国家自然科学基金(30200309)
- 作品数：6 被引量：22H指数：3
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- 端粒酶相关因素对培养的视网膜色素上皮细胞增生的影响被引量：3
- 2005年
- 目的探讨端粒酶相关因素对培养的视网膜色素上皮(retinal pigment epitheli-um,RPE)细胞增生的影响。方法用常规培养法培养人RPE细胞后,分别用端粒酶抑制剂二甲基亚砜、热休克蛋白90抑制剂、无血清培养、端粒酶反义寡核苷酸、P16反义寡核苷酸处理,然后提取细胞mRNA,PCR扩增后电泳检测端粒酶mRNA表达。然后用MTT法检测无血清培养组、端粒酶反义寡核苷酸处理组、P16反义寡核苷酸处理组与常规培养组细胞增生状况。结果二甲基亚砜组、热休克蛋白90抑制剂组、无血清培养组、端粒酶反义寡核苷酸处理组,端粒酶mRNA表达受到抑制,凝胶分析系统软件分析结果电泳H值分别为80、116、90、81,而P16反义寡核苷酸处理组端粒酶mRNA表达增强,电泳H值为255。常规培养组H值为162,阴性对照组为0,阳性对照组(胃癌细胞)为255。MTT法显示:无血清培养组,端粒酶反义寡核苷酸处理组细胞活性下降,细胞生长抑制率上升。而P16反义寡核苷酸处理组细胞活性上升,细胞生长抑制率下降。结论端粒酶抑制剂二甲基亚砜、热休克蛋白90抑制剂、无血清培养、端粒酶反义寡核苷酸可抑制RPE细胞端粒酶mRNA表达,从而抑制RPE细胞增生;P16反义寡核苷酸可促进RPE细胞端粒酶mRNA表达,从而促进RPE细胞增生。
- 项奕邢怡桥晏颖彭坤杨安怀艾明杨燕宁
- 关键词：端粒酶抑制剂视网膜色素上皮细胞细胞增生
- 二甲基亚砜对培养人视网膜色素上皮细胞增殖的影响被引量：14
- 2004年
- 目的 探讨细胞分化诱导剂及端粒酶抑制剂二甲基亚砜 (dimethylsulfoxide ,DMSO)对人视网膜色素上皮细胞增殖的抑制作用。方法 本研究分实验组和对照组 ,对照组弃原培养液 ,加无血清培养液继续培养 ,实验组用不同浓度的DMSO 5、10、2 0、4 0mL·L-1分别作用于人RPE细胞 2 4、4 8、72、96h ,用MTT法检测DMSO对hRPE细胞生长的影响 ,流式细胞仪检测DMSO对hRPE细胞周期的影响。结果 10mL·L-1DMSO处理的hRPE细胞从作用 4 8h开始 ,OD值 ( 0 .5 37± 0 .0 10 )小于对照组 ( 0 .6 4 7± 0 .0 2 2 ) ,有显著性差异 (P <0 .0 0 1) ,细胞生长受到抑制 ,且随浓度增加及作用时间延长 ,抑制越显著。流式细胞仪检测 2 0mL·L-1DMSO作用 72h细胞周期发生明显变化 ,G1期细胞由4 1 31%增加至 5 9.6 5 % ,S期由 32 .0 9%减至 2 1.2 1% ,G2 期由 2 6 .6 5 %减至 19 14 % ,细胞生长被阻滞在G1期 ,生长受到抑制。结论 DMSO能阻滞hRPE细胞于G1期 ,抑制hRPE细胞增殖且呈剂量依赖性。
- 彭坤邢怡桥项奕叶美红艾明杨安怀杨燕宁
- 关键词：视网膜色素上皮细胞细胞增殖MTT法流式细胞术
- 端粒酶编码区的反义寡核苷酸对人视网膜色素上皮细胞增生的影响被引量：3
- 2005年
- 目的探讨不同浓度端粒酶编码区的反义寡核苷酸对人视网膜色素上皮细胞增生活性的影响。方法用不同浓度(0μmol·L-1、5μmol·L-1、10μmol·L-1、15μmol·L-1)端粒酶编码区的反义寡核苷酸处理人视网膜色素上皮细胞24h后,使用MTT法测定视网膜色素上皮细胞增生的抑制率,使用流式细胞仪检测其对视网膜色素上皮细胞周期的影响。结果不同浓度端粒酶编码区反义寡核苷酸处理过的视网膜色素上皮细胞的抑制率随反义寡核苷酸浓度的增高而升高,并将视网膜色素上皮细胞阻滞在G0/G1期。结论端粒酶编码区的反义寡核苷酸对视网膜色素上皮细胞有抑制作用且呈浓度依赖性,这一结论可能成为增生性玻璃体视网膜疾病基因治疗的一个新靶点。
- 晏颖邢怡桥项奕
- 关键词：端粒酶反义寡核苷酸转染视网膜色素上皮细胞
- 端粒酶系统在眼部疾病中的研究进展
- 2007年
- 端粒酶系统是端粒和端粒酶的总称。由于其与细胞衰老、增生乃至癌变的关系密切,端粒酶系统现已成为癌症及其他增生性疾病治疗研究的热点。大量研究表明,端粒酶的活性与眼部组织的增生、细胞的衰老及眼部肿瘤的发生关系密切。在此,我们就端粒、端粒酶研究现状及其与眼科疾病的关系和应用进展作一综述。
- 晏颖周和政陈晓
- 关键词：端粒端粒酶眼部疾病
- 热休克蛋白90抑制剂对视网膜色素上皮细胞增生的抑制作用
- 2003年
- 目的 :探讨热休克蛋白 90 (heatshockprotein 90 ,Hsp90 )抑制剂对培养的视网膜色素上皮 (Retinalpigmentepithelial,RPE)细胞端粒酶活性以及RPE细胞增生的影响。方法 :用分子原位杂交方法分别检测对照组和Hsp90抑制剂组RPE细胞端粒酶活性 ;末端缺口标记 (terminalUTPnick endlabeling ,TUNEL)法分别检测上述 2组细胞中凋亡细胞的比率 ;在上述 2组细胞中分别用甲基偶氮唑蓝 (metheltetrazolium ,MTT)法检测细胞增生状况。结果 :与RPE细胞对照组相比 ,加入Hsp90抑制剂组RPE细胞端粒酶活性显著降低 ,凋亡细胞的比率明显增高 ,RPE细胞生长抑制率升高。结论 :Hsp90抑制剂可抑制RPE细胞中端粒酶的活性 。
- 项奕曾水清邢怡桥
- 关键词：热休克蛋白90抑制剂视网膜色素上皮细胞增生端粒酶
- 褪黑素对体外培养的人视网膜色素上皮细胞增殖的影响被引量：4
- 2005年
- 目的观察褪黑素对体外培养的人视网膜色素上皮细胞生长、增殖的影响,寻找药物以防治增殖性玻璃体视网膜病变。方法分别将不同浓度的褪黑素(0,125ng·L-1,250ng·L-1,500ng·L-1)加入体外培养的视网膜色素上皮细胞培养液,72h后用四甲基唑盐(MTT)比色法在自动酶标测定仪测540nm处的吸光值A,并计算出不同浓度条件下的细胞增殖抑制率。结果褪黑素在不同浓度下抑制视网膜色素上皮细胞增殖,并存在剂量-效应关系,实验组125ng·L-1和500ng·L-1组与对照组比较有显著性差异(P<0.001),但实验组250ng·L-1组与对照组之间的差异无显著性。结论褪黑素能抑制体外培养的人视网膜色素上皮细胞增殖,可作为防治增生性玻璃体视网膜疾病的侯选药物作进一步研究。
- 沙兰施.普拉塔项奕邢怡桥梅海峰晏颖
- 关键词：褪黑素人视网膜色素上皮细胞增殖
