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浙江省科技计划项目(2004C32050)
作品数:
3
被引量:4
H指数:1
相关作者:
徐步进
徐海圣
曾健
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相关机构:
浙江大学
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发文基金:
浙江省科技计划项目
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生物学
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2008
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蟹源易损气单胞菌气溶素基因的克隆及其PCR检测
2008年
利用设计的特异引物,采用PCR技术,对蟹源致病性易损气单胞菌气溶素基因(aer)进了克隆和序列分析,从其基因组中克隆出长为622 bp的基因片断,用限制性内切酶BamHI对扩增产物进行酶切,产生长约570 bp和50 bp两条片断;研究还利用设计的特异引物,对蟹源致病性易损气单胞菌进行PCR快速分子鉴定的研究。
徐海圣
曾健
徐步进
关键词:
基因
PCR
蟹源副溶血弧菌胞外蛋白酶的纯化与特性分析
被引量:4
2008年
采用硫酸铵盐析、Sephadex G-100凝胶层析和DEAE—Cellulose离子交换柱层析等方法,从中华绒螯蟹Eriocheir sinensis弧菌病病原菌——副溶血弧菌Vibrio parahemolyticus的胞外产物中分离纯化出两种具有致病作用的胞外蛋白酶。相对分子质量为39600的蛋白酶是一种金属蛋白酶,EDTA可抑制其活性,金属离子Cu^2+、Mg^2+、Fe^2+对该酶有抑制作用,而Ca^2+对其则有一定程度的激活作用;该酶在50—60℃下热稳定性最好,最适pH为9。而相对分子质量为20000的蛋白酶属于丝氨酸蛋白酶,EDTA对其酶活力几乎没有影响,但苯甲基磺酰氟(PMSF)可抑制其酶活性;该酶的最适温度为50℃,最适pH为8。
徐海圣
徐步进
关键词:
中华绒螯蟹
副溶血弧菌
胞外蛋白酶
纯化
中华绒螯蟹血清凝集素的分离纯化与性质研究
2008年
运用硫酸铵盐析和GlcNAc-Sepharose6B亲合层析等方法从中华绒螯蟹的血清中分离出一种天然的凝集素,经SDS-PAGE测得其分子量约为82kD,由单一亚基组成,由等电聚焦凝胶电泳测得其等电点(pI)为5.4。糖凝集抑制试验中检测到葡萄糖、半乳糖、甘露糖、乳糖、果糖和蔗糖对中华绒螯蟹血清凝集素均没有抑制作用,但N-乙酰氨基糖GlcNAc、GalNAc和ManNAc等能抑制其凝集活性。热变性试验结果表明,温度为10~50℃,凝集素仍保持强的凝集活性,但温度升至60℃后,凝集活性迅速下降,至80℃失去凝集活性,在pH4.0~8.0的各缓冲液中保持较强的凝集活性,而在此pH范围外,凝集活性均有不同程度的下降。中华绒螯蟹血清凝集素可使外源红血细胞发生凝集,还具有凝集细菌或抗菌作用。
徐海圣
徐步进
关键词:
中华绒螯蟹
凝集素
纯化
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