在利用Berthelot反应测定微生物发酵中铵离子浓度时,培养液中的亚硫酸钠严重干扰了测定结果。预先加入适量的次氯酸钠溶液处理样品能有效地排除这一干扰。对次氯酸钠的加入量、处理时间和待测样品的pH进行优化,结果表明:当次氯酸钠与亚硫酸钠的摩尔比为2∶1、处理时间>1 m in、样品处理前调pH<9.0时,测得发酵液中铵离子浓度,经离子色谱法对照测试验证.最大相对误差为2.3%,达到了理想的效果。
利用初步制备的溶藻弧菌外膜蛋白(outer membrane protein of Vibrio alginolyticus,Va-OMP)、溶藻弧菌蛋白分子量58kD外膜蛋白(Va-OMP58)和溶藻弧菌(Vibrio alginolyticus,Va)灭活菌苗、溶藻弧菌脂多糖(lipopolysaccharides of Vibrio alginolyticus,Va-LPS)菌苗等进行主动保护性和被动保护性的实验比较,Va-OMP、Va-OMP58免疫组小鼠免疫后用活菌攻击,免疫保护率为62.5%~86.7%,而Va-LPS组和Va灭活菌苗组的免疫保护率为50%~62.5%,对照组的免疫保护率仅为6.7%。用不同抗血清免疫小鼠,活菌攻击后,Va-OMP组存活率达到53.3%和66.7%,Va-OMP58组次之,存活率为40%和50%,Va灭活菌组的存活率为33.3%和46.7%,对照组为13.3%。与对照组相比较,Va-OMP组差异较显著,保护效果较好。溶藻弧菌外膜蛋白和蛋白分子量58kD外膜蛋白的保护性效果高于溶藻弧菌灭活菌苗和溶藻弧菌脂多糖的保护性效果,证明外膜蛋白(outer membrane protein,OMP)具有较强的免疫原性。迟发性超敏反应试验也证明,OMP能诱发变态反应,间接证明OMP具有较强的引起细胞介导免疫反应的能力。因此实验证明,Va-OMP、Va-OMP58是能在小鼠产生体液免疫和细胞介导免疫的保护性抗原。