国家自然科学基金(31272541)
- 作品数：8 被引量：25H指数：3
- 相关作者：王春凤杨桂连叶丽萍石春卫姜延龙更多>>
- 相关机构：吉林农业大学吉林工程技术师范学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家高技术研究发展计划吉林省科技发展计划基金更多>>
- 相关领域：农业科学生物学医药卫生更多>>
- 表达A型产气荚膜梭菌FBA蛋白的延迟裂解型沙门菌载体的构建被引量：2
- 2018年
- 利用PCR技术扩增FBA基因序列，并将其克隆到表达栽体pET-30a（＋）中，获得pET-30a—FBA重组质粒。将重组质粒转化到BL21感受态细胞中，经IPTG诱导表达His—FBA蛋白，通过His—tagNi柱亲和层析纯化后，免疫新西兰大白兔制备FBA特异性多克隆抗体。再利用PCR技术将FBA基因与表达载体pYA3681连接，构建了表达载体pYA5129，电转至延迟裂解性沙门菌x11802后以制备的FBA多抗为一抗进行免疫印迹试验，验证了其免疫原性；同时比较了不同浓度阿拉伯糖对重组沙门菌生长性能的影响，优化了阿拉伯糖最佳添加浓度，为后续研究其作为肉鸡坏死性肠炎疫苗的可行性奠定基础。
- 姜延龙王占楠曾庆丰王棋姚心茹王成宇胡译文杨桂连王春凤
- 关键词：A型产气荚膜梭菌原核表达多克隆抗体
- 青蒿素在原虫病治疗中的作用及机理研究进展被引量：2
- 2017年
- 原虫是一种单细胞真核生物,整个虫体由一个细胞构成,可以寄生在机体的腔道、体液、组织或细胞内。原虫病严重危害人类健康和养殖业发展。目前,广泛使用的化学药物治疗会产生耐药性、药物残留和毒副作用等弊端。青蒿素作为一种从植物黄花蒿中提取的天然物质,对多种原虫具有治疗作用,与化学药物相比更加安全、廉价甚至更高效。本文对青蒿素在原虫病治疗中的作用和机理进行综述,旨在为其应用于原虫病治疗提供理论依据。
- 杨桂连石昊林王春凤
- 关键词：青蒿素利什曼原虫艾美尔球虫弓形虫疟原虫
- 基因工程乳酸菌作为活载体表达外源蛋白及疾病防治研究进展被引量：2
- 2019年
- 乳酸菌是一类可以发酵碳水化合物产生乳酸的兼性厌氧菌总称,包括乳球菌、乳杆菌、链球菌、片球菌和双歧杆菌等,美国食品和药品监督管理局(FDA)将许多乳酸菌定义为“食品级”微生物,极少数如化脓性链球菌,肺炎链球菌是致病菌。乳酸菌可以调节肠道菌群组成从而维持肠道稳态,提高免疫力;还可竞争型地占位,定殖在肠道表面诱导黏膜液以及肠道上皮细胞抗菌肽(AMP)的产生[1].
- 刘琼陈宏亮姜延龙王春凤
- 关键词：基因工程肠道上皮细胞活载体肺炎链球菌疾病
- 猪RAG2蛋白的基因克隆及原核表达
- RAG-1和RAG-2基因是未成熟B细胞和T细胞分化所必须的,且只在初级淋巴器官中表达,而不在成熟细胞中表达,这个特征使RAG-1或RAG-2成为研究这些器官发育的一个实用的指标。然而,目前市场上人和兔的RAG蛋白的特异...
- 晋玉北杨文涛黄科谚刘晶陈宏亮刘琼姜延龙杨桂连王春凤
- 关键词：克隆原核表达
- H9N2亚型禽流感病毒HA-DCpep融合基因重组乳杆菌的构建及免疫原性分析被引量：3
- 2014年
- 为了构建HA-DCpep融合基因重组乳杆菌并检测其表达产物的免疫原性,以pSIP409-HA质粒为模板,采用PCR方法将HA基因和DCpep基因融合。将目的基因克隆至pGEM-T载体中,进行测序。再将阳性基因亚克隆至大肠杆菌-乳杆菌穿梭表达载体pSIP409中,电转化入植物乳杆菌NC8中,经SppIP诱导后对表达产物进行Western-blot分析。结果显示,重组菌NC8-pSIP409-HA-DCpep的裂解物中出现大小约为64ku的反应条带,大小与预期结果相符,表明重组融合蛋白具有良好的反应原性。重组菌NC8-pSIP409-HA-DCpep口服免疫SPF雏鸡后,在免疫后第14天可被检出特异性HI抗体,28d后达到高峰。结果表明,应用重组菌NC8-pSIP409-HA-DCpep免疫雏鸡能刺激机体产生特异性体液免疫应答反应,这为研制预防禽流感的重组乳杆菌口服制剂奠定了基础。
- 石少华杨文涛叶丽萍黄海斌蔡若鹏李雨宸闫晓月王春凤杨桂连
- 关键词：禽流感病毒免疫原性
- 益生菌在肝脏疾病方面的应用
- 各种动物和人类肠道中存在着大量微生物,其总量远远超过宿主的体细胞和生殖细胞数量,这些定殖微生物被称为微生物菌群,另外,在同一宿主内,宿主的年龄、遗传背景、日粮和健康状况等多种因素会影响微生物菌群的组成。人胃肠部位定植了5...
- 曾庆丰杨文涛杨桂连王春凤
- 文献传递
- 斯氏艾美球虫可溶性蛋白对小鼠结肠癌皮下肿瘤模型的影响
- 2017年
- 目的探讨斯氏艾美球虫(Eimeria stiedai)可溶性蛋白(EsSP)对荷瘤小鼠肿瘤生长、生存率和免疫状态的影响。方法建立小鼠皮下结肠癌(CT26)肿瘤模型,确定最小100%致瘤量肿瘤细胞数。取10~8个斯氏艾美球虫孢子化卵囊,采用超声波间断乳化制备EsSP。105只雄性BALB/c小鼠按随机数表法均分为7组(15只/组),每组小鼠于右侧腋窝皮下接种CT26细胞5×10~5个,其中6个实验组(A^F组)小鼠分别腹腔注射100.00、50.00、10.00、1.00、0.10、0.01μg/d EsSP,1次/d×5 d,对照组腹腔注射等量PBS。于接种后第7、11、13、15、17、19、21、23天测量肿瘤直径,计算相对肿瘤体积和相对肿瘤增殖率(T/C)。接种后第25天每组各处死5只小鼠,称量瘤重,计算抑瘤率。采眼球血,分离小鼠外周血淋巴细胞,MTS比色法检测EsSP对荷瘤小鼠淋巴细胞增殖能力的影响,计算刺激指数(SI);流式细胞术检测外周血CD4^+/CD8^+T淋巴细胞比值变化。记录各组荷瘤小鼠死亡时间和死亡数量,共观察80 d。各组间差异性比较采用单因素方差分析。结果最小100%致瘤量肿瘤细胞数为5×10~5个。接种结肠癌细胞后第23天,A、B、C组的肿瘤体积为(435.2±41.1)、(366.3±29.2)、(460.2±28.5)mm^3,较E、F和对照组的(761.2±33.2)、(810.4±38.4)、(865.2±35.3)mm^3生长缓慢(P<0.05);A、B、C组的T/C分别为(39.0±6.7)%、(33.3±8.9)%、(35.0±8.1)%,均<40%。B组小鼠瘤重为(1.109±0.432)g,低于对照组的(1.946±0.289)g(P<0.05),抑瘤率最高,为(43.0±14.6)%。MTS比色法检测结果显示,B、C组小鼠SI分别为1.75±0.15、1.70±0.32,高于对照组的1.38±0.18(P<0.05)。流式细胞术检测结果显示,A、B、C组小鼠外周血中CD4^+/CD8^+T淋巴细胞亚群的比值分别为1.58±0.24、1.74±0.22、1.61±0.16,与对照组的1.34±0.15比较,差异均有统计学意义(P<0.01或P<0.05)。荷瘤小鼠生存率结果显示,至第80天,B、C组各存活5只小鼠,高于对照组的2只(P<0.05)。结论 EsSP能�
- 杨桂连黄海斌杨文涛姜延龙石春卫王春凤
- 关键词：结肠癌肿瘤生长免疫
- 益生菌对肉雏鸡抗E.tenella免疫保护效果的评价
- [目的]鸡球虫病呈全球性分布,在养禽业中普遍存在且危害极大,往往造成巨大的经济损失且严重阻碍养禽业发展.益生菌有望成为防治球虫病的一条新路径.由于益生菌的指代范围极其广泛,所以本研究以乳酸菌为例初步评价了益生菌对肉雏鸡抗...
- 杨军赵权杨桂连
- 关键词：肉雏鸡柔嫩艾美尔球虫乳酸菌免疫水平免疫保护效果
- 猪RAG2蛋白的基因克隆及原核表达
- RAG-1和RAG-2基因是未成熟B细胞和T细胞分化所必须的,且只在初级淋巴器官中表达,而不在成熟细胞中表达,这个特征使RAG-1或RAG-2成为研究这些器官发育的一个实用的指标。然而,目前市场上人和兔的RAG蛋白的特异...
- 晋玉北杨文涛黄科谚刘晶陈宏亮刘琼姜延龙杨桂连王春凤
- 关键词：克隆原核表达
- 文献传递
- 表达结核分枝杆菌ESAT-6-Ag85A基因的侵入型乳酸菌免疫特性研究
- 引言结核病(Tuberculosis,TB)是一种由结核分枝杆菌(Mycobacteria tuberculosis,MTB)引起的人兽共患病。目前用于预防TB的唯一疫苗是卡介苗(BCG),但只是在婴幼儿上发挥作用,在保...
- 刘晶张赞刘洋杨桂连王春风姜延龙
