国家自然科学基金(81273652)
- 作品数：24 被引量：91H指数：6
- 相关作者：庞晓斌谢欣梅王保全杜冠华平娟更多>>
- 相关机构：河南大学中国医学科学院北京协和医学院青岛市市立医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金河南省教育厅自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学化学工程更多>>
- 脉络宁对脑缺血再灌注大鼠血脑屏障通透性的影响研究被引量：8
- 2014年
- 目的研究脉络宁(玄参、牛膝、石斛、金银花等)对脑缺血再灌注大鼠血脑屏障通透性的影响,初步探讨其可能的机制。方法 72只成年健康雄性SD大鼠随机分为假手术组,模型组,依达拉奉对照组,脉络宁高、中和低剂量组。脑缺血再灌注大鼠模型采用线栓法阻断大脑中动脉缺血2 h后再灌注24 h的方式建立。TTC法测定脑梗死体积;伊文思蓝法检测血脑屏障通透性;Western blot法检测脑微血管内皮细胞紧密连接相关蛋白紧密连接蛋白-1和闭合蛋白的表达。结果脉络宁能显著降低缺血再灌注大鼠脑梗死体积,明显降低血脑屏障通透性,可使紧密连接蛋白-1和闭合蛋白的表达增加。结论脉络宁可降低脑缺血再灌注大鼠血脑屏障通透性的机制可能与上调脑微血管内皮细胞间连接蛋白紧密连接蛋白-1和闭合蛋白的表达有关。
- 庞晓斌谢欣梅王保全李晓婷
- 关键词：脉络宁脑缺血再灌注血脑屏障紧密连接蛋白
- 壳聚糖螯合凝胶层析法纯化血液超氧化物歧化酶被引量：2
- 2014年
- 首先利用不同相对分子质量聚丙烯酸钠从动物血液中分离纯化出超氧化物歧化酶(SOD),探索不同相对分子质量聚丙烯酸钠对SOD提取酶活性的影响。鉴于离子交换层析和凝胶过滤层析纯化时所用材料较昂贵,探索出一条适合工业化大规模生产的纯化方法。利用壳聚糖、亚氨基二乙酸(IDA)和环氧氯丙烷等材料合成一种新填料,根据亲和层析原理去除杂蛋白质,获得电泳纯级超氧化物歧化酶,使酶活性进一步提高,并和离子交换层析和凝胶过滤层析方法相对照,以期自制填料能代替Sephedex,DEAE-sepherose-fast flow等传统昂贵填料,以适合工业化生产。结果显示,低相对分子质量聚丙烯酸钠在血液SOD提纯工艺中更为适用,超滤后的粗酶液经离子交换层析、凝胶过滤层析和壳聚糖亲和层析纯化后经SDS-PAGE聚丙烯酰胺凝胶电泳后呈明显的单一条带,单亚基分子量16 kD,比活力达5 585 U/mg和6 148 U/mg,4 739 U/mg;产品得率分别为18.1%和13.7%,15.5%;纯化后活性回收率分别为61.2%,50.8%,42.6%。表明壳聚糖亲和层析方法在新工艺后续纯化工艺中有望代替Sephedex DEAEsepherose-fast flow为基础的传统纯化方法,适合工业化大规模生产。
- 王保全平娟张永州黄继海李昭华董先智庞晓斌李梅基
- 关键词：相对分子质量聚丙烯酸钠血液超氧化物歧化酶
- Aptamer-siRNA核酸复合物对人CML K562细胞增殖与凋亡诱导作用研究
- 2015年
- 目的:探讨aptamer-siRNA核酸复合物对人慢性粒细胞K562细胞系的凋亡诱导作用。方法:以SELEX技术筛选人融合蛋白BCR-ABL核酸适体,合成aptmer-siRNA核酸复合物,在荧光显微镜、激光共聚焦显微镜、JEM-4000EX透射电镜下观察K562细胞形态结构改变,MTT法检测aptamer-siRNA核酸复合物对K562细胞的生长抑制作用,琼脂糖凝胶电泳分析细胞凋亡DNA断裂情况。结果:在荧光显微镜和电子显微镜下,经200μmol/L核酸复合物作用的K562细胞形态和结构发生明显改变;Aptamer-siRNA核酸复合物对K562细胞生长具有明显的抑制作用,与对照组相比,差异具有显著的统计学意义(P<0.05)。MTT实验结果显示,aptamer-siRNA核酸复合物对K562细胞的IC50值为150μmol/L,统计学分析证明,差异有显著的统计学意义(P<0.05)。经琼脂糖凝胶电泳显示,在aptamer-siRNA核酸复合物作用K562细胞中可见明显DNA凋亡梯带。结论:aptamer-siRNA核酸复合物可显著诱导人K562细胞的凋亡,为治疗人慢性髓系白血病提供参考。
- 平娟申智慧王保全赵娜李锐李勉庞晓斌陈传波
- 关键词：K562细胞细胞凋亡
- 红景天苷对人肝癌HepG2细胞增殖及凋亡的影响被引量：16
- 2014年
- 目的观察红景天苷(salidroside)对人肝癌HepG2细胞增殖和凋亡的影响,探讨其抗肿瘤的可能机制。方法以体外培养的人肝癌HepG2细胞作为研究对象,倒置显微镜观察红景天苷对肝癌细胞形态的影响;采用MTS法检测红景天苷对细胞生长的抑制作用;采用流式细胞仪检测细胞凋亡率;Western blot法检测Bcl-2、Bax、caspase-3、caspase-8的表达。结果红景天苷能显著抑制肝癌细胞HepG2增殖并促进其凋亡,下调细胞Bcl-2表达,上调Bax、caspase-3及caspase-8的蛋白表达量。结论红景天苷在体外对人肝癌HepG2细胞具有显著的抑制增殖和促进凋亡作用,其机制可能与其调节凋亡基因Bcl-2、Bax、caspase-3与caspase-8的蛋白表达有关。
- 庞晓斌谢欣梅赵清辉
- 关键词：红景天苷肝癌HEPG2细胞增殖凋亡
- 黄芪甲苷对PC12细胞缺糖缺氧损伤的保护作用被引量：2
- 2015年
- 目的:探究黄芪甲苷对PC12细胞缺糖缺氧损伤的保护作用并探讨其可能的作用机制。方法:体外培养PC12细胞,应用无糖Earle’s稀释Na2S2O4建立缺糖缺氧模型,尼莫地平做阳性对照,使用不同浓度的黄芪甲苷进行预保护。显微镜下观察细胞形态差异,以MTT法测定细胞活力,酶标法测定上清液中乳酸脱氢酶(lactate dehydrogenase,LDH)含量,Western Blot法测定B淋巴细胞瘤-2(B-cell lymphoma-2,Bcl-2)与Bcl-2相关X蛋白(Bcl-2 associated X protein,Bax)蛋白表达量。结果:黄芪甲苷能够提高PC12细胞在缺糖缺氧环境下的细胞存活率,降低LDH漏出量,能够增加Bcl-2蛋白的表达,降低Bax蛋白的表达,降低Bax/Bcl-2比值。结论:黄芪甲苷对PC12细胞的缺糖缺氧损伤具有一定的保护作用,其作用机制可能与其抑制细胞凋亡有关。
- 杨文亮宋玉赵灿灿谢欣梅庞晓斌杜冠华
- 关键词：黄芪甲苷PC12细胞缺糖缺氧损伤细胞凋亡
- 人慢性粒细胞白血病融合蛋白BCR-ABL适配子筛选及结构分析被引量：3
- 2015年
- 目的:筛选、鉴定人慢性粒细胞白血病融合蛋白BCR-ABL适配子。方法:利用SELEX(Systematic evolution of ligands by exponential)技术,以高纯度融合蛋白BCR-ABL为靶分子,从体外化学合成的长度为90 bp的随机单链DNA文库中来筛选与融合蛋白BCR-ABL特异性结合的寡核苷酸适配子,并进行解离常数(Kd)值测定和适配子序列测定,再分别用Clustal W软件包和DNA Folding Sever分析适配子一级结构及二级结构,以酶联仪测定OD450值,根据OD值高低判定适配子亲和力大小。结果:经过13轮筛选,随机ss DNA文库与融合蛋白的亲和率从0.3%上升到47.1%,所有的一级结构没有共同的同源序列,二级结构分析结果显示,茎和环等二级结构可能是适配子和融合蛋白BCR-ABL结合的基础,其中,寡核苷酸适配子A2与BCR-ABL亲和力最高,kd值达72 nmol/L。结论:利用随机寡核苷酸文库筛选技术成功获得抗融合蛋白适配子,为临床上治疗和预防慢性粒细胞白血病提供一定的参考。
- 平娟赵娜申智慧阴明星张倩张伟马雪姗陈传波
- 关键词：SELEX技术慢性粒细胞白血病适配子
- 缺血性中风基于神经血管单元的研究进展
- 2015年
- 本文概述了缺血性中风的病理机制以及神经血管单元(neurovascular unit,NVU)的概念和缺血性损伤对神经血管单元的影响,强调了针对"神经血管单元"的保护对缺血性中风防治的意义。
- 庞晓斌余瑞双谢欣梅杜冠华
- 关键词：中风缺血损伤神经血管单元
- 消栓通络有效成分组对大鼠脑缺血损伤的保护作用及其机制被引量：1
- 2015年
- 目的研究消栓通络有效成分组(XECG)对大鼠脑缺血再灌注(I/R)损伤的保护作用及其机制。方法SD大鼠随机分为6组:假手术组,模型组,尼莫地平对照组(4 mg·kg-1),XECG高、中、低剂量组(200、100、50mg·kg-1)。采用线栓法阻断大脑中动脉(MCAO)建立大鼠脑缺血/再灌注(I/R)模型。缺血2h,再灌注24h后,HE染色观察大鼠缺血侧脑组织的病理变化;Western blot法检测缺血侧脑组织肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)、白细胞介素-1β(Interleukin 1β,IL-1β)的表达。结果 XECG能明显改善缺血再灌注大鼠脑组织的病理变化,降低缺血侧脑组织TNF-α、IL-1β的表达。结论 XECG对脑缺血再灌注大鼠具有明显的保护作用,其机制可能与降低TNF-α、IL-1β的表达,抑制炎症级联反应有关。
- 谢欣梅王琳赵艳陈若芸庞晓斌杜冠华
- 关键词：炎症反应
- 消栓通络有效成分组对脑缺血再灌注大鼠的神经保护作用被引量：3
- 2015年
- 目的探讨消栓通络有效成分组(XECG)对脑缺血/再灌注大鼠的神经保护作用。方法采用线栓法阻断大脑中动脉(MCAO)建立大鼠脑缺血/再灌注(I/R)模型。缺血2h,再灌注24h时后,通过腹腔给予XECG(200、100、50mg·kg-1),以脑梗死体积、脑含水量和伊文思蓝(Evans Blue,EB)法检测血脑屏障通透性等指标评价XECG对脑缺血的神经保护作用。结果 XECG能显著降低缺血再灌注大鼠脑梗塞体积和血脑屏障通透性。结论 XECG对脑缺血损伤有直接的神经保护作用。
- 庞晓斌王琳赵艳陈若芸谢欣梅杜冠华
- 关键词：脑缺血梗死体积血脑屏障
- 消栓通络有效成分组对SH-SY5Y细胞氧糖剥夺损伤的影响
- 2015年
- 目的研究消栓通络有效成分组(XECG)对SH-SY5Y细胞氧糖剥夺(OGD)损伤的保护作用,并探讨其可能的作用机制。方法体外培养SH-SY5Y细胞,将细胞随机分为正常组、氧糖剥夺模型组和XECG组(1、3、10mg·L-1),建立体外OGD/R细胞模型。倒置显微镜观察细胞形态;MTT法测定细胞存活率;酶标法试剂盒测定乳酸脱氢酶(LDH)漏出量;Western Blot检测凋亡相关蛋白Bcl-2、Bax蛋白表达的变化。结果与模型组相比,XECG能明显改善OGD/R引起的SH-SY5Y细胞的损伤,提高细胞存活率(P<0.05),减少LDH的释放量(P<0.05),能提高缺糖缺氧神经元Bcl-2/Bax比值。结论 XECG对OGD/R引起的SH-SY5Y细胞损伤有保护作用,其机制可能与影响凋亡相关基因Bcl-2、Bax的表达有关。
- 谢欣梅赵清辉赵艳陈若芸庞晓斌杜冠华
- 关键词：SH-SY5Y细胞凋亡
