东莞市科技计划项目(2007108101108)
- 作品数：5 被引量：6H指数：2
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- 菊酯类农药降解酶基因原核表达条件的优化被引量：1
- 2015年
- 绘制了菊酯类农药降解酶基因工程菌E.coliBL21(DE3)/pET-28a-est825的生长曲线,优化了诱导起始菌液浓度、诱导剂浓度、诱导温度及诱导时间等条件,得到该基因工程菌诱导表达的最适条件:发酵培养至菌液OD600值为4时,添加终浓度为6g/L的乳糖,37℃诱导8h,酶的表达量最高,酶活为95U/mL,纯化后的重组酶分子量为30.1ku。
- 黄皓梁卫驱李艳芳胡珊罗华建陈仕丽徐匆
- 关键词：重组大肠杆菌
- 菊酯类农药降解酶Est825的降解效果及安全性评价初报被引量：2
- 2014年
- 通过试验表明高密度发酵制备的菊酯类农药降解酶Est825对菊酯类农药的降解率达70%以上,其降解农药的最适活力浓度为120 U/mL,最适反应温度范围为32~37℃;测定了菊酯类农药降解酶对SD大鼠急性经口毒性,LD50>6 g/kg体重,属实际无毒;皮肤变态试验结果表明该酶制剂不引起皮肤变态反应。
- 梁卫驱黄皓李艳芳胡珊罗华建陈仕丽徐匆
- 关键词：降解效果安全性评价
- 重组大肠杆菌发酵表达菊酯类农药降解酶培养基优化被引量：1
- 2014年
- 通过单因素及正交试验,研究了碳源、有机氮源、无机氮源对重组大肠杆菌Eschericha.coli BL21(DE3)/pET-28a-est825菌体生长及产酶的影响,进而优化了产酶培养基,确定最佳培养基组成为:甘油20 g/L,酵母粉20g/L,硫酸铵5 g/L,NaCl 5 g/L,Na2HPO4·12H2O 10.7 g/L,KH2PO42.7 g/L,硫酸卡那霉素50μg/L,pH 7.0。采用此培养基发酵所得发酵液酶活力较优化前提高了86%。
- 黄皓梁卫驱罗华建胡珊李艳芳陈仕丽徐匆
- 关键词：重组大肠杆菌培养基
- 酶定向进化文库的筛选方法被引量：1
- 2014年
- 酶工程作为生物技术的主体之一,对农产品加工等的发展具有广泛作用。自然界中的酶往往不能满足实际生产,因此需要通过模拟自然界中的蛋白质进化,对酶进行改造和突变文库筛选,最终得到符合实际生产的酶。目前,改造酶的途径主要有定点突变和定向突变两种。突变体文库的建立方法较为成熟,并且建立起的文库库容也能够达到研究者的要求,但是突变体文库的筛选受现有技术等所局限,成为了定向进化技术的瓶颈。介绍了几种常用的突变体文库的筛选方法,对它们的原理及特点进行阐述,并对未来的发展方向及趋势进行了总结。
- 徐匆李艳芳黄皓梁卫驱胡珊陈仕丽罗鸿斌罗华建
- 关键词：酶定向进化
- 一种定量检测拟除虫菊酯类农药降解酶降解效果的方法被引量：2
- 2010年
- 建立了一种定量检测拟除虫菊酯类农药降解酶降解效果的方法。研究了在37℃拟除虫菊酯类农药降解酶对菊酯类农药的降解效果,用石油醚提取降解后的残留农药,并采用气相色谱法测定了其浓度,计算降解率。检测结果表明,样液浓度在0.05～0.60mg/L范围内时,校准曲线相关系数为0.9987～0.9999,回收率为93.3%～113.8%,相对标准偏差为0.50%～3.9%,检出限为0.0007～0.003mg/L。此方法灵敏度高,适用于不同菊酯类农药降解酶酶液的检测,从而为拟除虫菊酯类降解酶的研究和评价提供科学依据。
- 李艳芳罗华建李亮梁卫驱叶瑜霏陈仕丽胡珊黄皓
- 关键词：降解酶气相色谱
