浙江省“钱江人才计划”(2012R10076)
- 作品数：10 被引量：27H指数：3
- 相关作者：采克俊曹访刘莉李景芬叶金云更多>>
- 相关机构：湖州师范学院浙江省淡水水产研究所苏州大学更多>>
- 发文基金：浙江省“钱江人才计划”浙江省自然科学基金浙江省科技厅创新团队建设与人才培养项目更多>>
- 相关领域：农业科学更多>>
- 五月龄翘嘴红鲌性腺组织小RNA转录谱的分析比较被引量：2
- 2020年
- 采用转录组高通量测序方法,比较分析幼龄翘嘴红鲌精巢、卵巢组织中小RNA转录谱。结果显示,精巢、卵巢的小RNA分布的峰值分别为28、29 nt,与一般物种的22~24 nt有较大的差异;在小RNA库中,经比对注释的比例很低,分别为2.5%、2.1%。在比对注释的斑马鱼miRBase、斑马鱼ncRNA、piRNA、Rfam数据库中,精巢组织中被miRBase数据库注释的比例最高,为1.49%;而卵巢组织中被miRBase和piRNA数据库注释的比例接近,分别为0.94%和0.96%。比较表达量相对较高的共有miRNA分子,均是与胚胎发育相关的分子,且大多是精巢组织的表达量高于卵巢组织,这些miRNA分子在个体发育中可能具有重要意义。初步获得了翘嘴红鲌不同性腺组织的转录谱,为今后进一步分析小RNA在生殖发育中的调控作用奠定了基础。
- 曹访刘莉采克俊吴成龙周俊波
- 关键词：翘嘴红鲌卵巢MIRNA
- 黄颡鱼精子超低温冷冻保存技术被引量：7
- 2013年
- 以解冻后的精子活力为指标,研究了不同稀释液、不同抗冻剂、平衡时间、液氮熏蒸高度、稀释液pH值和不同糖类对黄颡鱼(Pelteobagrus fulvidraco)精子超低温冷冻保存的影响。结果显示,最佳防冻液为10%甲醇与CCSE2组合,最佳平衡时间为30 min,最佳熏蒸高度为7 cm,稀释液pH值为6.0和7.0时较合适,添加麦芽糖的冻精活力较好。
- 夏良萍陈梦婷陈悦萍徐丹丹采克俊
- 关键词：黄颡鱼精子超低温冷冻保存
- 南美白对虾肝胰腺超氧化物歧化酶和酚氧化酶的荧光定量PCR检测被引量：1
- 2015年
- 试验设计了南美白对虾超氧岐化酶和酚氧化酶的荧光定量PCR检测的特异性引物,用于检测肝胰腺中超氧化物歧化酶(SOD)和酚氧化酶(PO)的表达。该方法避免了血清学检测免疫指标的不稳定性、测定值波动性较大的缺点,可作为评估南美白对虾免疫状态的一种分子检测方法。
- 刘莉林锋曹铮许怡
- 关键词：南美白对虾肝胰腺PO荧光定量PCR
- MxA基因修饰的鸡精原干细胞体内移植获得转基因精子被引量：1
- 2013年
- 本实验旨在探讨鸡精原干细胞(SSCs)经体外遗传修饰后移植获得转基因精子的方法。将人抗病毒基因MxA重组慢病毒体外感染鸡SSCs,获得可表达MxA的SSCs;同时将80日龄公鸡经白消安处理30 d后作为无生精能力的受体鸡。MxA基因转染后的SSCs移植到受体鸡,10 d后开始采精,经PCR检测精液DNA中的MxA基因;取移植后10 d的睾丸组织分离培养并检测外源基因表达。结果表明:MxA重组慢病毒感染SSCs后,可见其特征性荧光表达;白消安处理后的受体鸡睾丸组织曲细精管中内源性生精细胞已基本去除;实验组有1只受体鸡的精液DNA连续4次扩增出MxA特异性片段;睾丸组织细胞的RT-PCR及免疫组化均检测到MxA基因的表达。结果显示,重组慢病毒感染后的SSCs能成功移植至受体组织,并继续分化为携带MxA外源基因的精子。本研究为下一步通过人工授精获得抗病毒转基因鸡奠定了良好基础。
- 刘莉何湃采克俊张易祥曹访李景芬
- 关键词：MXA慢病毒载体
- 利用分子遗传标记分析浙江地区浮萍多样性被引量：6
- 2012年
- [目的]利用分子遗传标记对浙江地区的浮萍多样性进行分析。[方法]收集浙江省不同地区的6株浮萍,通过形态学特征、叶绿体基因组的rpS16内含子序列及atpF-atpH条形码序列分析浮萍的遗传多样性。[结果]形态学鉴定表明,HN-YG-3和HZ-YXY-1浮萍属紫萍属,而HZ-HZY-2、HA-LP-4、HA-HSD-5和ZS-DH-6浮萍属浮萍属。atpF-atpH序列分析表明,HZ-HSD-5浮萍和HZ-HZY-2浮萍亲缘关系最近;rpS16内含子序列分析表明,ZS-DH-6浮萍和HA-HSD-5浮萍亲缘关系最近。[结论]叶绿体基因组和atpF-atpH条形码序列分子遗传标记较形态学鉴定更能反映出浮萍遗传多样性的特点,为今后浮萍资源的开发利用提供了更多的参考依据。
- 王敏雅陆菲毛杉杉李岚张琼刘莉采克俊曹访
- 关键词：浮萍分子标记
- 翘嘴红鲌精原干细胞的分离培养及鉴定
- 2015年
- 通过制作、观察翘嘴红鲌(Erythroculter ilishaeformis)各生长阶段的精巢切片,确定翘嘴红鲌精原干细胞最佳分离时间。采用两步酶消化法分离其精原干细胞,并进行体外初步培养研究,最后通过碱性磷酸酶染色、干细胞标志基因Oct-4 RT-PCR扩增进行鉴定。结果显示:7月龄翘嘴红鲌精巢为分离精原干细胞的最佳时期,所分离的精原干细胞符合干细胞的形态、增殖及表达特征,且细胞碱性磷酸酶染色呈阳性,支持细胞碱性磷酸酶染色呈阴性,Oct-4基因表达呈阳性。
- 曹访刘莉采克俊叶金云卢中玉
- 关键词：翘嘴红鲌精原干细胞
- 长吻精子超低温冷冻保存被引量：1
- 2015年
- 以精子活力为研究指标,比较二甲亚砜、甘油、甲醇、乙二醇、丙二醇、乙二醇甲醚6种不同抗冻剂、平衡时间、熏蒸高度对长吻(Leiocassis longirostris)精子超低温冷冻保存的影响。防冻液组合为:10%乙二醇甲醚/HBSS条件下平衡30 min,熏蒸高度为11 cm时,长吻的冻精活力最高。
- 采克俊周志金曹访朱俊杰李景芬叶金云
- 关键词：精子超低温冷冻保存
- 鱼类精子低温冷冻保存研究进展被引量：8
- 2012年
- 鱼类精子的低温冷冻保存不仅对于鱼类养殖,而且对于鱼类资源保护和遗传改良都具有重要意义.一些鱼类物种特异的精子冷冻方案已经建立.本文就鱼类精子低温冷冻保存的基本原理、稀释液、抗冻剂、降温速率以及应用作一简要评述.
- 采克俊曹访叶金云
- 关键词：鱼类精子稀释液抗冻剂
- 翘嘴红鲌Vasa基因cDNA克隆及其组织表达特征被引量：1
- 2014年
- 为了研究Vasa基因在翘嘴红鲌生殖细胞发育中的作用,本研究以翘嘴红鲌冬片鱼种的精巢组织为材料,提取总RNA,采用RT-PCR和RACE技术分离、克隆Vasa基因的cDNA全序列,与其他21个物种的Vasa氨基酸序列进行同源性比较,并利用荧光定量PCR分析Vasa基因在翘嘴红鲌各组织的表达。结果表明:该基因序列全长为2 713 bp,编码684个氨基酸,具备DEAD-box家族特有的8个保守基序;翘嘴红鲌与草鱼的同源性最高达96%;Vasa仅在翘嘴红鲌精巢和卵巢中表达;与成鱼繁殖期的性腺组织相比,后者表达量高,差异显著(P<0.05),同期精巢、卵巢Vasa基因表达量差异不显著。由此可见,Vasa可作为翘嘴红鲌生殖细胞的标志基因。该基因全序列的获得为今后进一步探讨翘嘴红鲌生殖发育规律奠定了基础。
- 曹访刘莉采克俊李景芬
- 关键词：VASA基因克隆MRNA表达翘嘴红鲌
- 反向、巢式、降落PCR技术克隆奥尼罗非鱼MSTN基因3'侧翼序列被引量：1
- 2014年
- 为获得奥尼罗非鱼侧翼MSTN基因的3'未知序列以完成奥尼罗非鱼MSTN基因全序列的克隆,采用反向、巢式、降落等3种PCR技术对该未知序列进行克隆,对克隆到的序列进行测序,并与已有的奥尼罗非鱼MSTN基因核苷酸序列进行比对,获得MSTN基因3'端1 376 bp新序列,从而完成奥尼罗非鱼MSTN基因全序列的克隆,为奥尼罗非鱼MSTN基因功能的进一步研究以及奥尼罗非鱼的分子育种研究奠定基础。说明反向、巢式、降落PCR相结合是扩增已知基因侧翼序列行之有效的方法。
- 李景芬采克俊曹访孙君艳梅杨玲
- 关键词：反向PCR降落PCR奥尼罗非鱼MSTN基因
