国家自然科学基金(30200319)
- 作品数：7 被引量：51H指数：5
- 相关作者：周永胜刘云松曾百进许永伟倪永伟更多>>
- 相关机构：北京大学口腔医院首都医科大学附属北京口腔医院中国医学科学院更多>>
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- 相关领域：医药卫生更多>>
- 体外贮存对人富血小板血浆生物学活性的影响被引量：6
- 2008年
- 目的:探索各种贮存条件对人富血小板血浆(human platelet-rich plasma,hPRP)生物学活性的影响,研究hPRP释放生长因子的浓度作为评价hPRP生物学活性指标的可行性,为最终确定一整套应用hPRP的标准化方法奠定基础。方法:制备健康志愿者的hPRP,记录血小板计数。将每份hPRP释放生长因子分为3组,分别贮存在4℃,-20℃和-70℃,在制备后0,2,4,6,8,10d测定3组标本中转化生长因子β1(transforming growth factor β1,TGF-β1)和血小板衍生生长因子AB(platelet-derived growth factor AB,PDGF-AB)的浓度。同时,应用不同温度(4℃,-20℃,-70℃)贮存10d的hPRP释放生长因子培养人脂肪基质细胞,以MTT法比较各组标本促进细胞增殖的生物学活性。结果:在体外贮存过程中,hPRP释放生长因子TGF-β1和PDGF-AB的浓度下降很快。低温是保存hPRP释放生长因子相对适宜的环境。当贮存10d后,在-20℃和-70℃贮存的标本其TGF-β1的浓度分别为(238.55±36.00)μg/L和(261.12±55.10)μg/L,PDGF-AB的浓度分别为(46.03±17.67)μg/L和(50.78±18.70)μg/L,显著高于贮存在4℃时两种生长因子的浓度[(113.03±16.29)μg/L和(23.27±8.22)μg/L(P<0.01)]。MTT实验结果显示,不同温度贮存hPRP,其生物学活性也有显著差异,且与生长因子浓度差异基本一致。结论:hPRP释放生长因子只能在低温环境中短时间贮存,生长因子定量分析是评价hPRP生物学活性较为可靠的指标。
- 刘云松周永胜朱姗姗曾百进许永伟
- 关键词：血浆血小板源性生长因子转化生长因子Β
- rhTNF-α对成骨向分化前后的人脂肪基质细胞分泌血管生成相关生长因子的影响被引量：3
- 2009年
- 目的:研究在重组人肿瘤坏死因子(recombinant human tumor necrosis factor alpha,rhTNF-α)刺激下人脂肪基质细胞(human adipose tissue-derived stromal cells,hADSCs)增殖的改变及成骨向分化前后血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)、成纤维细胞生长因子2(fibroblast growth factor-2,FGF-2)和胰岛素样生长因子1(insulin-like growth factor-1,IGF-1)分泌的变化。方法:采用吸脂术获得的第4代hADSCs,以终浓度为0、1、5、10、50、100μg/L的rhTNF-α刺激hADSCs,分别在48、72、96 h后行MTT法检测不同浓度rhTNF-α对hADSCs增殖的影响;并以该浓度梯度的rhTNF-α刺激hADSCs,24 h后收集上清,以ELISA法检测VEGF、FGF-2和IGF-1的分泌情况;在成骨向诱导的第1、3、7、14天收集细胞上清,ELISA法检测上述3种生长因子分泌的变化,收集细胞上清前24 h更换培养基,并在相应孔中加入rhTNF-α,使其终浓度为10μg/L。所有ELISA数据均以相应培养孔的细胞数进行校正。结果:rhTNF-α能促进hADSCs的增殖,其作用表现为一定的浓度和时间依赖。相比于对照组,48 h时,10μg/LrhTNF-α对增殖的促进作用并不明显,但96 h时则表现为促进作用(P<0.01),而100μg/L rhTNF-α在48 h表现为抑制作用(P<0.01),96 h时则表现为明显的促进作用(P<0.01)。相对于对照组,rhTNF-α可以显著促进hADSCs分泌VEGF、FGF-2和IGF-1(P<0.01);hADSCs经成骨向诱导后,上述3种生长因子的分泌有增加的趋势;不同成骨向分化阶段的hADSCs用10μg/L rhTNF-α刺激后,在诱导第1天,rhTNF-α显著促进VEGF的分泌(P<0.01),但对FGF-2和IGF-1的分泌无显著性影响;在诱导第3天和第7天,rhTNF-α对VEGF(P<0.01)、FGF-2(P<0.05)和IGF-1(P<0.05)的分泌均有促进作用;但在第14天则抑制VEGF(P<0.01)、FGF-2(P<0.05)和IGF(P<0.05)的分泌。结论:一定浓度的rhTNF-α对hADSCs的增殖有促进作用;hADSCs分泌VEGF、FGF-2和IGF-1具有rhTNF-α的浓度依赖;在不同成骨向分化阶段,rhTNF-α对hADSCs分
- 曾百进余日月周永胜徐军倪永伟刘云松许永伟
- 关键词：间质细胞血管生成诱导剂
- 人、兔、大鼠脂肪基质细胞的生物学性状对比被引量：8
- 2009年
- 目的:探讨在同一质量控制条件下,人、兔、大鼠来源脂肪基质细胞(adipose tissue-derived stromal cells,ADSCs)的体外生物学性状的异同。方法:分离培养人吸脂来源ADSCs、兔及大鼠腹股沟皮下脂肪垫来源ADSCs,体外观察3种细胞原代和传代细胞的形态及生长情况,MTT法检测细胞增殖情况。以相同密度将第2代细胞接种于24孔板,并诱导其成骨及成脂向分化。成骨诱导培养基包含100 nmol/L地塞米松、50μmol/L抗坏血酸二磷酸酯和10 mmol/Lβ-甘油磷酸钠,在成骨向诱导后的第3、7、14、21天行碱性磷酸酶染色,第14、28天行茜素红染色,定量分析3种细胞体外钙沉积能力。成脂向诱导培养基包含1μmol/L地塞米松、10μmol/L胰岛素、200μmol/L吲哚美辛和0.5 mmol/L异丁基黄嘌呤,在成脂向诱导后的第7、14天行油红O染色检测细胞的成脂分化状况。结果:3种来源的脂肪均可分离培养出"成纤维细胞样"细胞,均能成脂向分化和成骨向分化,但兔ADSCs在成骨向分化时碱性磷酸酶染色呈弱阳性,无明显钙结节形成,与其他两种细胞比较,兔ADSCs的成骨向分化能力较差。结论:与人来源和大鼠来源ADSCs比较,兔皮下脂肪来源ADSCs的体外成骨能力较差,将其用于体内成骨研究时需慎重。
- 倪永伟周永胜刘云松曾百进许永伟
- 关键词：脂肪组织间质细胞细胞分化
- 人脂肪基质细胞的分离、培养、增殖及传代稳定性被引量：6
- 2006年
- 目的:建立人脂肪基质细胞分离、培养及扩增的方法,观察其增殖动力学行为,检测其传代稳定性。方法:通过吸脂术获取人的脂肪组织并分离脂肪基质细胞,在普通培养基中进行培养,观察细胞形态,绘制细胞增殖曲线,用油红O染色显示胞内脂滴生成,并检测其是否向脂肪细胞自动分化。结果:人的脂肪组织中可分离出基质细胞,在体外生长形态类似成纤维细胞;其增殖曲线呈S形。在原代及传代培养中均未见脂肪细胞或胞内脂滴生成。结论:成年人脂肪组织中存在的基质细胞可维持在未分化状态下稳定的增殖和传代。
- 周永胜刘云松周书敏谭建国
- 关键词：人脂肪基质细胞细胞培养增殖传代
- 人脂肪基质细胞在骨组织工程学中的应用被引量：5
- 2012年
- 口腔颌面部及全身骨组织缺损是临床医生经常要面对的困境。造成骨缺损的原因有很多,包括先天发育异常、炎症、肿瘤、外伤等,然而治疗骨缺损的方法却十分有限,以往主要应用自体骨移植或人工骨替代材料,但是,自体骨移植取材受限并且会增加手术创伤,人工材料生物相容性差并且成骨能力有限,
- 周永胜刘云松葛雯姝张晓马桂娥曾百进倪永伟
- 关键词：脂肪组织干细胞
- Is 1, 25-dihydroxyvitamin D_3 an ideal substitute for dexamethasone for inducing osteogenic differentiation of human adipose tissue-derived stromal cells in vitro?被引量：23
- 2006年
- 背景人的脂肪质的导出织物的 stromal 房间(hADSCs ) 能被导致在 dexamethasone (DEX ) 的刺激下面区分一个 osteoblastic 系。然而， Recentstudies 在调停询问了象 DEX 那样的 glucocorticoids 的功效骨胳的祖先房间的成骨过程并且处理脂肪把房间发成送气音。为 DEX 发现一个代用品是可能的吗？因此，这研究被设计调查 osteogenic 能力并且由比较 osteogenic 为 hADSCs 的 osteoblastic 区别调整机制包含任何一个 1 的媒介(OM ) ， 25-dihydroxyvitamin D_3 (VD ) 或 DEX 并且决定 VD 是否作为为 hADSCs 的成骨的一个正式就职代理人是为 DEX 的一个理想的代用品。hADSCs 的方法 Osteogenicdifferentiation 被包含任何一个 10 nmol/L VD or100 nmol/L DEX 的 osteogenic 媒介(OM ) 导致。进 osteoblastic 系的 hADSCs 的区别被染色的碱的磷酸酶(高山)识别，染色的 von Kossa ，和反向的抄写聚合酶为象类型Ⅰ 骨胶原那样的成骨相关的基因的 mRNA 表示锁住反应试金(关口Ⅰ)， bonesialoprotein ( BSP )， osteocalcin ( OC )，骨头形态基因的蛋白质( BMP )-2, BMP-4 ， BMP-6 ， BMP-7 ，老牛相关的抄写因素 2/core 绑定因素 α1 ( Runx2/Cbfa1 )， osterix ( Osx )，和 LIMmineralization protein-1 ( LMP-1 )。染色的结果 von Kossa 表明 VD 和 DEX 导致的区分的房间在 vitro 被使矿物化。他们也表示了 osteoblast-relatedmarkers，例如高山，关口Ⅰ， BSP，和 OC。Runx2/Cbfa1， Osx， BMP-6，和 LMP-1 是 upregulatedduring VD 和导致 DEX 的 hADSC osteoblastic 区别，而是 BMP-4， BMP-7 不。BMP-2 仅仅在导致 VD 的区分的房间被表示。向在 vitro 的 osteoblastic 系的结论 VD 或导致 DEX 的 hADSCsdifferentiate。Runx2/Cbfa1， Osx， BMP-2， BMP-6，和 LMP-1are 在调整 hADSCs，而是 BMP-4 的 osteoblastic 区别包含了， BMP-7 不。VD，然而并非 DEX，在 hADSCs 感应的 osteogenic 期间导致 BMP-2 的表示。VD 是为为 hADSCs 感应的 osteogenic 的 DEX 的一个�
- ZHOU Yong-sheng LIU Yun-song TAN Jian-guo
- 关键词：抗炎药
- 脂肪组织是骨、软骨、软组织缺损组织工程再建的理想干细胞来源(英文)被引量：6
- 2007年
- 目的验证人脂肪基质细胞是否具有向成骨细胞、软骨细胞、脂肪细胞分化的能力,从而为骨、软骨、软组织再建寻找一种理想的干细胞来源。方法分别用成骨向分化培养基(DMEM+10%FBS+地塞米松+维生素C+β-甘油磷酸)、软骨向分化培养基(DMEM+1%FBS+胰岛素+维生素C+转化生长因子β1)及脂肪向分化培养基(DMEM+10%FBS+地塞米松+胰岛素+吲哚美辛+异丁基甲基黄嘌呤)诱导人脂肪基质细胞向成骨细胞、软骨细胞及脂肪细胞分化。用vonKossa和碱性磷酸酶染色鉴定成骨细胞分化,而软骨细胞分化和脂肪细胞分化分别用Alcianblue染色和油红O染色显示。成骨细胞、软骨细胞以及脂肪细胞特异相关或标志基因的表达用RT-PCR检测。结果体外实验表明,人脂肪基质细胞在定向分化诱导剂的作用下可分别向成骨细胞、软骨细胞及脂肪细胞分化。结论人脂肪基质细胞中包含有多向分化能力的干细胞,可用于今后骨、软骨、软组织的组织工程再建。
- 刘云松周永胜谭建国
- 关键词：人脂肪基质细胞软骨细胞脂肪细胞
