (S), X is the bacterial concentration (Number/mL: abbreviated to N/mL) for all species tested, and C1 3 are constants. Gram negative P. fluorescens and E. coli assumed similar conductance curves, which were flatter than that of gram positive B. subtilis var niger. For P. fluorescens and E. coli the culturing technique resulted in higher concentration levels (statistically significant) from 2 to 4 times that measured by the impedance based technology. For B. subtilis var niger, both methods resulted in similar concentration levels. These differences might be due to membrane types, initial culturability and the obtained conductance curves. The impedance based technology here was shown to obtain the bacterial concentration instantly, holding broad promise in realtime monitoring biological agents.; SHEN FangXiaTAN MiaoMiaoXU HongXU ZhenChengYAO MaoSheng; 关键词：细菌检测电导数 BACILLUS 阻抗测量

广州市2004--2008年大气污染对城区居民每日死亡率影响的时间序列分析被引量：19: 2012年; 目的评价2004—2008年广州市大气污染短期暴露与居民死亡风险的相关性。方法采用时间序列方法，对主要大气污染物可吸入颗粒物（PM10）、二氧化氮（NO2）和二氧化硫（SO2）与每日死亡率相关性进行Poisson回归分析。结果模型分析结果表明，通过控制年龄、性别、时间、星期几效应和气象因素，发现PM10、NO2和SO：这3种大气污染物暴露与超额死亡风险存在正相关关系。广州市3种大气污染物在过去48h的暴露浓度每上升10μg/m^2所对应的总死亡的超额风险分别为0．94％（0．79—1．09）、1．55％（1．31～1．78）和1．09％（0．91—1．27）。研究结果表明，大气污染物暴露与心血管系统疾病或呼吸系统疾病死亡的关联显著，对老年人和女性的影响更为显著。结论广州市主要大气污染短期暴露与居民的超额死亡风险显著相关。; 黄晓亮戴灵真卢萍尚羽李怡陶晔彬黄薇; 关键词：大气污染死亡率时间序列分析

我国210例伊马替尼耐药慢性髓细胞白血病和Ph阳性急性淋巴细胞白血病ABLl基因突变特征被引量：9: 2012年; 目的了解伊马替尼治疗后效果不佳的慢性髓细胞白血病（chronic myeloid leukemia,CML）及Ph阳性急性淋巴细胞白血病（acute lymphoblastic leukemia,ALL）患者BCR-ABL1激酶区突变（kinase domain mutation,KDM）的特征.方法选取2007年9月至2010年12月北京市道培医院177例CML患者和33例Ph（＋）ALL患者,均为我国患者.在患者治疗初期有效、后出现耐药时,或者治疗3个月以上疗效不佳时采集骨髓或外周血标本,共计243份.提取标本有核细胞中总RNA,反转录为cDNA.用巢式聚合酶链反应（polymerase chain reaction,PCR）扩增标本中BCR-ABL1融合基因的激酶区全长（第242～ 493位氨基酸的编码序列）,使用AB3130XL型基因测序仪测定ABL1激酶区的基因序列,使用Variant Reporter V1.0软件分析基因突变结果.结果共检测到32种ABL1基因不同种类的点突变,检出率为34.2％（ 83/243）.其中T315I占12％（10/83）,检出的突变率最高；其余依次为Y253H占11％（9/83）,G250E占7％（6/83）,E255K占7％（6/83）,M351T占6％（5/83）,E459K占5％（4/83）；Q252H、D276G、F317L、E355G、F359V、H396R均与4％（3/83）.并发现了3例插入突变,2例为357-358insk,1例为V304RfsX17.在7例患者中发现同时存在2种以上的点突变.多种耐药突变可同时存在于1个克隆中,同一个体不仅有常见的耐药突变,也会出现少见的点突变、缺失突变、插入突变甚至导致激酶活性缺失的突变.结论伊马替尼药物压力下白血病细胞的ABL1基因突变会随机出现,产生不同的耐药克隆；不同的耐药克隆可以在同一个体内并存.耐药克隆不仅有基因突变,还存在插入缺失突变.; 夏君燕刘红星王芳朱娟蔡鹏童春容朱平; 关键词：伊马替尼耐药蛋白酪氨酸激酶类白血病慢性突变

基因枪转染IgHV1-GM-CSF基因在树突细胞中的表达被引量：2: 2009年; 目的探讨基因枪颗粒轰击转染人树突细胞(DC)的方法,以及基因枪转染基因疫苗质粒IgHV1-GM-CSF/pcDNA3.0在DC中的表达。方法利用Ficoll密度梯度法分离人外周血单个核细胞(PBMC),贴壁方法获取单核细胞作为DC前体,在重组GM-CSF和IL-4的支持下诱导培养为用于转染的未成熟DC(i mDC);制备人免疫球蛋白重链基因可变区家族的框架区基因疫苗质粒和增强绿色荧光蛋白质粒(pEGFP)。设定不同的转染条件,采用基因枪方法将pEGFP质粒转染入DC,荧光显微镜下分别计数绿色荧光阳性细胞数和细胞总数,计算转染率;台盼蓝染色计数活细胞,计算细胞存活率;比较基因枪、脂质体及电转染3种方法的转染效率。以基因枪方法在最佳条件下将IgHV1-GM-CSF/pcDNA3.0及pEGFP质粒共转染DC,提取细胞RNA,RT-PCR方法检测IgHV1-GM-CSF的表达,ELISA方法检测GM-CSF的表达。结果选择基因枪转染的优化条件为:转染压力120psi、聚乙烯吡咯烷酮(PVP)浓度0.02mg/ml、微载体负载量(MLQ)0.5mg金/子弹、DNA负载率(DLR)1.5μg质粒DNA/子弹。基因枪转染的效率为10.5%±2.4%(n=3),电转染方法为45.2%±5.6%(n=3),而脂质体方法只有个别DC表达荧光蛋白,三者比较差异有统计学意义(P<0.01)。基因枪方法转染的DC能够保持其特殊细胞形态,细胞表面标志在转染中无明显变化,而电转染后细胞大量死亡。应用基因枪转染方法,基因疫苗质粒IgHV1-GM-CSF/pcDNA3.0在DC中得到瞬时表达。结论基因枪颗粒轰击可使基因疫苗在DC中成功表达,是临床细胞免疫治疗中DC转染的一种可行选择。; 李绵洋朱平王红霞蔡鹏达万明; 关键词：树突细胞转染

骨髓增殖性疾病转化为急性髓系白血病后细胞免疫表型的变化被引量：1: 2012年; 一些骨髓增殖性疾病(MPD)病例有可能转化为急性髓系白血病(AML),但是迄今尚未观察到体内MPD细胞转化为AML细胞的分化过程。本研究旨在揭示这一分化过程。采用流式细胞术分析了2例MPD短期内转为AML患者骨髓分化细胞的免疫表型特征。研究结果表明,体内发展相对缓慢的MPD增殖细胞演化为迅速扩增的急性白血病细胞时,存在不同分化阶段的亚克隆。结论:了解MPD急变过程将有助于早期诊断和治疗MPD转化的急性白血病。; 陈雪王谷云邢海洲孙玉华胡旸田正芹陈艳张英姚红霞朱平; 关键词：骨髓增殖性疾病急性髓系白血病细胞免疫表型

慢性髓细胞白血病BCR／ABL1突变克隆演化和治疗策略被引量：1: 2012年; 伊马替尼的应用使很多慢性髓细胞白血病（chronic myeloid leukemia,CML）患者获得了长期生存,但是CML的BCR-ABL1融合基因激酶区突变（kinase domain mutation,KDM）会造成耐药.KDM有多种类型,不同类型是随机出现的.带有不同KDM特征的白血病克隆有一定的演变规律.在伊马替尼用药期间,耐药程度较高的突变细胞容易发展为优势克隆.建议在治疗伊马替尼耐药的CML时,除了努力发展下一代酪氨酸激酶抑制剂以外,还可考虑用传统药物来辅助治疗.; 朱平; 关键词：融合蛋白质类哌嗪类突变

vWF基因单核苷酸多态性与血栓性疾病发病的关系被引量：3: 2010年; 最近发现,不仅血管性血友病因子(vWF)减少会造成血管性血友病,而且vWF水平增加也会造成各种血栓性疾病。vWF水平受遗传因素的影响,不同单核苷酸多态性(SNP)基因型的人群对疾病的易感性不尽相同;不同血型的个体vWF表达水平也不同。环境因素也可影响血浆vWF水平。了解vWF基因的启动子、外显子和内含子区域多态性与血栓性疾病的关系有助于临床疾病的预防与治疗。本综述讨论vWF基因的启动子、外显子和内合子区域SNP与血栓性疾病关系的研究进展。; 袁忠海朱平; 关键词：血管性血友病因子基因多态性血栓性疾病

vWF基因A1381T和-1793G/C多态性对中国裕固、藏及汉族人血浆vWF水平的影响被引量：4: 2012年; 本研究旨在探讨vWF基因A1381T(rs216311)和-1793G/C(rs7966230)单核苷酸多态性(SNP)在中国裕固族、藏族、汉族之间的异同及其对血浆vWF浓度的影响,了解3个民族对vWF相关疾病的易感性。抽取322位裕固族、399位藏族及120位汉族正常人的外周静脉血,提取DNA,采用PCR-限制性酶切片段长度分析vWF基因A1381T、-1793G/C SNP,测序验证。用ELISA试剂盒测定血浆vWF水平。结果表明,vWF基因A1381T位点和-1793G/C位点的基因型分布在裕固族、藏族和汉族中均有差异(P<0.05),其中A1381T位点中的G G基因型在裕固族中占69.9%,远高于藏族和汉族中的56.6%及53.3%(P<0.01),A1381T AA型表达vWF水平较低。-1793G/C中CG型在裕固族中所占的比例远高于汉族,CC型基因型表达较高vWF水平。血浆vWF水平随民族和vWF基因多态性的不同而明显不同。结论:vWF基因A1381T和-1793G/C位点基因多态性分布在中国裕固族、藏族和汉族中有明显差异;基因多态性影响血浆vWF表达水平;裕固族和藏族血浆vWF水平比汉族高,这与环境和生活习惯因素也有关系。; 傅玉朱平卜定方张英王明英龚艺文白德成; 关键词：裕固族汉族血管性血友病因子 VWF基因

ICAM-1基因K469E、K56M多态性对中国裕固族、藏族和汉族人血浆ICAM-1水平的影响: 2012年; 本研究检测中国裕固族、藏族和汉族3个民族人群血液中细胞间黏附分子-1(ICAM-1)基因K469E(A/G,rs5498)和K56M(A/T,rs5491)的基因多态性及血浆中可溶性ICAM-1(sICAM-1)水平,分析其基因型和等位基因频率在不同民族人群中的分布,探讨ICAM-1基因2个多态性位点对血浆中sICAM-1水平的影响。采集327例裕固族、400例藏族及126例汉族人群EDTA抗凝静脉血,采用大量全血基因组DNA提取试剂盒提取DNA,以PCR-RFLP进行DNA多态性分析,琼脂糖凝胶电泳后在凝胶扫描成像系统下判断基因型,DNA测序确定基因序列,比较ICAM-1基因型和等位基因频率在不同群体中的分布,通过Hardy-Weinberg遗传平衡定律检验群体代表性。采用人ICAM-1 ELISA试剂盒检测各民族人群血浆中sICAM-1水平。结果表明,DNA测序与PCR-RFLP分析结果一致。本研究检测到裕固族、藏族及汉族3个民族ICAM-1基因K469E位点KK、KE、EE 3种基因型,但它们的分布差异没有统计学意义,而K、E等位基因频率分布的差异有统计学意义(P<0.05)。裕固族和藏族分别与汉族群体之间的基因型和等位基因频率分布差异都有统计学意义(P<0.05)。K56M位点在3个民族中只检测出KK、KM 2种基因型,尚未检测到MM基因型;2种基因型和K、M等位基因频率分布在裕固族与汉族群体之间差异有统计学意义(P<0.05)。3个民族人群ICAM-1基因型和等位基因频率无明显性别比例和年龄分布差异,分布符合Hardy-Weinberg遗传平衡定律(P>0.05)。ICAM-1 K469E位点含K等位基因个体的sICAM-1血浆水平〔(253±122),(185±97)μg/L)〕高于不含K等位基因的个体〔(145±110)μg/L,P<0.01〕。ICAM-1 K56M位点含KK基因型的个体的sICAM-1血浆水平〔(253±122)μg/L〕高于KM基因型的个体〔(168±103)μg/L,P<0.01〕。裕固族和藏族群体中sICAM-1血浆水平〔(224±800),(214±111)μg/L〕高于汉族群体〔(175±125)μg/L,P<0.05〕,两两比较显示,裕固族与汉族群体及藏; 王明英白德成朱平傅玉卜定方张英; 关键词：细胞间黏附分子-1 K469E 藏族汉族

用流式细胞仪分析骨髓细胞诊断淋巴瘤被引量：2: 2010年; FCM已经成为临床诊断淋巴瘤的有力工具。骨髓细胞FCM诊断的主要依据是SSC和CD45细胞分布图上是否出现大小和分布不同于正常细胞的异常细胞，这种细胞是否存在和缺失相应的细胞表型。B细胞淋巴瘤的克隆性用免疫球蛋白κ或λ轻链限制性确定，然后根据CD5和CD10表达与否，分为4种类型，进一步区分B细胞淋巴瘤亚型。T细胞淋巴瘤的克隆性用TCR α/ β和γ/δ，TCR vβ25个家族的限制性确定，然后根据CD4和CD8表达与否，分为4种类型，进一步区分T细胞淋巴瘤亚型。NK细胞瘤可用CD56 EBV、细胞毒颗粒TIA-1、颗粒酶B和穿孔素阳性与否进一步确定亚型。; 朱平; 关键词：流式细胞仪淋巴瘤免疫表型

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国家高技术研究发展计划(2008AA062503)

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