吉林省科技发展计划基金(20120229)
- 作品数：3 被引量：10H指数：2
- 相关作者：马红霞高云航裴志花唐艳孔令聪更多>>
- 相关机构：吉林农业大学更多>>
- 发文基金：吉林省科技发展计划基金国家自然科学基金教育部“新世纪优秀人才支持计划”更多>>
- 相关领域：农业科学更多>>
- 吉林省育肥牛呼吸系统疾病的病原分离鉴定及耐药性分析被引量：7
- 2014年
- 以吉林省规模化肉牛养殖场为监测基地，对2010年-2012年期间发生呼吸系统疾患的病牛进行病原分离与鉴定，共获得8株牛源荚膜血清A型多杀性巴氏杆菌和2株牛支原体。耐药性检测结果表明，大部分牛源荚膜血清A型巴氏杆菌为多重耐药株，且不同养殖场所分离的菌株耐药谱不同，2株牛支原体对受检药物相对敏感。
- 孔令聪高铎高云航马红霞
- 关键词：牛支原体药敏试验
- 家蝇幼虫防御素基因MddⅠ的克隆与原核表达被引量：3
- 2013年
- 以猪肺炎支原体诱导家蝇幼虫的cDNA为模板,通过cDNA末端快速扩增技术(RACE)对MddⅠ基因进行扩增,对扩增产物测序和分析。构建重组表达质粒pET-32a-MddⅠ,在大肠杆菌BL21(DE3)中用IPTG对其诱导表达,对表达产物进行SDS-PAGE分析。结果,MddⅠ基因全长475bp,其开放阅读框(ORF)276bp,编码91个氨基酸,编码蛋白的理论分子质量9.7ku,理论等电点(pI值)8.89,存在信号肽的剪切位点,亲水性较强且无明显跨膜区,α螺旋和不规则盘绕为其主要结构元件,β折叠散布在整个蛋白质中。具有Defensin-2家族保守区域,与GenBank中登录号为AY260152同源性最高,达78%。构建的重组表达质粒pET-32a-MddⅠ在大肠杆菌BL21(DE3)中表达出分子质量约为25ku的蛋白质,与预期大小一致。结果表明,MddⅠ基因具有完整的开放阅读框,为新的家蝇防御素基因;MddⅠ基因在原核表达系统中的表达为进一步研究表达产物的生物学活性和免疫学活性奠定了基础。
- 万玲傅小蒙唐艳孙小宁裴志花刘树明马红霞
- 关键词：家蝇防御素原核表达
- 牛多杀性巴氏杆菌诱导家蝇幼虫抑制性消减文库的构建
- 2013年
- 采用牛多杀性巴氏杆菌针刺法诱导3日龄家蝇幼虫,提取诱导后的家蝇幼虫总RNA并分离纯化得到高质量的mRNA。运用抑制性消减杂交(Suppression subtractive hybridization,SSH)技术构建家蝇幼虫差异表达的cD-NA消减文库,并利用反向Northern杂交技术筛选差异表达基因。结果表明,随机挑取的阳性克隆片段大小均在200～750bp,通过反向Northern杂交共筛选出183个差异表达基因,经BLAST比对分析后鉴定出大量与家蝇免疫防御功能相关的基因和一部分无同源性基因。
- 王莹高云航马红霞裴志花唐艳
- 关键词：家蝇幼虫抑制性消减杂交BLOT
