国家自然科学基金(81071056)
- 作品数：4 被引量：5H指数：2
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- 幼鼠不同程度脱髓鞘后惊厥易患性变化被引量：2
- 2013年
- 目的探索幼年SD大鼠不同程度脱髓鞘对惊厥易患性的影响。方法选用21d幼鼠181只，按随机数字表法分为对照组和实验组，对照组给予正常饲料喂养2周（n=41）及4周（n=45），实验组给予含0．6％铜宗的饲料分别喂养2周（n=48）及4周（n=47）制备脱髓鞘模型。通过免疫组织化学及蛋白质印迹检测髓鞘碱性蛋白（MBP）含量，对脱髓鞘模型进行鉴定；利用匹罗卡品诱导大鼠惊厥发作，记录其出现惊厥的时间；膜片钳记录自无镁人工脑脊液（ACSF）诱导后海马脑片自发放电的潜伏期；利用视频-脑电图检测大鼠行为及其脑电图的改变；采用原位末端标记法（TUNEL法）观察海马神经元凋亡情况。结果免疫组织化学及蛋白质印迹检测结果显示，铜宗可导致海马及其胼胝体内髓鞘脱失，且铜宗4周组大鼠髓鞘脱失程度明显重于铜宗2周组。铜宗4周组大鼠经匹罗卡品诱发惊厥的潜伏期[（13．33±3．46）min]较其同龄对照组[（19．66±4．33）min]明显缩短（t=4．62，P〈0．01）；膜片钳测定结果发现，铜宗2周组大鼠自发放电潜伏期[（35．00±5．03）min]与同龄对照组[（49．86±10．65）min]相比明显缩短，差异有统计学意义（t=3．34，P〈0．05）；铜宗4周组与其同龄对照组相比，大鼠自发放电的潜伏期（min）亦明显缩短[19．29±3．95与51．86±10．79，t=7．50，P〈0．01]，且较铜宗2周组缩短更为明显（t=6．50，P〈0．01）；通过视频及脑电图联合检测发现，7／11的铜宗2周组大鼠脑电图出现了癫痫样放电，铜宗4周组出现异常脑电图阳性率达10／10，同龄对照组脑电图均无异常；铜宗2周及4周组海马神经元TUNEL阳性细胞数与对照组相比，差异均无统计学意义。结论幼年大鼠脱髓鞘后，惊厥易患性明显增加，且脱髓鞘程度越重，惊厥潜伏期缩短更为明显，提示髓鞘的病变有可能是导致癫
- 叶园珍蒋莉李听松陈恒胜熊佳佳孔敏胡君程莉
- 关键词：脱髓鞘疾病疾病易感性
- 幼鼠癫痫发生过程中胼胝体内髓鞘变化的研究被引量：1
- 2013年
- 目的探讨幼鼠惊厥持续状态(status convulsion,SC)后癫痫发生过程中胼胝体内有髓神经纤维(myelinated fibers,MF)的变化。方法选用21 d SD幼鼠122只,按随机数字表法分为对照组(n=48)及实验组(n=74)。实验组采用氯化锂匹罗卡品制备SC模型,应用无线遥测脑电图记录SC后癫痫发生不同时期脑电图变化;Gallyas银染观察胼胝体MF形态变化;Western blot检测胼胝体内髓鞘碱性蛋白(myelin basic protein,MBP)含量变化;透射电镜观察MF超微结构的改变。结果 SC后不同时期脑电图的表现符合癫痫发生各阶段的变化;幼鼠SC后癫痫发生的慢性早期及慢性期胼胝体厚度明显变薄;与同龄对照组相比,幼鼠胼胝体内的MBP表达于SC后急性期即开始下降(P<0.05),且潜伏期、慢性早期、慢性期均显著低于正常对照组(P<0.01);透射电镜可见大鼠SC后急性期胼胝体内MF开始出现分层、肿胀,慢性早期及慢性期还可见空泡化。结论幼鼠SC所致胼胝体内MF的损伤贯穿于SC后癫痫发生整个过程。
- 李听松叶园珍蒋莉陈恒胜熊佳佳孔敏胡君
- 关键词：幼鼠惊厥持续状态有髓神经纤维胼胝体
- 脑源性神经营养因子与不含GLuR2的AMPA受体在增强AMPA受体功能及活化突触囊泡中的关系
- 2014年
- 目的：研究脑源性神经营养因子（brain-derived neurotrophic factor,BDNF）与α-氨基-3-羟基-5-甲基-4-异恶唑丙酸（α-amino-3-hydroxy-5-methyl-4-isoxazole-propionic acid,AMPA）受体尤其不含GluR2的AMPA受体的相互关系,为进一步针对性调控BDNF及AMPA受体,保护海马神经元提供理论依据。方法：孕17~18 d SD大鼠8只,取胎鼠体外培养海马神经元细胞爬片,同批细胞爬片随机分为空白对照组（N组）、BDNF实验组（BDNF组）、特异性阻断不含GLuR2的AMPA受体的阻断剂1-萘乙酰精胺三盐酸（1-naphthylacetyl spermine Trihydrochloride,NASPM）对照组（N＋NASPM组）、BDNF＋NASPM实验组（BDNF＋NASPM组）4组,各组随机选择爬片2张,共3批细胞爬片应用于实验。各组应用Synapto GreenTM C4（FM1-43）结合激光共聚焦标记突触囊泡,活体追踪同一视野给予相应处理前后2次染色突触囊泡变化;应用膜片钳记录AMPA受体mEPSCs频率及幅度变化。结果：BDNF组与N组第2次染色比较,荧光强度BDNF组（750.23±137.81）明显高于N组（554.41±16.42）（χ2=7.22,P=0.030）;而BDNF组添加NASPM后,荧光强度（525.93±72.64）较BDNF组有明显减少（χ2=13.18,P=0.000）,表明BDNF对不含GLuR2的AMPA受体调控可能是BDNF使功能突触囊泡增多的机制之一。BDNF组较N组AMPA受体微兴奋性突触后电流的频率从（1.730±0.217）增长到（3.340±0.280）（P=0.000）,幅度从（-16.30±1.98）增加到（-25.00±2.57）（P=0.000）。BDNF组使用NASPM后,频率（1.740±0.207）（P=0.000）及幅度（-15.50±2.52）（P=0.000）均减小,表明BDNF能通过对不含GLuR2的AMPA受体调控来增加AMPA受体的功能。结论：BDNF可能部分通过调节不含GLuR2的AMPA受体,来参与BDNF增强AMPA受体功能及活化突触囊泡的作用。
- 胡巧罗媛媛陈恒胜程莉蒋莉
- 关键词：脑源性神经营养因子GLUR2
- 持续惊厥后幼年大鼠海马电生理学变化及脑源性神经营养因子表达变化被引量：2
- 2014年
- 目的:研究幼年期大鼠长时程惊厥(status convulsion,SC)后海马电生理学与海马脑源性神经营养因子(brain-derived neurotrophic factor,BDNF)表达变化,探索两者之间的可能关系。方法:选择生后21 d Wistar鼠160只,随机分为对照组和实验组,每组80只。腹腔注射氯化锂-匹罗卡品制造SC模型;以腹腔注射生理盐水为对照组。造模后1、7、14、21 d膜片钳技术检测海马场兴奋性突触后电位(field excitatory postsynaptic potentials,fEPSP)斜率与波幅的变化,比较长时程增强(long-term potentiation,LTP)现象。造模后12 h、1 d、3、7、14、21 d免疫组织化学观察海马区BDNF表达的定位情况,Western blot方法鉴定其表达情况。结果:(1)SC后7 d,实验组fEPSP斜率为(162.30±28.50)%高于对照组(124.01±26.46)%(P<0.05);SC后14 d实验组和对照组fEPSP斜率分别为(83.06±8.32)%和(121.64±23.12)%,波幅分别为(100.54±16.03)%和(135.65±35.85)%,实验组较对照组斜率及波幅明显降低,有统计学差异(P<0.05)。(2)免疫组织检查发现SC后大鼠海马CA1,CA3区BDNF阳性着色均有不同程度的增强,实验组在SC后12 h、1 d、3、7 d较正常组有增多趋势,14 d及21 d组无明显差别。(3)Western blot测定BDNF表达情况,SC后12 h、1 d、3、7 d分别为:1.08±0.10、1.39±0.08、0.85±0.04、0.53±0.06,对照组分别为:0.39±0.16、0.37±0.03、0.39±0.02、0.37±0.04,实验组与对照组比较有统计学差异(P<0.05)。结论:(1)幼年大鼠SC后fEPSP斜率在SC后7 d较正常组增高;在SC后14 d fEPSP斜率及波幅较对照组和其他实验组明显降低。提示SC后急性期LTP增高,潜伏期LTP降低。(2)经免疫组化和Western blot方法检测,提示BDNF表达受SC刺激影响,在SC后急性期表达明显增多。(3)BDNF在LTP形成过程中可能起重要作用。
- 熊佳佳蒋莉陈恒胜胡越
- 关键词：长时程增强脑源性神经营养因子
