安徽省自然科学基金(03043705)
- 作品数：10 被引量：93H指数：4
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- 相关机构：蚌埠医学院第一附属医院复旦大学蚌埠医学院第二附属医院更多>>
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- Survivin反义寡核苷酸诱导肺癌细胞株凋亡的研究被引量：4
- 2005年
- 目的 :探讨生存素 (Survivin)的反义寡核苷酸 (ASODN)对肺癌细胞株的作用。方法 :在脂质体介导下 ,分别以10 0nmol/L、30 0nmol/L和 5 0 0nmol/L的SurvivinASODN作用于小细胞肺癌细胞株NCI H4 4 6和肺腺癌细胞株SPC A1,于2 4h、4 8h、72h用逆转录聚合酶链反应 (RT PCR)检测SurvivinmRNA表达 ,Westernblot检测Survivin蛋白 ,流式细胞仪检测凋亡。结果 :NCI H4 4 6和SPC A1皆表达Survivin基因和蛋白。随着ASODN浓度增加 ,SurvivinmRNA明显下调 ,其差异有显著性 ,其中ASODN 5 0 0nmol/L作用 72h时两种细胞SurvivinmRNA抑制率分别达 6 2 .72 %和 6 7.4 3% ;Survivin蛋白表达也有类似的变化 ;ASODN对两种细胞生长抑制和诱导凋亡作用随浓度增大和作用时间延长而增强。结论 :SurvivinASODN能够抑制肺癌细胞株Survivin基因和蛋白表达 ,呈时间、浓度依赖性 ,诱导凋亡的效果也呈剂量、时间依赖性 ,5 0 0nmol/L的浓度作用 72h效果最佳。
- 夏雪梅陈余清蔡映云李殿明胡俊锋黄礼年
- 关键词：肺肿瘤生存素反义寡核苷酸凋亡
- Survivin反义寡核苷酸联合顺铂诱导肺癌细胞凋亡的研究被引量：4
- 2006年
- 李伟陈余清周继红夏雪梅李殿明高华
- 关键词：SURVIVIN反义寡核苷酸肺癌细胞凋亡顺铂凋亡抑制蛋白基因家族抗癌效果
- 纤维支气管镜活检病变组织标本和痰标本Survivin基因的检测对肺癌的诊断价值被引量：47
- 2005年
- 目的明确纤维支气管镜(以下简称纤支镜)活检病变组织和痰标本中SurvivinmRNA的检测在肺癌诊断中的意义。方法应用逆转录聚合酶链反应(RT PCR)法检测41例肺癌手术标本癌组织、癌旁组织和9例良性肺疾病病变组织手术标本,80例肺癌和30例良性肺疾病纤支镜活检病变组织标本及所有(160例)患者痰标本SurvivinmRNA表达情况,并与病理组织学、刷检细胞学和痰细胞学检查结果比较。结果肺癌手术切除标本癌组织SurvivinmRNA的阳性率为70.7%(29/41),高于癌旁组织[17.1%(7/41)]和良性肺疾病组织(1/9),差异有统计学意义(χ2值分别为23.97和10.93,P均<0.05),而癌旁组织与肺良性疾病组织相比,差异无统计学意义(χ2=0.20,P>0.05);纤支镜活检肺癌组织标本SurvivinmRNA的阳性率为63.8%(51/80),高于良性肺疾病的13.3%(4/30,χ2值为22.18,P<0.05);肺癌患者癌组织SurvivinmRNA表达与否及表达水平与患者年龄、性别及肿瘤的病理分型、分级、部位及转移情况均无明显相关性(P均>0.05)。肺癌患者痰标本SurvivinmRNA的阳性率是59.5%(72/121),癌细胞的检出率是47.1%(57/121);痰Survivin mRNA检测联合痰细胞学检查诊断肺癌的敏感性为80.2%(97/121),高于单独痰细胞学及单独痰SurvivinmRNA检测的敏感性(P均<0.05)。手术标本、纤支镜活检标?
- 陈余清李殿明蔡映云刘超夏雪梅胡俊锋
- 关键词：SURVIVIN基因纤维支气管镜活检痰标本纤支镜活检X^2值肺良性疾病
- 支气管肺泡灌洗液中survivin基因检测在肺癌诊断及评估化疗疗效和预后中的意义被引量：6
- 2009年
- 目的:探讨支气管肺泡灌洗液(BALF)中survivin基因检测在肺癌尤其是周围型肺癌诊断中的价值,以及评估survivin在判断肺癌化疗疗效、预后中的意义。方法:应用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR),检测84例肺癌患者及36例肺良性疾病患者BALF中survivin表达的情况,随访2年分析survivin基因表达与肺癌患者生存期的关系。对其中67例Ⅲa～Ⅳ期非小细胞肺癌患者化疗2周期后进行疗效评价,分析其与survivin基因表达的关系。结果:肺癌及肺良性疾病BALF中survivin基因表达率分别是54.8%(46/84)和2.8%(1/36)。周围型肺癌BALF中survivin表达率40.0%,明显高于灌洗液细胞学阳性率。BALF中survivin基因表达阴性肺癌患者,其化疗疗效明显优于survivin表达阳性者。肺癌患者BALF中survivin基因表达阴性者,2年生存率明显高于survivin基因表达阳性者。结论:BALF中survivin基因表达的检测可能对肺癌诊断具有一定价值,尤其对于周围型肺癌,其价值优于BALF中细胞学检查。survivin基因表达阳性提示可能化疗疗效差,2年生存率低。
- 夏雪梅陈余清刘超李殿明黄礼年李翠侠
- 关键词：肺肿瘤支气管肺泡灌洗液SURVIVIN化疗疗效
- Survivin反义寡核苷酸协同Taxol诱导肺癌细胞株凋亡被引量：3
- 2005年
- [目的]研究Survivin反义寡核苷酸(antisenseoligonucleotide,ASODN)单独或联合Taxol对肺癌细胞株SurvivinmRNA和蛋白表达,细胞凋亡,生长抑制率的影响。[方法]SurvivinASODN经脂质体介导转染人小细胞肺癌细胞株NCI-H446,用RT-PCR法、Westernblot法检测Survivin表达;SurvivinASODN单独、联合Taxol作用NCI-H446细胞后,用MTT法检测细胞生长抑制率,台盼兰拒染实验检测细胞死亡率,流式细胞仪检测细胞凋亡并计算两药相互作用指数(CDI)。[结果]SurvivinASODN转染NCI-H446细胞后,SurvivinmRNA表达和蛋白表达明显下调,其中SurvivinASODN500nM作用72h时SurvivinmRNA抑制率达62.72%,效果最佳;SurvivinASODN单独或联合Taxol作用NCI-H446细胞后发现SurvivinASODN联合Taxol作用的效果明显优于两药单独应用(P<0.01)。其联用时细胞凋亡率达73.3%,而单用时分别为43.6%和23.8%。其联用时细胞生长抑制率达80.1%,而单用时抑制率分别为50.4%和30.5%(P均<0.01)。两药联用组细胞死亡率达69.9%,高于两药单用时的41.4%和24.8%(P均<0.01);CDI值为0.43,表明两药具有显著协同作用。[结论]SurvivinASODN能够抑制肺癌细胞株SurvivinmRNA和蛋白表达并诱导肺癌细胞凋亡;SurvivinASODN能够增加Taxol的敏感性。
- 陈余清夏雪梅蔡映云黄礼年李殿明胡俊锋
- 关键词：肺癌细胞株SURVIVIN反义寡核苷酸凋亡
- survivin抗肺癌细胞凋亡的分子机制被引量：23
- 2006年
- 目的研究survivin反义寡核苷酸(ASODN)诱导肺癌细胞凋亡的作用,探讨survivin抗肺癌细胞凋亡的分子机制。方法在脂质体介导下,分别以100 mmol/L、300 mmol/L和500 mmol/L浓度的survivin ASODN,作用于肺癌细胞株NCI-H446 24 h、48 h和72 h后,用RT-PCR和Western blot检测survivin mRNA及蛋白表达,流式细胞仪(FCM)检测细胞凋亡；Rh123染色法检测细胞线粒体膜电位(△Ψm)变化；ELISA法检测胞浆细胞色素C(cyt C)浓度；比色法检测胞浆内天冬氨酸特异性半胱氨酸蛋白酶-9(caspase-9)、caspase-3的活性；Western blot检测caspase-8蛋白表达；加入环孢霉素A (CsA)后,以FCM检测细胞凋亡。结果与各对照组相比,survivin ASODN显著下调了survivin mRNA表达,且呈时间和浓度依赖性,其中以500 mmol/L作用72 h时效果最佳,抑制率达62．7%,其蛋白表达也显著下调。NCI-H446细胞的凋亡指数(AI)为48．35%,明显高于对照组(3．75%)、空脂质体组(3．41%)、无义寡核苷酸(NSODN)组(4．69%)、100和300 mmol/L ASODN组(19．85%和34．39%)；增殖指数(PI)为24．38%,明显低于上述各组(75．54%、73．12%、71．76%、51．03%和38．94%,P均＜0．01)。survivin ASODN导致细胞△Ψm逐渐下降,并相继引起cyt C的释放、caspase-9和caspase-3的激活,而caspase-8酶原无变化。CsA显著抑制了survivin ASODN诱导的细胞凋亡。结论survivin通过调控线粒体凋亡途径发挥抗肺癌细胞凋亡作用；survivin ASODN能够显著下调survivin mRNA及蛋白表达,诱导肺癌细胞凋亡,抑制细胞增殖。
- 陈余清李伟周继红李殿明夏雪梅黄礼年李柏青
- 关键词：SURVIVIN细胞凋亡
- 肺癌组织survivi nmRNA的表达及其与预后的关系被引量：3
- 2005年
- 目的:探讨生存素(survivin)mRNA在肺癌组织中的表达与临床病理及其预后的关系。方法:应用逆转录聚合酶链反应(RT PCR)检测4 1例肺癌患者、9例良性肺疾病患者手术标本中的survivinmRNA表达,并随访2年,将其表达及表达强度与临床病理特征进行相关分析。结果:肺癌患者手术标本癌组织中survivinmRNA表达的阳性率(70 .7% )均高于癌旁正常组织(17.1% )和良性肺疾病患者组织survivnmRNA表达的阳性率(1/9) (P <0 .0 0 5 ) ;癌旁正常组织与良性肺疾病组织survivinmRNA表达的阳性率差异无显著性(P >0 .0 5 ) ;survivinmRNA在肺癌组织的表达及表达强度与年龄、性别、病理分型、病理分级、解剖部位分型及淋巴结和(或)不同肺叶及远处转移均无明显关系(P >0 .0 5 ) ,但与预后有明显关系(P =0 .0 0 18)。结论:肺癌组织检测survivinmRNA表达可以作为肺癌诊断的特异性分子标志物之一。
- 李殿明刘超陈余清夏雪梅黄礼年李柏青
- 关键词：肺肿瘤生存素MRNA预后
- 凋亡抑制基因survivin反义寡核苷酸联合bcl-2反义寡核苷酸诱导肺癌细胞株凋亡的实验观察被引量：2
- 2005年
- 目的探讨凋亡抑制基因survivin反义寡核苷酸单用或联用bcl-2反义寡核苷酸对肺癌细胞株的作用,探讨其在抗癌方面的作用。方法①实验于2002-08/2003-04在蚌埠医学院免疫学实验室完成。将对数生长期NCI-H446细胞分为6组空白对照组,脂质体10m g/L组(仅加空脂质体),NSODN500nm ol/L组(该3组均为对照组),survivin反义寡核苷酸500nm ol/L组,bcl-2反义寡核苷酸5μm ol/L,survivin反义寡核苷酸500nm ol/L+bcl-2反义寡核苷酸5μm ol/L组(分别在脂质体介导下转染不同寡核苷酸,48h后收取细胞进行以下检测)。②在脂质体介导下,以survivin的反义寡核苷酸作用于肺癌细胞株NCI-H446和SPC-A1,于72h用反转录聚合酶链反应检测survivin mRNA表达。凋亡指数=(静止期/DNA合成前期)占整个细胞周期的百分比;增殖指数=(DNA复制期+合成后期/有丝分裂期)占整个细胞周期的百分比。②survivin反义寡核苷酸单独或联合bcl-2反义寡核苷酸作用NCI-H446后,用四甲基偶氮唑盐法检测细胞生长抑制率并计算两药相互作用指数,锥虫蓝拒染实验检测细胞死亡率。③计量资料差异性比较采用方差分析和q检验。结果①两种肺癌细胞株皆表达survivin基因。survivin反义寡核苷酸作用细胞株后,出现生长抑制和细胞凋亡,细胞survivin m RNA明显下调,反义寡核苷酸500nm ol/L作用72h后NCI-H446和SPC-A1细胞survivin m RNA抑制率分别达62.72%和67.43%。②四甲基偶氮唑盐法检测结果显示,survivin反义寡核苷酸和bcl-2反义寡核苷酸单独应用对NCI-H446细胞均有生长抑制作用;联合应用survivin反义寡核苷酸和bcl-2反义寡核苷酸的细胞生长抑制率为64.9%,优于单独应用(单用bcl-2反义寡核苷酸为34.2%)(P<0.01),两药相互作用指数为0.708。锥虫蓝拒染实验显示,survivin反义寡核苷酸500nm ol/L+bcl-2反义寡核苷酸5μm ol/L组细胞死亡率为62.1%,高于两药单用时的31.4%和41.4%。流式细胞仪检测凋亡显
- 夏雪梅陈余清蔡映云李殿明胡俊锋黄礼年
- 关键词：寡核苷酸类反义基因
- 纤支镜活检和痰液标本FHIT基因检测对肺癌诊断的意义
- 2008年
- 目的:明确检测肺癌手术标本、纤支镜活检和痰液标本FHIT基因转录本缺失在肺癌诊断中的意义。方法:应用RT-PCR法检测41例肺癌手术标本癌组织和9例良性肺疾病肺组织手术标本以及80例肺癌和30例良性肺疾病纤支镜活检标本及全部的160例患者痰液标本FHIT基因转录本缺失,并与病理组织学、刷检细胞学和痰液细胞学检查结果比较。结果:肺癌组织FHIT基因转录本缺失的阳性率[70.7%(29/41)]高于癌旁正常组织(5/41)和良性肺疾病组织(0/9)(P<0.005);纤支镜活检标本FHIT基因转录本缺失阳性率[70.0%(56/80)]高于良性肺疾病(2/30)(P<0.005);痰液FHIT基因转录本缺失联合痰液细胞学检查诊断肺癌的敏感性(73.6%)高于单独痰液细胞学(47.1%)或痰液中FHIT基因转录本缺失(52.1%)(均P<0.005)。与单独痰液细胞学相比,两者联合检测使诊断肺癌的敏感性由原来的47.1%提高至73.6%(P<0.005),阴性预测值由原来的37.9%提高至54.9%(P>0.05),特异性不变。结论:在肺癌组织中检测FHIT基因转录本缺失可能成为肺癌诊断的分子标志物之一。痰液中FHIT基因转录本缺失检测为肺癌无创诊断提供了一个新的辅助指标。
- 李殿明夏雪梅刘超陈余清蔡映云
- 关键词：逆转录聚合酶链反应FHIT纤支镜活检痰标本
- survivin基因在肺癌诊断和靶向治疗中的研究被引量：7
- 2005年
- survivin基因属于凋亡抑制蛋白(IAP)基因家族新成员。研究表明,survivin基因主要在胚胎发育组织表达,在终末分化的成人组织中不表达,而在肺癌等大多数肿瘤组织高表达。survivin基因过表达具有癌基因的潜能,参与肿瘤的发生发展,且表达与肿瘤的预后和治疗的效果密切相关,可能是一个有潜在价值的肺癌诊断指标和治疗靶点。
- 陈余清夏雪梅蔡映云
- 关键词：SURVIVIN肺癌细胞凋亡靶向治疗
