国家自然科学基金(30970930)
- 作品数：10 被引量：8H指数：2
- 相关作者：杨红卫陆永利彭芳王翔宇孙钿更多>>
- 相关机构：三峡大学葛洲坝中心医院中国葛洲坝集团中心医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金宜昌市科学技术研究与开发项目湖北省教育厅自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 脂多糖对大鼠尾核神经元L型电压门控钙通道电流的影响和外源性2-AG的调制作用被引量：2
- 2018年
- 目的:探讨内源性大麻素2-花生四烯酰甘油(2-AG)对脂多糖(LPS)损伤的大鼠尾核神经元L型电压门控钙通道(L-VGCC)电流的调制作用及其分子机制。方法:原代培养新生大鼠尾核神经元,分为对照组、LPS组、2-AG组、2-AG+LPS组、SR141716A(CB1受体反向激动剂)+2-AG+LPS组和AM630(CB2受体反向激动剂)+2-AG+LPS组,应用全细胞膜片钳记录2-AG对LPS损伤的大鼠尾核神经元L-VGCC电流的影响;采用Hoechst染色法观察2-AG对LPS诱导的尾核神经元损伤的影响,并用试剂盒测定尾核神经元caspase-3的活性。结果:(1)LPS能增强L-VGCC电流密度,且未影响L-VGCC激活及失活的电学特征;(2)2-AG能抑制LPS增强L-VGCC电流密度的作用;(3)LPS增强L-VGCC电流密度并非是通过CB1和CB2受体起作用的;(4)2-AG本身对尾核神经元L-VGCC电流密度、激活及失活等电流特性均不产生影响;(5)LPS诱导的尾核神经元caspase-3活性增强可被2-AG抑制,CB1受体反向激动剂SR141716A可取消2-AG的这种效应;(6)LPS可诱导尾核神经元表现出典型的凋亡特征,2-AG可使LPS诱导的核固缩细胞数目显著减少。结论:内源性大麻素2-AG可通过调节尾核神经元L-VGCC电流起抗炎作用和保护神经元的效应。
- 邹梓良陆永利杨红卫
- 关键词：脂多糖尾核
- 大鼠前额叶皮层神经元的急性分离及应用被引量：1
- 2011年
- 目的建立一种稳定的大鼠前额叶皮层(Prefrontal Cortex,PFC)神经元的急性分离方法,用于中枢神经元离子通道特性的研究。方法低温人工脑脊液灌流后,结合酶消化及机械吹打,急性分离6～40 d鼠龄大鼠的前额叶皮层神经元。采用全细胞膜片钳技术记录电压门控钠电流和配体门控甘氨酸激活电流。结果分离出的神经元形态正常,细胞膜光滑有弹性,保存了主要离子通道的活性。结论该方法适于中枢神经系统神经元离子通道的研究。
- 陆永利孙钿周敏杨红卫
- 关键词：前额叶皮层神经元急性分离膜片钳离子通道
- 新生大鼠尾核神经元的体外原代培养及神经元鉴定被引量：2
- 2012年
- 目的建立一种大鼠尾核神经元的原代培养方法,并对其进行形态学观察和免疫组织化学鉴定。方法自新生24 h内的乳鼠大脑中钝性取出尾核,胰酶消化后采用含有B27的Neurobasal A培养液进行体外原代培养。采用神经元特异性烯醇化酶(NSE)免疫组织化学法对神经元进行鉴定,应用酪氨酸羟化酶(TH)免疫组织化学法对多巴胺(DA)能神经元进行鉴定。结果①从新生鼠分离的尾核神经元在本实验条件下生长良好。原代培养7～11 d的尾核神经细胞在形态上趋向成熟。②NSE免疫组织化学染色显示所培养细胞90%以上为神经元细胞。③TH免疫组织化学染色结果表明培养的神经细胞多数呈多巴胺免疫反应阳性,为多巴胺能神经细胞。结论新生鼠的尾核神经元可进行体外原代培养,其中存在大量的多巴胺能神经元。它为研究神经变性疾病的发病及干预机制提供了体外细胞模型。
- 彭芳陆永利杨红卫
- 关键词：尾核神经元原代培养多巴胺能神经元
- 尾核神经元的原代培养及离子通道特性的研究被引量：1
- 2012年
- 目的建立一种稳定的大鼠尾核神经元的分离和体外培养方法,用于中枢神经元离子通道特性的研究。方法自新生24 h内的Wistar乳鼠大脑中分离出尾核,结合酶消化及机械吹打分离尾核神经元,进行体外原代神经元培养。采用全细胞膜片钳技术记录电压门控钠通道电流和电压门控钾通道电流。结果分离出的神经元形态正常,细胞膜光滑有弹性,保存了主要离子通道的活性。结论本方法适用于中枢神经系统神经元离子通道的研究。
- 彭芳陆永利杨红卫
- 关键词：尾核神经元原代培养膜片钳离子通道
- 环氧合酶-2介导促炎因子脂多糖诱导的脊髓长时程增强的变化
- 2012年
- 目的探讨环氧合酶-2(COX-2)和促炎因子脂多糖(LPS)对脊髓长时程增强(LTP)的作用。方法采用细胞外记录技术,在脊髓腰膨大部记录背角浅层神经元C-纤维诱发电位,蛋白质印迹检测LPS处理后不同时间点COX-2蛋白的表达。结果腹腔注射LPS后4 h脊髓LTP显著增强,COX-2蛋白的表达显著增高;LPS注射后12、24 h对脊髓LTP无明显作用,COX-2的表达无明显增强;COX-2的选择性抑制剂NS398可翻转LPS注射4 h后对脊髓背角LTP的增强效应,NS398可显著抑制LPS 4 h后对脊髓COX-2表达的增强。结论 COX-2的激活参与LPS诱导的脊髓LTP的变化。
- 杨红卫王翔宇
- 关键词：环氧合酶-2脂多糖类长时程增强脊髓
- 姜黄素对脂多糖诱导的尾核神经元损害的保护作用
- 2013年
- 目的探讨姜黄素(Curcumin,Cur)与环氧合酶-2(cyclooxgense-2,COX-2)对脂多糖(lipopolysaccride,LPS)诱导的尾核神经元损害的保护作用。方法以LPS损伤原代培养的尾核神经元为损伤的模型,在原代培养的尾核神经元给予LPS、姜黄素或COX-2的选择性抑制剂NS398联合应用LPS后,采用免疫印迹检测COX-2和NF-κB蛋白的表达及Hochest染色观察姜黄素及COX-2对LPS诱导的尾核神经元细胞凋亡的效应。结果①Hochest染色检测细胞核形态,LPS诱导尾核神经元表现出典型的凋亡特征,姜黄素或COX-2的选择性抑制剂NS398均可拮抗LPS诱导的尾核神经元损害的效应。②LPS可显著增强尾核神经元COX-2的表达水平,姜黄素或NS398均可抑制LPS诱导的尾核神经元COX-2的增强效应。③LPS可显著增强尾核神经元磷酸化的NF-κB蛋白的表达水平,该增强效应均可为姜黄素或NS398所拮抗。结论姜黄素对LPS诱导的尾核神经元损害的拮抗作用可能是通过COX-2介导的。
- 柯元宋弯弯董满满彭芳杨红卫
- 关键词：姜黄素环氧合酶-2脂多糖尾核
- 环氧合酶2介导姜黄素对慢性脂多糖诱导的脊髓突触可塑性损害的拮抗作用被引量：2
- 2012年
- 目的探讨环氧合酶2(COX-2)与姜黄素(Cur)对慢性脂多糖(LPS)诱导的脊髓背角C-纤维诱发电位长时程增强(LTP)的作用。方法分别给予大鼠腹腔注射LPS(3 mg/kg)、Cu(r300 mg/kg)、Cu(r300 mg/kg)或COX-2的选择性抑制剂NS398(10mg/kg)联合LPS(3 mg/kg)7 d后,在脊髓腰膨大部记录背角浅层神经元C-纤维诱发电位,观察COX-2及Cur对脊髓LTP的效应,采用蛋白质印迹法检测不同条件下COX-2蛋白的表达。结果慢性给予LPS可显著降低脊髓LTP,此效应可被Cur所抑制。Cur本身并不影响脊髓LTP。LPS降低脊髓LTP的效应亦可被COX-2的选择性抑制剂NS398所翻转。Cur及NS398均可显著抑制LPS诱导的脊髓COX-2蛋白表达的增强。结论 Cur对LPS诱导的脊髓LTP损害的保护作用可能是通过COX-2介导的。
- 杨红卫王翔宇
- 关键词：环氧合酶2姜黄素脂多糖长时程增强
- 2-花生四烯酸甘油对海人酸诱导损伤的大鼠尾状核神经元电压门控钠电流的调制作用
- 2021年
- 目的探讨内源性大麻素2-花生四烯酸甘油(2-AG)对海人酸(KA)损伤的大鼠尾状核神经元电压门控钠通道电流(INa)的调制作用及其分子机制。方法原代培养大鼠尾状核神经元,分为空白对照组、KA组、2-AG+KA组、RIM(CB1受体拮抗剂)+2-AG+KA组。培养7 d后,各组细胞于培养基中处理12 h;其中,2-AG+KA组和RIM+2-AG+KA组在添加2-AG、RIM 30 min后添加KA。应用全细胞膜片钳技术检测大鼠尾状核神经元电压门控钠通道电流:包括各组电流密度的变化、通道的电流-电压特性、通道的激活动力学特性和失活动力学特性。结果在培养的大鼠尾状核神经元中,与对照组相比,KA显著增加神经元电压门控钠通道电流密度(P=0.009);并使VGSCs的激活电压曲线向超极化方向偏移,半激活电压绝对值明显增大(P=0.008)。与KA组相比,直接给与2-AG提高2-AG水平可阻止KA诱导的钠电流密度增加(P=0.009)和钠电流激活曲线超极化方向移动(P=0.009),且2-AG的这种作用是通过CB1受体依赖性途径介导的。2-AG本身对尾状核神经元电压门控钠通道电流密度、激活及失活等电流特性均不产生效应。结论2-AG可通过CB1受体途径调控尾状核神经元VGSCs电流朋而起到神经保护作用。
- 陆永利朱时钰邹梓良何治何治
- 关键词：海人酸电压门控钠通道尾状核
- ErkⅠ/Ⅱ介导姜黄素对慢性脂多糖诱导的脊髓突触可塑性损害的拮抗作用被引量：1
- 2013年
- 目的探讨ErkⅠ/Ⅱ与姜黄素对慢性脂多糖(LPS)诱导的脊髓背角C-纤维诱发电位长时程增强(LTP)的作用。方法在大鼠分别腹腔注射LPS(3 mg/kg)、姜黄素(300 mg/kg)、姜黄素(300 mg/kg)联合LPS(3 mg/kg)7 d后在脊髓腰膨大部记录背角浅层神经元C-纤维诱发电位,观察姜黄素对脊髓LTP的效应,并应用蛋白质印迹法检测不同条件下ErkⅠ/Ⅱ和NF-κB蛋白的表达。结果①慢性给予LPS可显著降低脊髓LTP,此效应可被姜黄素所抑制。②LPS可显著上调脊髓磷酸化的ErkⅠ/Ⅱ蛋白表达水平,该增强效应为姜黄素所显著抑制。③姜黄素可显著拮抗LPS上调脊髓磷酸化NF-κB的蛋白表达水平。结论姜黄素对LPS诱导的脊髓LTP损害的拮抗作用可能是通过ErkⅠ/Ⅱ信号途径介导的。
- 杨红卫王翔宇
- 关键词：姜黄素脂多糖长时程增强
- Src激酶和NR2B介导D1/D5受体激动剂诱导的脊髓LTP被引量：1
- 2011年
- 目的探讨Src激酶在D1/D5受体激动剂诱导的脊髓长时程增强(LTP)中的作用。方法细胞外记录技术在脊髓腰膨大部记录背角浅层神经元C-纤维诱发电位。结果①D1/D5受体激动剂SKF38393(250μmol/L)诱导的脊髓LTP的效应可被D1/D5受体拮抗剂SCH23390(20μmol/L)所阻断;②Src激酶的选择性抑制剂Genistein(200μmol/L)对脊髓背角C-纤维诱发电位的基础电位没有影响,但可阻断SKF诱导的脊髓背角LTP;③N-甲基-D-天冬氨酸受体(NMDAR)亚基2B特异性拮抗剂Ro25-6981(50μmol/L)阻断SKF诱导的脊髓背角LTP。结论脊髓背角Src激酶和NMDAR2B受体参与D1/D5受体诱导的脊髓LTP。
- 杨红卫
- 关键词：脊髓
