博士科研启动基金(104310-20700903)
- 作品数:3 被引量:8H指数:1
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- 家蚕芳基贮藏蛋白新成员BmSP3的基因克隆与表达分析被引量:1
- 2014年
- 贮藏蛋白在家蚕幼虫5龄盛食期的脂肪体中高量表达,为家蚕变态发育提供重要的营养物质,已报道的家蚕贮藏蛋白成员包括BmSP1和BmSP2,其中BmSP2为富含芳香族氨基酸的芳基贮藏蛋白(arylphorin)。从家蚕5龄幼虫脂肪体中鉴定并克隆了一个新的芳基贮藏蛋白基因,命名为BmSP3(GenBank登录号:JQ043182)。该基因ORF全长2 091 bp,编码697个氨基酸,BmSP3与BmSP2具有较高的序列相似性。半定量RT-PCR和实时荧光定量PCR检测显示:BmSP3在家蚕5龄第3天幼虫的脂肪体、表皮、生殖腺和头部中均有表达,其中在脂肪体中的表达水平最高,并且同一组织中雌蚕的表达水平明显高于雄蚕;BmSP3在4龄末幼虫的脂肪体中就有表达,5龄中期表达水平开始明显增加,到上蔟前达到最高峰,之后急剧下降。Western blot检测显示:BmSP3在家蚕幼虫阶段主要存在于血淋巴中,化蛹时转运至脂肪体中,在羽化前逐渐被降解。BmSP3基因的转录及蛋白质合成、转运特征与BmSP2极为相似。
- 李建伟王阿蓉李懿黎治浪龚竞侯勇夏庆友
- 关键词:家蚕基因克隆
- 家蚕蛋白质组研究进展
- 2009年
- 蛋白质组学是后基因组学研究的重要内容,是功能基因组学研究的重要组成部分。近几年来,家蚕蛋白质组的研究越来越受到人们的重视,包括家蚕丝腺、血液、脂肪体、中肠、马氏管等10多种组织器官的蛋白质组都已成为人们研究的热点,大量高水平家蚕蛋白质组学研究论文相继发表。本文将对近几年内家蚕蛋白质组学的研究进展做归纳整理,并对家蚕蛋白质组学未来的发展趋势进行展望。
- 侯勇龚竞
- 关键词:家蚕蛋白质组双向电泳MS
- 家蚕5龄第3天血液蛋白的双向电泳及质谱分析被引量:7
- 2008年
- 基于为家蚕血液比较蛋白质组学的研究提供基础信息的目的,利用双向电泳技术对家蚕5龄幼虫的血液蛋白进行分析,并采用基质辅助质量飞行时间质谱(MALDI-TOF MS)对其中一些表达量较高的蛋白进行了肽质量指纹图谱分析鉴定。120μg血液蛋白经过双向凝胶电泳及考马斯亮蓝染色后可以检测出106个蛋白点,60μg血液蛋白经双向电泳及银染后可以检测出126个蛋白点,这些蛋白点主要集中在分子质量15~80kD区域,等电点4~7。MALDI-TOF MS鉴定的52个蛋白点中都有较强的肽质量指纹信号峰,其中成功鉴定了46个蛋白点。在这些蛋白中,不仅包含了SP贮存蛋白和30K低分子量脂蛋白等家蚕血液蛋白的主要成分,还包含了大量与代谢相关的蛋白酶类、蛋白酶抑制剂、离子转运蛋白、免疫相关因子、分子伴侣等不同种类的蛋白。
- 侯勇赵萍邹勇钟晓武夏庆友
- 关键词:家蚕血液蛋白双向电泳