国家自然科学基金(30200371)
- 作品数：5 被引量：50H指数：4
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- 相关机构：北京中医药大学东直门医院中国人民解放军海军总医院更多>>
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- 黄芪甲苷对心肌成纤维细胞Ⅰ型胶原合成的影响被引量：6
- 2009年
- 目的:通过观察黄芪甲苷对AngⅡ诱导的心肌成纤维细胞(CFB)Ⅰ型胶原合成的影响,探讨其抗心肌纤维化的作用机制。方法:差速贴壁法提取原代CFB,采用ELISA法检测Ⅰ型胶原合成,RT-PCR法半定量检测Ⅰ胶原mRNA表达。结果:AngⅡ10-7mol/L有促进Ⅰ型胶原mRNA表达及心肌成纤维细胞分泌Ⅰ型胶原的作用,与空白对照组比较,有显著性差异;Losartan10-6mol/L可降低AngⅡ引起的Ⅰ型胶原mRNA表达及分泌增加,两者比较有显著性差异;黄芪甲苷100μg/mL有降低AngⅡ引起Ⅰ型胶原mRNA表达及分泌增加的趋势,但无统计学意义,P>0.05。结论:AngⅡ可直接促进CFB分泌Ⅰ型胶原,并能显著增加Ⅰ型胶原mRNA的表达;黄芪甲苷对AngⅡ诱导的Ⅰ型胶原mRNA表达及分泌增加未见明显抑制作用。提示,黄芪甲苷抗心肌纤维化作用的产生可能不是通过直接抑制AngⅡ诱导的Ⅰ型胶原的合成增加来实现的。
- 张冬梅秦英牛福玲朱陵群王硕仁
- 关键词：黄芪甲苷心肌成纤维细胞
- 丹参酮II_A对大鼠系膜细胞增殖及TGF-β1启动子活性的调控被引量：3
- 2008年
- 目的观察丹参酮IIA对大鼠系膜细胞增殖及对人TGF-β1基因启动子活性的作用。方法应用MTT法观察丹参酮IIA对大鼠系膜细胞增殖的作用;将不同长度的人TGF-β1基因启动子片段与氯霉素乙酰基转移酶(CAT)报告基因组成重组体phTGF 2.14,采用脂质体法转染至大鼠系膜细胞中,分别加入不同浓度的丹参酮IIA(1、5、10 mg/L)进行干预,用ELISA方法检测报告基因CAT的活性。结果10 mg/L的丹参酮IIA对大鼠肾小球系膜细胞增殖有明显的抑制作用,与对照组比较有明显差异(P<0.01)。丹参酮IIA浓度为1、5 mg/L时对重组体phTGF 2.14的表达活性无影响,当增大丹参酮IIA浓度为10 mg/L时对重组体phTGF2.14的表达活性有抑制作用,与对照组比较有显著差异(P<0.01)。结论丹参酮IIA能够抑制系膜细胞增殖,当浓度为10 mg/L时对人TGF-β1基因启动子活性也具有抑制作用。
- 秦英杨君于海张冬梅牛福玲王硕仁朱陵群周春华
- 关键词：启动子肾小球系膜细胞
- 川芎嗪对血管紧张素Ⅱ诱导的大鼠心肌成纤维细胞增殖及Ⅰ型胶原合成的影响被引量：8
- 2009年
- 目的:通过观察川芎嗪(tetramethylpyrazine,TMP)对血管紧张素Ⅱ(angiotensin Ⅱ,AngⅡ)诱导的大鼠心肌成纤维细胞(cardiac fibroblast,CFB)增殖及Ⅰ型胶原合成的影响,探讨其抗心肌纤维化的作用机制。方法:差速贴壁法提取原代SD乳鼠CFB,采用3～4代CFB进行检测。以甲基噻唑基四唑(methyl thiazolyltetrazolium,MTT)法测定细胞数目,观察CFB增殖情况;收集细胞培养上清,以酶联免疫吸附测定法(enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA)检测Ⅰ型胶原的合成;提取细胞总mRNA,以逆转录聚合酶链式反应(reverse transcription-polymerase chain reaction,RT-PCR)半定量检测Ⅰ型胶原mRNA的表达情况。结果:(1)MTT结果显示,0.1μmol/LAngⅡ组CFB光密度(optical density,OD)值高于空白对照组(P<0.05)。0.1μmol/LAngⅡ+800μg/mLTMP组和0.1μmol/LAngⅡ+600μg/mLTMP组OD值均低于0.1μmol/LAngⅡ组,但仅0.1μmol/LAngⅡ+800μg/mLTMP组与之比较差异有统计学意义(P<0.05)。(2)0.1μmol/LAngⅡ组CFB上清液中Ⅰ型胶原含量高于空白对照组(P<0.01)。0.1μmol/LAngⅡ+800μg/mLTMP组CFB上清液中Ⅰ型胶原含量低于0.1μmol/LAngⅡ组(P<0.05)。(3)0.1μmol/LAngⅡ组Ⅰ型胶原mRNA表达高于空白对照组(P<0.05)。0.1μmol/LAngⅡ+800μg/mLTMP组Ⅰ型胶原mRNA表达低于0.1μmol/LAngⅡ组(P<0.05)。结论:川芎嗪可以抑制血管紧张素Ⅱ诱导的大鼠心肌成纤维细胞的增殖,减少Ⅰ型胶原的分泌与合成。
- 张冬梅秦英吕浠滢吴爱明朱陵群王硕仁姜良铎
- 关键词：川芎嗪心肌成纤维细胞
- 丹参酮Ⅱ_A对AngⅡ诱导的心肌成纤维细胞增殖及Ⅰ型胶原合成的影响被引量：24
- 2008年
- 目的:通过观察丹参酮ⅡA(TSN)对AngⅡ诱导的心肌成纤维细胞(CFs)增殖及Ⅰ型胶原合成的影响,探讨其抗心肌纤维化的作用机制。方法:差速贴壁法提取原代CFs,采用四氮唑盐(MTT)比色法测定细胞数目,ELISA法检测Ⅰ型胶原合成,RT-PCR法半定量检测Ⅰ胶原mRNA表达。结果:①AngⅡ组OD值高于空白对照组,两者比较有显著性差异(P<0.01);AngⅡ+TSN组OD值低于AngⅡ组,两者比较有显著性差异(P<0.01)。②AngⅡ组有促进心肌成纤维细胞分泌Ⅰ型胶原的作用,与空白对照组比较,有显著性差异(P<0.01);AngⅡ+TSN组Ⅰ型胶原含量低于AngⅡ组,两者比较,有显著性差异(P<0.01)。③AngⅡ组Ⅰ型胶原mRNA表达高于空白对照组,两者比较有显著性差异(P<0.05);AngⅡ+TSN组Ⅰ型胶原mRNA表达低于AngⅡ组,两者比较有显著性差异(P<0.05)。结论:AngⅡ可直接诱导CFs的增殖,促进其分泌Ⅰ型胶原,并能显著增加Ⅰ型胶原mRNA的表达;TSN对AngⅡ诱导的CFs增殖及Ⅰ型胶原分泌增加,及Ⅰ型胶原mRNA表达增强均有抑制作用。提示:TSN抗心肌纤维化作用的产生可能与丹参酮ⅡA抑制心脏局部的RAS系统有关。
- 张冬梅秦英牛福玲朱陵群王硕仁姜良铎
- 关键词：心肌成纤维细胞
- 川芎嗪对血管紧张素Ⅱ诱导的人α_1(I)胶原基因启动子活性的影响被引量：10
- 2005年
- 目的探讨血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)对人α1(Ⅰ)胶原基因启动子活性的调控作用和川芎嗪干预的影响环节。方法将2.5kb长度的人α1(I)胶原基因启动子片段与氯霉素乙酰基转移酶(CAT)“报告基因”组成的重组体pCOLH2.5,采用脂质体法转染至培养的大鼠心肌成纤维细胞,分别加入AngⅡ和川芎嗪,ELISA法测定CAT活性。结果AngⅡ可明显促进pCOLH2.5片段的启动活性,川芎嗪能抑制AngⅡ的促pCOLH2.5启动活性(P<0.05)。结论川芎嗪能在转录水平上阻断AngⅡ诱导的人α1(I)胶原基因启动子活性增加,从而抑制I型胶原的合成,阻滞和延缓心肌纤维化的发生发展。
- 张冬梅秦英杨君于海牛福玲朱陵群王硕仁姜良铎周春华
- 关键词：启动子胶原川芎嗪
