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国家高技术研究发展计划(2011AA10A402)
作品数:
2
被引量:2
H指数:1
相关作者:
张全启
王宏华
侯竹美
齐洁
王志刚
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相关机构:
中国海洋大学
青岛农业大学
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发文基金:
国家高技术研究发展计划
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中国海洋大学
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作者
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张全启
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王兴莲
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于海洋
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张正睿
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王志刚
1篇
齐洁
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侯竹美
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海洋湖沼通报
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2016
1篇
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病毒性出血性败血症病毒单链抗体的原核表达及其功能鉴定
被引量:1
2016年
为制备病毒性出血性败血症病毒(VHSV)单链抗体(single chain variable fragment antibody,ScFv)并鉴定其生物学功能,本研究提取抗VHSV单抗1G5的杂交瘤细胞株总RNA并反转录获得cDNA模板,通过PCR扩增VHSV抗体的轻链可变区(VL)和重链可变区(VH)编码序列,将其拼接成单链抗体Sc Fv基因后插入载体pET28a中,构建原核表达重组质粒并在大肠杆菌中诱导表达。结果表明,单链抗体主要以可溶性形式表达,分子量约28 ku,能特异性识别VHSV病毒的G蛋白并对VHSV病毒具有体外中和活性,其对VHSV病毒的G蛋白亲和力(KD)达到1.4×10^(–8) M。单链抗体ScFv的制备为进一步研究VHSV的治疗性抗体、快速诊断试剂奠定了基础。
王宏华
侯竹美
张全启
于海洋
王志刚
齐洁
王旭波
关键词:
单链抗体
ISSR标记在牙鲆(♀)×圆斑星鲽(♂)杂交子代中的分离方式
被引量:1
2014年
以牙鲆(Paralichthys olivaceus)为母本,圆斑星鲽(Verasper variegatus)为父本进行科间远缘杂交,利用ISSR标记对2个家系杂交子代进行扩增,分析了双亲位点在杂交子代中的传递分离方式以及双亲与杂交子代的遗传距离。结果表明:6个引物在0401#和0402#2个家系中扩增的位点数为136和144个,其中多态性位点数量为90和91个,分别占66.18%和63.19%,2个家系间没有明显差异。2个家系中双亲与杂交子代的共有位点数量分别达34.56%和38.89%,表明遗传物质传递给了杂交子代,证明了科间远缘杂交的成功。2个家系中符合孟德尔分离规律的位点分别占32.35%和22.92%,出现分离但偏孟德尔分离位点占23.53%和27.78%,2个家系中均观察到部分非亲位点。在这2个家系中,杂交子代与母本牙鲆的遗传距离分剐为0.2941、0.3182,而与父本星鲽的遗传距离分剐为0.3645、0.3750,表明杂交子代在遗传上偏向母本牙鲆。该研究结果为进一步利用杂交群体同时构建牙鲆和星鲽的遗传连锁图谱提供了重要参考。
张正睿
王兴莲
张全启
关键词:
牙鲆
圆斑星鲽
杂交
ISSR标记
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