国家高技术研究发展计划(2007AA10Z425)
- 作品数：2 被引量：5H指数：2
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- 绿色荧光蛋白基因在小麦禾谷镰刀菌中的表达与鉴定被引量：2
- 2010年
- 为了获得稳定表达绿色荧光蛋白(GFP)的我国代表性小麦禾谷镰刀菌菌株用于小麦抗赤霉病接种鉴定与分析,以禾谷镰刀菌武昌菌株Fg175原生质体为受体,经PEG介导将序列优化的水母GFP基因转入该菌株中,分析鉴定了转基因菌株GFP基因的表达。PCR分析表明,Fg175基因组中整合了GFP基因,Western blot检测到高效表达的GFP特异蛋白;激光共聚焦显微镜及体视显微镜观察进一步证实,转基因菌株Fg175-GFP的分生孢子、菌丝及接种小麦麦穗均可发出清晰的绿色荧光。
- 李和平张静柏廖玉才
- 关键词：小麦禾谷镰刀菌绿色荧光蛋白
- 抗玉米赤霉烯酮毒素单链抗体-碱性磷酸酶融合蛋白的表达被引量：3
- 2008年
- 根据抗玉米赤霉烯酮毒素单链抗体的氨基酸序列及大肠杆菌偏爱密码子,用重叠延伸PCR法合成了单链抗体的重链和轻链,经(Gly4Ser)2Linker连接,获得完整的单链抗体基因ZEN2 scFv。将ZEN2 scFv与碱性磷酸酶(AP)编码序列连接形成融合蛋白基因ZEN2 scFv-AP,构建到pET载体,转化大肠杆菌菌株BL21(DE3),经IPTG诱导表达及亲和层析纯化,在SDS-PAGE和Western blot分析中均检测到1条分子质量为75 ku的可溶性蛋白条带,ELISA分析证实,细菌表达的ZEN2 scFv-AP融合蛋白具有碱性磷酸酶活性。这一研究结果为建立快速、灵敏、经济的玉米赤霉烯酮毒素的ELISA检测奠定了基础。
- 李鑫瞿波廖玉才李和平
- 关键词：玉米赤霉烯酮单链抗体碱性磷酸酶融合蛋白
