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广东省科技计划工业攻关项目(20118031800102)
作品数:
1
被引量:4
H指数:1
相关作者:
穆攀伟
曾龙驿
江玮
李晓峰
鲁红云
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相关机构:
中山大学附属第三医院
中山大学
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发文基金:
广东省科技计划工业攻关项目
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作者
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鲁红云
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李晓峰
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江玮
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曾龙驿
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穆攀伟
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中华医学杂志
年份
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2013
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人皮下、网膜脂肪组织来源前脂肪细胞的原代培养及甘精胰岛素对其增殖、分化的影响
被引量:4
2013年
目的探讨人皮下、网膜脂肪组织来源的前脂肪细胞形态、功能的差异,观察不同浓度甘精胰岛素对其增殖、分化的影响。方法胶原酶分离法原代培养人皮下、网膜前脂肪细胞,倒置显微镜下观察不同来源的人前脂肪细胞在形态方面的差异,不同浓度甘精胰岛素(20、200、500、100(3、1500nmol/L)干预其增殖及分化过程,四甲基偶氮唑盐(MTT)法检测二者增殖的差异,实时定量PCR检测脂肪分化相关基因表达的差异。结果(1)可从人皮下、网膜脂肪组织分离出前脂肪细胞,并在体外扩增,皮下前脂肪细胞更细长,容易增殖,而网膜前脂肪细胞呈多角形,易于老化。(2)MTT法结果显示甘精胰岛素抑制网膜前脂肪细胞的体外增殖,且其抑制作用具有剂量依赖性,1000nmol/L干预72h后,与未加胰岛素组相比,网膜前脂肪细胞的增殖明显低[吸光度(A)值:0.144±0.021比0.267±0.040,P〈0.01];皮下前脂肪细胞作用不明显(A值:0.305±0.045比0.350±0.037,P〉0.05)。(3)500nmol/L的胰岛素浓度是人前脂肪细胞分化的适宜浓度,PCR结果显示该浓度时,对于皮下前脂肪细胞,脂肪分化的标志基因过氧化物酶增殖物激活受体(PPAR)γ(F=31.31,P〈0.01)和CCAAT/增强子结合蛋白0l(C/EBP(x)mRNA表达最高(F=9.86,P〈0.05),前脂肪细胞的标志基因Pref-1表达最低(皮下F=68.95,P〈0.01;网膜F=30.38,P〈0.01),但是胰岛素浓度对网膜脂肪细胞PPARγ、C/EBPαmRNA影响不大(均P〉0.05)。结论甘精胰岛素可抑制人网膜前脂肪细胞的增殖,促进皮下、网膜前脂肪细胞的分化。
鲁红云
李晓峰
穆攀伟
江玮
曾龙驿
关键词:
细胞培养技术
细胞分化
前脂肪细胞
甘精胰岛素
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