国家自然科学基金(31270218)
- 作品数：9 被引量：12H指数：3
- 相关作者：吴移谋贺庆芝胡艳群陈丽丽伍海英更多>>
- 相关机构：南华大学中山市人民医院广州市第八人民医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金中山市科技计划项目湖南省科技厅项目更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- CPSIT_0942在鹦鹉热嗜衣原体感染细胞中的定位和特性研究被引量：3
- 2015年
- 目的确定假定蛋白CPSIT_0942在鹦鹉热嗜衣原体(Cps)感染细胞中的定位及特征。方法采用聚合酶链反应(PCR)方法扩增Cps cpsit_0942基因,克隆入p GEX-6p-1原核表达载体,转化至大肠杆菌E.coli BL21,IPTG诱导表达融合蛋白GST-CPSIT_0942,纯化后免疫小鼠制备抗体,间接免疫荧光(indirect immunoinfluscent assay,IFA)检测CPSIT_0942蛋白在细胞内的定位,ELISA检测其在体外诱导THP-1细胞表达炎症因子IL-1β、IL-6和TNF-α的情况。结果 CPSIT_0942蛋白能得到可溶性表达蛋白,可诱导机体产生抗体,IFA主要定位于Cps包涵体,该蛋白体外能诱导THP-1细胞产生炎症因子,在4μg/ml的浓度时,GST-CPSIT_0942诱导产生的IL-1β、IL-6和TNF-α达到最大值,且当以4μg/ml蛋白刺激细胞12 h时,IL-1β、IL-6和TNF-α达到高峰。结论 CPSIT_0942主要定位于包涵体上,能诱导THP-1细胞产生炎症因子,为阐明衣原体致病机制提供了重要的实验依据。
- 伍海英刘卓然吴移谋
- 关键词：包涵体蛋白
- 衣原体染色质相关效应蛋白的研究进展
- 2016年
- 衣原体是一类具有独特双相发育周期的胞内病原菌。在衣原体完整的生长发育周期中,其编码真核细胞组蛋白同源性蛋白和SET结构域蛋白,这些效应蛋白靶向作用于自身和宿主细胞染色质,对衣原体分化及抑制宿主免疫应答具有调控作用。现就衣原体染色质相关效应蛋白的研究进展作一综述。
- 文雅婷吴移谋
- 关键词：衣原体染色质
- 衣原体疫苗的研究进展
- 2016年
- 衣原体是一类严格真核细胞内寄生、具有独特发育周期的原核细胞型微生物。其分布于世界各地,感染宿主广泛,引起人和动物多种疾病,临床表现复杂,需要寻找一种有效疫苗来加强免疫保护以预防衣原体感染。以亚单位疫苗及相关新策略为重点,就衣原体疫苗的研究状况作一简要介绍。
- 梁明星陈超群吴移谋
- 关键词：衣原体减毒活疫苗亚单位疫苗DNA疫苗
- 基因芯片在衣原体研究中的应用被引量：1
- 2014年
- 基因芯片又称为DNA微阵列,是指将大量核酸片段以预先设计的方式固定在载体上组成密集分子阵列,与荧光素或其他方式标记的样品进行杂交,通过检测杂交信号的强弱来判断样品中有无靶分子以及对靶分子进行定量,是一种研究生物大分子功能的新技术。在衣原体研究方面,基因芯片主要应用于衣原体的检测与分型、感染机制的研究、特定基因作用分析、毒力及耐药基因的筛选等。
- 米静吴移谋
- 关键词：衣原体基因芯片基因表达
- CPSIT_p7重组表达产物免疫原性检测及其在鹦鹉热嗜衣原体持续性感染中表达的研究被引量：1
- 2014年
- 目的：构建鹦鹉热嗜衣原体（ Chlamydophila psittaci，Cps） CPSIT_p7原核表达载体，表达并纯化CPSIT_p7，检测其免疫原性，观察其在持续性感染过程中的mRNA和蛋白动态表达情况。方法原核表达和纯化His-CPSIT_p7融合蛋白，免疫BALB/c小鼠制备多克隆抗体，ELISA分析His-CPSIT_p7蛋白的免疫原性。采用青霉素与Cps共同处理细胞来制备持续性感染模型， RT-PCR和Western blot检测CPSIT_p7在其持续性感染过程中的表达情况。结果成功构建了pET30a-CPSIT_p7原核表达载体，并表达和纯化较稳定的重组蛋白；该蛋白免疫小鼠40 d后，ELISA 检测血清特异性抗体效价为1∶1000000；RT-PCR和Western blot 结果显示在Cps急性感染与持续性感染过程中CPSIT_p7 mRNA和蛋白表达水平均呈时间依赖性增加，感染后mRNA在36 h表达量达到高峰，之后急性感染呈时间依赖性下降，而持续性感染CPSIT_p7 mRNA高表达水平至少持续到60 h。结论成功克隆表达了His-CPSIT_p7，该蛋白具有较好的免疫原性；CPSIT_p7基因和蛋白在Cps持续性感染中呈高表达。
- 贺庆芝曾怀才黎知青王川胡艳群陈芝喜吴移谋
- 关键词：克隆表达免疫原性
- Th17细胞在衣原体感染中的作用研究被引量：2
- 2015年
- 衣原体是一类专性细胞内寄生的原核细胞型微生物,是感染人和动物常见的病原体之一,能够引起人和动物的多种疾病。近年来的研究表明,Th17细胞可能通过多种途径,在衣原体的免疫机制中发挥重要作用。虽然Th17细胞的生物学特征及其在炎症和自身免疫疾病的功能研究很多,但Th17细胞在衣原体感染中的作用机制尚不完全清楚,本文仅就对Th17细胞在衣原体感染中的诱导、发生、发育、分化等机制和免疫调节效应的研究进展予以简要综述。
- 陈彦波吴移谋
- 关键词：TH17衣原体
- IFN-γ抗鹦鹉热衣原体急性感染保护作用研究被引量：3
- 2017年
- 目的探讨IFN-γ对鹦鹉热衣原体(Chlamydia psittaci,Cps)的抗感染作用,为进一步阐明机体抗衣原体免疫机制提供参考数据。方法不同浓度的重组人IFN-γ(5ng/mL、25ng/mL和50ng/mL)作用于感染Cps 6BC的HeLa细胞,48h后计数包涵体数量,并观察包涵体形态的改变。2×10~6 IFUs Cps 6BC滴鼻感染C57BL/6J小鼠,于感染前、后24h腹腔内注射10μg重组鼠IFN-γ,观察小鼠体重、活动状态、生存率等一般指标,分别于感染后5d和10d处死小鼠,取肝、肺组织进行HE染色检测其病理变化;并取感染后5d的肺组织,匀浆,计数其中Cps包涵体数量。结果感染48h后,Cps 6BC在5ng/mL、25ng/mL、50ng/mL重组人IFN-γ处理的HeLa细胞中包涵体数量低于对照组(包涵体数分别为(23.8±5.1)×10~6,(10±3.58)×10~6,(8.0±2.22)×10~6,(43.3±11.05)×10~6,衣原体包涵体形状不规则,体积变小。小鼠实验显示,腹腔注射IFN-γ可明显提高Cps 6BC感染小鼠生存率,并减轻急性临床表现及脏器病变。结论 IFN-γ可发挥早期抗Cps感染的保护作用。
- 唐国芳陈丽丽刘良专王川卢兰芬吴移谋
- 关键词：干扰素-Γ鹦鹉热衣原体急性感染免疫保护
- 衣原体持续性感染的分子机制研究进展被引量：4
- 2013年
- 衣原体是一种专性细胞内寄生菌,既可引起急性感染,也能导致某些慢性疾病,如盆腔炎、关节炎、动脉粥样硬化及哮喘等。衣原体的持续性感染是引起宿主慢性炎症反应并导致严重后遗症的重要原因,但其引起持续性感染的分子机制目前仍不完全清楚。本文综述了衣原体持续性感染形成的可能机制,为进一步了解衣原体的致病机制及其防治方面提供新的研究思路。
- 胡艳群贺庆芝吴移谋
- 关键词：衣原体分子机制
- CPSIT＿0271的定位、表达时相及其诱导THP-1细胞产生促炎症因子被引量：1
- 2013年
- 目的：研究鹦鹉热嗜衣原体（ Chlamydophila psittaci，Cps） CPSIT＿0271蛋白的定位和表达时相，及其重组蛋白对人单核细胞（ THP-1）产生促炎症因子的诱生作用。方法原核表达、纯化GST-CPSIT＿0271重组蛋白，免疫BALB/c小鼠制备多克隆抗体，ELISA分析血清抗体滴度。间接免疫荧光法初步观察内源性CPSIT＿0271的定位，并通过Western blot 分析CPSIT＿0271在Cps感染HeLa细胞8 h、18 h、24 h、36 h和48 h后的表达情况。用不同浓度GST-CPSIT＿0271刺激THP-1细胞，ELISA检测IL-6、IL-1β和TNF-α水平。结果在Cps感染的HeLa细胞中，CPSIT＿0271分布于衣原体包涵体内。 CPSIT＿0271在Cps感染HeLa细胞后36 h开始表达，在48 h时表达量增加。 GST-CPSIT＿0271免疫小鼠，产生较强的免疫应答，小鼠血清特异性抗体效价为1∶16000。当GST-CPSIT＿0271蛋白浓度为2～5μg/ml时，刺激THP-1细胞产生IL-6、IL-1β和TNF-α的水平与CPSIT＿0271呈明显的剂量依赖关系。5μg/ml的GST-CPSIT＿0271蛋白刺激THP-1细胞，TNF-α和IL-1β在24 h时达到高峰，IL-6在48 h时达到高峰。结论 CPSIT＿0271蛋白分布于包涵体内，CPSIT＿0271基因可能为Cps晚期表达基因；GST-CPSIT＿0271具有较好的免疫原性，并能促进THP-1细胞分泌促炎症因子IL-6、TNF-α和IL-1β。
- 黎知青刘良专伍海英彭菁陈丽丽贺庆芝吴移谋
- 关键词：细胞定位促炎症因子
