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河北省医学适用技术跟踪项目(GL2011-36)
河北省医学适用技术跟踪项目(GL2011-36)
- 作品数:2 被引量:5H指数:2
- 相关作者:张琳李亚楠朱志洁黄向华李雅钗更多>>
- 相关机构:河北医科大学第二医院更多>>
- 发文基金:河北省医学适用技术跟踪项目更多>>
- 相关领域:医药卫生更多>>
- 小鼠阴道上皮细胞与猪脱细胞真皮基质-纤维蛋白凝胶构建组织工程阴道的初步研究被引量:3
- 2012年
- 目的:初步探讨利用组织工程学技术构建组织工程阴道的方法及可行性。方法:将小鼠阴道上皮细胞以1×105个/ml的密度接种到纤维蛋白凝胶内并与猪脱细胞真皮基质(PADM)复合构成移植片,体外培养48小时后,将移植片埋植到小鼠脊柱两侧皮下。移植后2周、4周、8周和12周取材,对埋植后不同时间取出的移植片行HE染色和VanGieso(VG)染色,观察和评价移植片组织的生长状况;用上皮广谱角蛋白单克隆抗体AE1/AE3进行免疫组化染色,以证实移植片是否存在上皮组织。结果:光镜下观察,皮下埋植后2周,可见少量阴道上皮细胞,4周形成上皮,仅2~3层,8~12周上皮层数增加(约4~5层)。AE1/AE3免疫组化染色结果与HE染色结果一致。VG染色显示随埋植时间推移,PADM内逐渐有细胞长入,结构逐渐降解。结论:阴道上皮细胞与PADM-纤维蛋白构建的移植物体内移植后有血管长入,形成的上皮组织表型与正常阴道上皮表型相同。
- 张明乐黄向华李雅钗张琳李亚楠朱志洁
- 关键词:阴道重建猪脱细胞真皮基质
- 原位与体内构建小鼠组织工程阴道的实验研究被引量:3
- 2013年
- 目的:比较原位组织构建与体内构建两种方式在小鼠体内进行阴道重建的效果。方法:切除昆明小鼠阴道后采用酶消化法获得阴道上皮细胞。A组(12只)植入猪脱细胞真皮基质(PADM)行原位组织构建;B组(12只)植入自体阴道上皮细胞与纤维蛋白-PADM移植复合物行体内构建。于移植后2周、4周、8周、12周取出重建的阴道组织进行大体观察,并分别进行伊红-美蓝染色(HE)、Van Gieso(VG)染色和广谱角蛋白AE1/AE3免疫组化染色,以动态观察重建阴道组织生长情况及PADM降解情况。重建术后12周用透射电镜观察重建阴道组织超微结构。结果:①A组在移植后2周可见2~3层细胞的上皮形成;移植后4周细胞层数增加,但细胞排列无极向;移植后8周、12周上皮层结构接近正常小鼠阴道上皮层结构。B组移植后2周上皮结构即接近正常小鼠阴道上皮结构;移植后4周、8周、12周上皮层结构基本同移植后2周,但细胞形态更加成熟,极向更为明显。移植后12周A组PADM部分区域结构不完整,B组PADM仍保持基本轮廓。②AE1/AE3免疫组化染色证实了重建阴道的上皮化。③B组透射电镜观察可见上皮细胞之间存在桥粒连接,上皮细胞与基底膜之间有半桥粒连接。上皮层下见成纤维细胞、无髓神经纤维与毛细血管。结论:利用PADM进行原位组织构建与体内构建在实验动物体内均能够完成阴道重建。在技术成熟的条件下,体内构建法比原位组织构建法更适合于进行阴道重建。
- 张明乐黄向华李雅钗张琳李亚楠朱志洁王振海
- 关键词:阴道重建脱细胞真皮基质纤维蛋白凝胶阴道上皮细胞