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人CD8＋CD28一抑制性T淋巴细胞的体外扩增及其抗原特异性调节作用: 2011年; 目的探讨在体外大量扩增CD8＋CD28一抑制性T淋巴细胞（Ts细胞）的方法，并检验其免疫调节作用。方法分离健康志愿者全血中CD8＋T淋巴细胞，在含不同细胞因子和异体抗原提呈细胞（APC）的培养条件下进行体外扩增。应用流式细胞术对扩增过程中CD28一细胞亚群的比例进行监测。分为3组进行混合淋巴细胞培养，反应细胞均为CD4’T淋巴细胞：B-Am组以来源于原致敏供者的APC作为刺激细胞，I-APC组以HLA-A、B、DR全错配的无关供者的APC作为刺激细胞，Dynabeads组以包被有抗CD3和CD28单克隆抗体的免疫微球Dynabeads作为刺激细胞；扩增后的Ts细胞作为第三方调节细胞加入混合淋巴细胞培养中，测定其对CIN’T淋巴细胞增殖的抑制作用。结果在含白细胞介素2（IL-2）＋IL-7＋IL-15的培养条件下，CD8＋T淋巴细胞培养后CD8＋CD28T淋巴细胞亚群的比例最高（P〈0．05）。BAPc组不加入Ts细胞时，增殖的CD4＋T淋巴细胞比例为66．7％，当加入的Ts细胞与反应细胞的比例分别为0．5：1、0．1：1和0．02：1时，增殖的CD4＋T淋巴细胞比例分别为16．5％、34．1％和62．6％。Ts细胞对CIN’T淋巴细胞的增殖有明显抑制作用，而在I—Apc组和Dynabeads组中，此抑制作用不明显。结论应用含IL-2＋IL_7＋IL_15的培养条件联合异体APC刺激可以在体外大量扩增Ts细胞，扩增所得Ts细胞在体外对供者CD4＋T淋巴细胞的增殖有明显抗原特异性抑制作用。; 余玉明刘艳君邓文锋于立新; 关键词：细胞培养技术 CD8阳性T淋巴细胞

肾移植患者围手术期To11样受体4与CD80测定及其意义: 2009年; 目的研究肾移植患者围手术期外周血单核细胞To11样受体4（TLR4）及CD80的变化规律及其临床意义。方法初次肾移植受者32例，术前群体反应抗体检测均阴性。流式细胞术测定受者肾移植术前及术后第1、4、7、14、21、28、35天外周血单核细胞TLR4、CD80表达的百分率；根据肾移植术后2周内发生排斥与否将患者分为排斥组（7例）和无排斥组（25例）。10例PRA阴性健康成年志愿者标本为正常对照组。根据临床表现、实验室检查、移植肾多普勒超声检查、必要时行移植肾穿刺活检等综合判断有无急性排斥反应。应用SPSS13．0统计软件处理数据。结果排斥组肾移植术前外周血单核细胞TLR4、CD80表达值为（8．03±0．84）％、（0．85±0．31）%，无排斥组为（6．14±0．85）％、（0．84±0．39）％，正常对照组为（6．37±0．56）％、（0．85±0．35）％；排斥组TLR4表达显著高于无排斥组和正常对照组（P〈O．01），无排斥组与正常对照组比较差异无统计学意义（P=0．448）；3组间CD80表达差异无统计学意义（P=0．995）。患者单核细胞TLR4、CD80表达在移植术后第4天开始出现升高趋势，排斥组为（16．50±1．02）％、（7．82±1．66）％，无排斥组为（11．60±0．98）％、（2．26±0．96）%，较术前均显著升高（P〈0．01）；第7天左右达高峰，排斥组为（36．40±4．86）％、（9．53±1．97）％，无排斥组为（22．70±3．45）％、（1．87±0．72）%；随肾功能恢复逐渐回落，排斥组于第35天降至（7．10±0．82）％、（0．87±0．57）％，无排斥组第21天降至（7．20±0．76）％、（0．81±0．37）％；与无排斥组比较，排斥组TLR4、CD80表达峰值较高（P〈0．01），且持续时间较长。结论TLR4高表达增加肾移植术后急性排斥反应发生的风险；TLR4、CD80在肾移植术后早期上调，参与急性排斥反应的发生。; 于立新李忠海余玉明; 关键词：肾移植移植物排斥单核细胞

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广东省自然科学基金(07300389)

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