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樟树叶纤维素液态发酵的工艺优化被引量：2: 2015年; 为获得樟树叶纤维素液态发酵的最佳工艺条件,以KOH预处理后的樟树叶为原料,利用中药作为添加剂,在单因素的基础上,以还原糖的浓度作为考察指标,进行Box-Behnken实验设计,对樟树叶纤维素液态发酵进行响应面分析。樟树叶纤维素液态发酵的最佳培养基条件为:樟树叶粉末6%、麦麸1.6%、天麻粉末3%。优化后的还原糖浓度为2.5418mg/m L,而初始的还原糖浓度为0.7531 mg/m L,提高了3.38倍。天麻粉末少量的添加能大幅度的提高樟树叶纤维素的转化率,具有较高的应用价值,并为林木纤维废物利用提供借鉴作用。; 曾柏全冯金儒朱永瑞徐甜; 关键词：纤维素酶樟树叶液态发酵中药

青霉产纤维素酶液态发酵的优化: 2014年; 利用中药粉末作为添加剂,在单因素的基础上,以CMC酶活为考察指标,进行BoxBehnken试验设计,对青霉发酵培养基进行响应面分析试验。青霉最佳发酵培养基条件为:麦芽糖3%、硫酸铵0.6%、天麻粉末3%。其优化后的CMC酶活为143.82 U/m L,而初始基本发酵培养基的CMC酶活仅为40.98 U/m L,提高了250.96%。中药天麻粉末的少量添加能大幅度地提高青霉产纤维素酶的酶活,具有较高的应用价值。; 冯金儒曾柏全朱永瑞徐甜; 关键词：纤维素酶青霉液态发酵中药

核诱变(^(60)Co-γ射线)高产纤维素酶菌的选育及分子鉴定: 2013年; 从湖南岳麓山枯枝腐木土壤层下取样,筛选出产纤维素酶较高的菌株A24,采用紫外与60Co-γ射线诱变获得的高产纤维素酶菌株系(Co-07)为研究对象,对菌株的16s rDNA进行扩增、测序,利用NCBI数据库进行Blast比对,经MEGA5.0软件构件系统发育树后可以确定为链霉菌属中的三泽链霉菌亚种。; 曾柏全许志; 关键词：放线菌纤维素酶分子鉴定

双亲灭活青霉菌与枯草芽孢杆菌原生质体融合被引量：8: 2015年; 目的：为选育具有高纤维素酶活性且强抗逆性的新菌株,将高产纤维素酶的青霉菌Penicillium Q5与强抗逆性的枯草芽孢杆菌Bacillus subtilis K3进行原生质体融合。方法：采用双亲灭活原生质体技术对青霉菌与枯草芽孢杆菌进行原生质体融合,考察原生质体制备条件与融合中的影响因素。结果：对亲本菌株进行酶解前处理,随着酶解浓度和酶解时间的增加,原生质体的形成率随之增大,而再生率下降。对融合过程进行正交试验,结果在融合温度38℃,融合时间10 min,PEG质量浓度0.4 g/L的条件下,融合率为3.08×10-7。在172株融合子中筛选出1株R62,保留了亲本的酶活且在p H 8~10条件下有较强的抗逆性。结论：双灭活原生质体融合方法成功选育出具有抗逆性的高产纤维素酶菌株。; 曾柏全李淼冯金儒; 关键词：原生质体融合青霉菌枯草芽孢杆菌

高产纤维素酶菌株原生质体制备及再生条件被引量：11: 2013年; 研究青霉菌Penicillium Q5和枯草芽孢杆菌Bacillus subtilis K3原生质体制备与再生的最佳条件。采用酶解法制备了青霉菌和枯草芽孢杆菌的高质量的原生质体。试验对亲本菌株的菌丝生长,酶浓度,酶解时间和灭活时间进行了优化。亲本菌株Q5,培养液中加入浓度0.5%甘氨酸和含量10%的蔗糖处理后,在质量浓度均为10 mg/mL的溶菌酶和蜗牛酶(1︰1)酶解作用下,35℃处理3 h,原生质体生成量达到最大值,为7.35×106cfu/mL;亲本菌株K3,用4 U/mL的青霉素处理,在1 mg/mL的溶菌酶作用下,35℃处理1 h,原生质体形成率与再生率的乘积达到最大值,此时K3原生质体量为1.46×107cfu/mL。青霉菌在65℃热灭活的时间为1 h,紫外灭活时间为3 min;枯草芽孢杆菌在65℃热灭活的时间是2.5 h,紫外灭活时间为5 min。这为后续原生质体融合选育具有抗逆性的高产纤维素酶菌株打下基础。; 李淼曾柏全冯金儒; 关键词：原生质体制备原生质体再生

黑曲霉C112纤维二糖酶基因的克隆与生物信息学分析被引量：1: 2016年; 以紫外诱变获得的高产纤维素酶黑曲霉C112菌株为模板,采用RT-PCR技术克隆黑曲霉C112的纤维二糖酶基因bgl(Gen Bank登录号:KP307454);该基因全长2 934 bp,含有非编码序列,编码860个氨基酸,等电点为4.70,核酸序列与数据库的Aspergillus niger(Gen Bank登录号JX982101.1)同源性达到了99%;生物信息学分析表明,纤维二糖酶为具有一定亲水性的稳定酸性分泌蛋白;二级结构以α-螺旋、β-折叠和无规则卷曲为结构元件;该基因经IPTG诱导重组蛋白表达,SDS-PAGE检测结果表明,重组表达产物的相对分子量约为93.3 k D,与预期相符;纤维二糖酶在大肠杆菌BL21中胞内融合表达,重组蛋白p NPG酶活为5.847U/m L,最适反应温度为50℃,最适p H值为5.0。; 朱永瑞曾柏全曾磊刘辉; 关键词：纤维二糖酶克隆生物信息学

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湖南省教育厅科研基金(13A123)