江苏省自然科学基金(BK2003035) 作品数:59 被引量:130 H指数:7 相关作者: 沈爱国 程纯 刘海鸥 严美娟 邵晓轶 更多>> 相关机构: 南通大学 南通医学院 复旦大学上海医学院 更多>> 发文基金: 江苏省自然科学基金 国家自然科学基金 江苏省高校自然科学研究项目 更多>> 相关领域: 医药卫生 生物学 更多>>
P27与Skp2在大鼠脑损伤过程中的关系:参与了损伤后的胶质增生 目的:p27,作为细胞周期抑制因子家族的一员,在中枢神经系统发育过程中发挥着至关重要的作用。同时,Skp2作为F-box家族的一员,它在肿瘤细胞以及多种机体细胞中参与介导了p27的泛素化蛋白酶体降解,使得细胞周期能够顺利... 刘永华 沈爱国 程纯关键词:脑损伤 P27 SKP2 胶质细胞增生 β-1,4半乳糖基转移酶-I在钳夹伤后大鼠坐骨神经中表达的变化 2006年 为了观察β-1,4-半乳糖基转移酶-Ⅰ(β-1,4-galactosyltransferase-Ⅰ,β-1,4-GalT-Ⅰ)在正常和钳夹伤后大鼠坐骨神经中表达的变化,本研究采用RT—PCR方法,从小鼠坐骨神经中特异性地扩增β-1,4-GalT-ⅠcDNA片段并将其克隆到pGEM-T载体。采用体外转录的方法合成地高辛标记的正、反义β-1,4-GalT-ⅠRNA探针。通过原位杂交和图像分析的方法,观察β-1,4-GalT-ⅠmRNA在正常和夹伤大鼠坐骨神经中的表达及其变化。结果表明:β-1,4-GalT-Ⅰ mRNA在大鼠坐骨神经的髓鞘中表达,在夹伤坐骨神经后1-2d,β-1,4-GalTⅠmRNA在坐骨神经的表达最高,于夹伤后1周开始下降,在夹伤后1个月恢复至正常水平。上述结果提示坐骨神经夹伤后β-1,4-GalTⅠmRNA的表达发生变化,并且主要表达在坐骨神经的Schwann细胞。本研究结果为进一步分析β-1,4-GalT-Ⅰ在周围神经再生中的调控机制奠定了基础。 朱敏 沈爱国 丁炯 顾晓松 王鹤鸣关键词:RT-PCR 原位杂交 坐骨神经 cyclin D3与淋巴瘤细胞增殖相关性的初步研究 被引量:4 2005年 目的:初步探讨cyclin D3与淋巴瘤细胞增殖活性的相关性。方法:运用荧光免疫细胞化学法结合激光共聚焦显微镜观察,分析淋巴瘤细胞株Raji细胞内cyclinD3与Ki67表达、定位的关系。通过转染pDsRedcyclinD3和pSuPERcyclinD3siRNA质粒,分析改变cyclinD3表达水平对肿瘤细胞增殖能力的影响。结果:在分裂增殖旺盛的Raji细胞中,Ki67与cyclinD3共定位于细胞核内。导入外源性cyclinD3引起相应细胞核Ki67的表达增加,阻断内源性cyclinD3基因表达,导致同一细胞相同部位Ki67表达水平下降。结论:cyclinD3的表达水平与NHL细胞增殖活性密切相关,提示其可能在淋巴瘤的发生、发展过程中发挥重要作用。 程纯 邵晓轶 沈爱国 严美娟 张冬梅 刘海鸥关键词:CYCLIN 非霍奇金淋巴瘤 KI67 细胞增殖 大鼠坐骨神经夹伤后SSeCKS的表达变化 被引量:3 2007年 为了探讨大鼠坐骨神经夹伤后SSeCKS(Src抑制的蛋白激酶C底物)在神经中的表达变化及其意义,本研究制备了成年SD大鼠坐骨神经夹伤模型,通过Western blotting和免疫组织化学方法检测坐骨神经夹伤后SSeCKS表达的时空变化。Western blotting结果显示:大鼠坐骨神经夹伤后,SSeCKS的表达迅速升高,伤后6h即达到高峰,之后逐渐下降。免疫组织化学染色结果表明SSeCKS在神经夹伤两端高表达,以近端明显,呈簇状聚集。夹伤远端表达较近端稍低。远离夹伤处及相应对侧,SSeCKS的表达水平有所下降且分布较为均一。免疫荧光组织化学双标记结果显示:夹伤两端SSeCKS与S100和NF200的共存不明显,但可见部分SSeCKS与GAP43双标纤维。本研究提示大鼠坐骨神经夹伤可引起SSeCKS的表达变化,该变化可能参与周围神经损伤后某些伤害性刺激信号分子的转导并与损伤后神经的再生及功能修复有关。 陈莉 秦婧 沈爱国 刘海鸥 牛淑琼 高尚峰 史淑贤关键词:SSECKS 免疫组织化学 WESTERN BLOTTING 突触后密度蛋白-95在大鼠坐骨神经损伤后的表达 被引量:1 2007年 为了探讨突触后密度蛋白-95(PSD-95)在周围神经损伤过程中的表达变化,本实验建立大鼠坐骨神经夹伤模型,采用荧光定量PCR(real-timePCR)和Western blotting对PSD-95 mRNA及其蛋白水平进行定量检测,应用免疫荧光双标技术观察PSD-95与神经型一氧化氮合酶(nNOS)的共定位情况。结果显示,PSD-95 mRNA及其蛋白在正常坐骨神经中度表达,损伤后迅速下降;PSD-95 mRNA从损伤后2d开始表达上调;而其蛋白水平于损伤后1周明显升高。免疫荧光双标染色证实在坐骨神经损伤后1周PSD-95与nNOS共定位于Schwann细胞上,而与神经丝蛋白NF-200共定位不明显。本研究结果提示PSD-95通过nNOS参与了周围神经损伤修复过程。 高尚锋 程纯 陈梦玲 史淑贤 秦婧 沈爱国关键词:坐骨神经 神经型一氧化氮合酶 NMDA受体 β-1,4-GalT-I在大鼠脊髓损伤中的初步研究 目的:观察β-1,4-半乳糖基转移酶 I(β1,4 galactosyltransferase I、β-1,4-GalT-I)在大鼠脊髓损伤模型中的表达情况,探讨其在中枢神经重要组成部分-脊髓的发育、损伤与修复过程中的生... 沈爱国 牛淑琼 程纯关键词:大鼠脊髓损伤 半乳糖基转移酶 Dexamethasone inhibits proliferation and stimulates SSeCKS expression in C6 rat glioma cell line Although there is ample evidence that dexamethasone(Dex)have an antiproliferative effect on many cell types,th... 程纯关键词:DEXAMETHASONE SSECKS p27^kipl及相关分子Skp2在U937细胞增殖过程中的表达变化及相互关系 被引量:1 2007年 p27^kipl为CIP/KIP家族的主要成员,对细胞周期起负调节作用。由于p27^kipl的蛋白水平主要受到S期激酶相关蛋白2(S-phase kinase—associated protein 2,Skp2)介导的细胞周期依赖性、底物特异性的泛素-蛋白酶体途径调节,因此p27^kipl降解水平的调节对其正常生物学功能的发挥至关重要。Skp2为人类F-box蛋白家族成员,介导p27^kipl的多聚泛素化及随后的蛋白水解。研究发现Skp2在人类多种肿瘤中都有表达,并且与肿瘤组织的分化程度及预后相关。我们旨在对Skp2参与介导的p27^kipl的泛素-蛋白酶体途径降解与p27^kipl的稳定性之间的关系进行探讨,运用目前比较公认的血清饥饿合并释放方法同步化处理U937细胞,结合Western blot、免疫荧光双标记及激光共聚焦技术检测在不同生长状态下p27^kipl、Skp2及其他细胞周期相关分子在U937细胞内的表达和定位情况。 王熵婵 陆建新 沈爱国 张冬梅 邵晓轶 何松 程纯关键词:P27^KIPL SKP2 相关分子 增殖过程 泛素-蛋白酶体途径 N-糖链合成相关β-1,4半乳糖基转移酶在人星形胶质细胞瘤中的表达 2005年 目的分析与N-糖链合成相关β-1,4半乳糖基转移酶-Ⅰ、Ⅱ、Ⅴ(β1,4-galactosyltransferaseⅠ、Ⅱ、Ⅴ,β-1,4-GalT-Ⅰ、Ⅱ、Ⅴ)mRNA在正常脑组织和各级人星形胶质细胞瘤的表达变化。方法采用RT-PCR方法,分析β-1,4-GalT-Ⅰ、Ⅱ、Ⅴ在人星形胶质细胞瘤的表达存在。以扩增的3种同工酶cDNA片段作为探针进行标记,Northernblot分析其mRNA在正常脑组织和各级人星形胶质细胞瘤中的表达变化。结果RT-PCR检测到β-1,4-GalT-Ⅰ、Ⅱ、Ⅴ在人星形胶质细胞瘤中的表达存在。northernblot发现β-1,4-GalT-Ⅱ、Ⅴ在正常脑组织中有表达,但β-1,4-GalT-Ⅱ的表达较低,而β-1,4-GalT-Ⅰ在正常脑组织中表达极低。β-1,4-GalT-Ⅰ、Ⅱ、Ⅴ在星形胶质细胞瘤中的表达显著高于正常脑组织。其中,β-1,4-GalT-Ⅰ、Ⅱ在各级胶质瘤中的表达没有明显差异。而β-1,4-GalT-Ⅴ的表达随胶质瘤分级的增高而增加。结论N-糖链合成相关的β-1,4-GalT-Ⅰ、Ⅱ、Ⅴ在人脑星形胶质细胞瘤发生过程中的表达不同,尤其是β-1,4-GalT-Ⅴ的表达与人星型胶质瘤的恶性程度显著相关。 严美娟 沈爱国 邵晓轶 李爱红 王惠民 顾建新 程纯关键词:半乳糖基转移酶 N-糖链 正常脑组织 NORTHERN NORTHERN 脑星形胶质细胞瘤 β1,4-半乳糖基转移酶1在中枢神经系统炎症过程中的表达 目的本课题组探讨中枢神经系统(CNS)炎症过程中β1,4半乳糖基转移酶Ⅰ(β-1,4-GalT-Ⅰ)以及其催化合成的Galβ1-4GlcNAc糖链的表达以及其生物功能。方法(1)大鼠脊髓局部注射脂多糖(LPS)建立大鼠C... 陈建平 程纯 沈爱国关键词:中枢神经系统炎症 半乳糖基转移酶 小胶质细胞