国家自然科学基金(2011BAI03B01)
- 作品数：1 被引量：3H指数：1
- 相关作者：孙一刘淑莹陈宁越皓更多>>
- 相关机构：中国科学院大学长春中医药大学中国科学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：理学更多>>
- 快速高分离度液相色谱-质谱联用方法筛选Tau蛋白激酶2抑制剂被引量：3
- 2013年
- 建立了测定Tau蛋白激酶2(Tau protein kinase 2,TPK2)催化反应产物磷酸化十肽(PKpTPKKAKKL)的快速高分离度液相色谱-质谱方法(RRLC/MS)用于筛选TPK2抑制剂.反应溶液总体积为50μL,将终浓度为20 nmol/L的TPK2与终浓度为5μmol/L的底物十肽(PKTPKKAKKL)于30℃反应30 min,用等体积乙腈终止反应并加入终浓度为1μmol/L的磷酸化十肽(PKpTPKKAKKV)作为内标,采用Agilent SB-C18色谱柱,以乙腈-水为流动相梯度洗脱分离后,用RRLC/MS进行定性及定量分析.该方法可通过精确定量一定时间内的酶促反应产物来反映酶活性被抑制的程度,作为TPK2抑制剂的筛选方法,本方法具有简单、灵敏、快速的优点,能够避免光谱法筛选可能产生的假阳性结果,可用于TPK2的先导化合物的高通量筛选.
- 陈宁孙一越皓刘淑莹
- 关键词：阿尔兹海默病
