国家自然科学基金(30870934)
- 作品数：11 被引量：15H指数：2
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- 相关机构：首都师范大学上饶师范学院更多>>
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- 相关领域：生物学医药卫生农业科学更多>>
- 壬基酚和镉离子在体外对小鼠精子顶体反应的影响被引量：3
- 2011年
- 目的：研究壬基酚和镉离子在体外对小鼠精子顶体反应（AR）的影响。方法：从小鼠的输精管获得精子，体外培养使精子获能，加30μmol／L的A23187诱导精子顶体反应，然后使用不同浓度的壬基酚（10、20、30、60、100μmol／L），或者镉离子（500、2500、5000μmol／L）处理，对照组使用相应的载体溶剂处理。用FITC—PSA荧光染色法分析精子顶体反应。结果：当壬基酚浓度〈30μmol／L时，小鼠精子顶体反应率与对照组比较没有显著差异（P〉0．05），而当壬基酚浓度〉60μmol／L时能够显著地抑制小鼠精子顶体反应发生率（P〈0．01），并且观察到精子存活率随着壬基酚浓度增加而降低。与壬基酚作用不同，用镉离子对小鼠精子进行处理，在所选浓度内（500～5000μmol／L）均对精子顶体反应无显著影响（P〉0．05），且精子存活率与镉离子浓度变化无关。结论：壬基酚与镉离子对小鼠精子发生的作用是通过不同的途径来实现的，前者可以直接抑制顶体反应，而后者则与精子顶体反应无关。
- 邵佇雄蒋洪涛梁芳朱宝长
- 关键词：壬基酚镉离子体外精子顶体反应小鼠
- 睾丸间质细胞在小鼠生精恢复过程中的作用被引量：4
- 2015年
- 研究睾丸间质细胞对小鼠生精恢复过程的作用,可以为深入理解睾丸精原干细胞与其微环境(体)细胞间的相互关系提供实验证据。选取8周龄健康C57近交系成年雄性小鼠60只,腹腔注射22 mg/kg白消安建立小鼠精子发生受阻模型,随机分成1,2-二甲磺酸乙烷(ethane 1,2-dimethanesulphonate,EDS)处理组、氟他胺处理组和对照组,每组20只,3 d后分别给予EDS腹腔注射(100 mg/kg)、氟他胺埋植,对照组仅注射溶剂、埋植空管,分别在处理后的1个月内每周采样,Real-time RT-PCR检测CSF1、Gdnf、PLZF和Nanog m RNA表达水平,Gdnf蛋白水平表达,并在4周时进行睾丸组织HE染色,观察组织学变化并对相关指标进行量化分析。结果表明,小鼠睾丸间质细胞去除及雄激素受体阻断均能促进睾丸损伤后的生精恢复过程,但是,受体阻断的效果更强,说明间质细胞除了通过雄激素发挥作用外还直接对生精恢复起着一定的促进作用,这种促进作用可能是通过分泌CSF1等细胞因子来实现的。
- 袁丽芳安娜王善林关淑鸾王峰李宗悦朱宝长
- 关键词：间质细胞小鼠睾丸
- 精原干细胞的增殖分化及其在畜牧业上的应用被引量：2
- 2009年
- 精原干细胞(Spermatogonial stem cells,SSCs)是指位于睾丸曲细精管基膜上,既能自我更新以维持自身群体数量恒定,又能定向分化形成精母细胞,最终形成精子的一类成体干细胞。鉴于SSCs独具的生物学特性,其在干细胞生物学、医学、畜牧业等领域具有重要价值。通过其建立转基因动物模型,对研究精子的发生机制、重建不育个体的生精功能等有着重要意义。笔者对哺乳动物SSCs的形态特性,增殖分化特性及其调控因素,以及SSCs在畜牧业中的应用进行了综述。
- 孙可朱宝长
- 关键词：精原干细胞增殖分化
- RNA干涉的临床前实验研究进展被引量：1
- 2009年
- RNA干涉(RNA interference,RNAi)是一种非常保守的细胞现象,在基础研究和疾病治疗方面具有重大的应用前景。尤其引人注目的是,新的RNAi方法学与已建立的转基因策略相结合,有效地将组织特异性RNAi导入到患者体内,有望治疗人类疾病。本文综述了RNAi的机制与在其临床前的实验研究,简要介绍了RNAi的新用途,讨论了RNAi基因治疗存在的问题,展望了RNAi基因治疗的应用前景。
- 王俊霞郑金枝常灏朱宝长
- 关键词：RNA干涉病毒癌症
- 在单细胞水平建立原位PCR基因鉴别技术平台——以精子基因型鉴别为例被引量：2
- 2012年
- 目的精子发生是一个包括有丝分裂和减数分裂的精细调控过程,这一过程是从精原干细胞开始在雄性睾丸的曲细精管中完成的,由哺乳动物雌雄性比例接近1∶1这一现象可以推知:受精时带X基因的精子和带Y基因的精子比率应该是1∶1,但事实上精子发生的过程中,分化出来的X、Y精子的比例是否也为1∶1并不清楚,因为精子发生过程中并不是所有细胞都能最终形成精子,然而要研究雌雄出生比率就需要先研究精子本身是否严格地按照1∶1形成,因此本实验通过建立快速可靠原位PCR技术平台为进一步研究精子发生的调控过程提供支持。步骤用HSL基因优化荧光原位PCR实验方案,包括蛋白酶K作用时间和浓度,原位PCR前先对精子进行解聚,再用SRY基因对精子进行原位PCR鉴定。结果在荧光显微镜下可清楚地看到精子头部的荧光信号,头部有绿色荧光信号的精子为带有SRY基因的Y染色体精子(Y精子),实验检测到昆明小鼠精子共493个,有信号的共273个,X∶Y=55.37%,经卡方检验,X精子与Y精子的实验结果趋近于1∶1。结论可利用荧光原位PCR技术在单细胞水平快速鉴定精子"性别",理论上可用于任何细胞的任何基因的鉴定。
- 朱璇邵伫雄朱宝长
- 关键词：SRY基因精子
- 激素敏感脂酶(HSL)基因敲除小鼠认知行为的研究被引量：1
- 2013年
- 目的:评估HSL基因敲除小鼠的学习记忆功能.方法:采用经典的Morris水迷宫实验,测试三种基因型小鼠的认知行为变化.结果:三种基因型小鼠的潜伏期几乎都逐渐缩短,雄性正常小鼠的潜伏期在1～2天,明显地短于HSL敲除小鼠(P<0.01);雌性正常小鼠的潜伏期在第3～5天,明显地短于HSL敲除小鼠(P<0.01),随后几天都无显著差异.第8天撤去平台,小鼠跨越原平台位置的次数无显著差异.结论:HSL敲除的小鼠都存在明显的认知水平功能障碍,雄性小鼠在前期差异显著,雌性小鼠在中期差异显著,但给予适当的学习训练后都能达到正常小鼠的认知水平.
- 万慧芳游兰兰安娜李宗悦袁丽芳朱宝长
- 关键词：水迷宫实验潜伏期
- 哺乳动物睾丸细胞间连接的动态调控被引量：2
- 2011年
- 精子的发生过程是一个受多种因素(包括由细胞间连接的动态变化所形成的微环境等)精确调控的过程。细胞因子及睾酮以自分泌、旁分泌的形式对该微环境中的细胞连接水平如:生殖细胞穿越血睾屏障(the blood-testis barrier,BTB)的开闭机制等进行调控,从而对精子的发生起到重要调节作用。本文讨论了各种因素对细胞间连接的自分泌、旁分泌调控方式的影响,并简要介绍了"近腔细胞外质特化(apical ectoplasmic specialization,近腔ES)-BTB-半桥粒/基底膜"功能调控轴模型在生精细胞穿越BTB及精子释放等生精过程中的作用,为人们进一步认识精子发生过程中细胞间联系的功能及其调控提供了新的视角。
- 蒋洪涛梁芳邵佇雄朱宝长
- 关键词：细胞因子睾酮自分泌旁分泌
- BAY及DMSO在体外对小鼠精子顶体反应的影响
- 2013年
- 目的探究BAY(激素敏感脂酶抑制剂)及DMSO(二甲基亚砜)对小鼠精子顶体反应(AR)的直接影响。方法分别通过5个和6个不同的浓度梯度的BAY及DMSO在体外探究其对小鼠精子AR的影响,在不同孵育时间段采用FITC-PSA和考马斯亮蓝染色法对小鼠精子的顶体反应进行鉴定。结果在所选浓度范围内BAY未能直接影响精子的顶体反应及存活率(P>0.05),而DMSO在一定浓度和时间内可直接影响精子顶体反应及精子存活率。结论 DMSO和BAY对小鼠精子发生的作用是通过不同途径来实现的,前者可直接影响精子顶体反应和精子的存活率,而后者则与顶体反应及存活率无关。提示在AR的研究中使用DMSO时需控制好作用浓度及作用时间。
- 游兰兰万慧芳朱宝长
- 关键词：DMSO顶体反应考马斯亮蓝
- Niche调控精原干细胞命运被引量：1
- 2014年
- 正常的精子发生是一个由多种因子参与的精密、有序调控的生理过程。精原干细胞的自我更新维持了精原干细胞本身数量的稳定,而其分化成为精原祖细胞的节奏保障了形成精子的规模。睾丸微环境(niche)在精原干细胞自我更新和分化过程中起着举足轻重的作用。该文简要描述了精子发生过程中精原干细胞及其微环境形成过程中所涉及的主要细胞因子及其调控机制,并探讨了该研究过程中所遇到的问题,最后展望了相关基础研究在临床医疗和科学研究领域中的应用前景。
- 王峰王善林陈征安娜袁丽芳李宗悦朱宝长
- 关键词：微环境精原干细胞精子发生细胞因子
- 探索Sertoli细胞对去除精原细胞的动态反应
- 2014年
- 目的探索Sertoli细胞对去除小鼠精原细胞后睾丸的动态反应。方法采用15、30和44 mg/kg的白消安腹腔注射法建立不同程度去除精原细胞的动物模型,处理后5 d和28 d时对睾丸进行组织学检测,评价精子发生状态,并运用实时定量荧光PCR技术检测这两个时期睾丸GDNF、PLZF、Nanog和GFRα1基因mRNA的表达量。结果在白消安处理后第5天,GDNF出现显著升高,且呈剂量依赖趋势,而PLZF与GFRɑ1并无显著变化,睾丸组织学观察亦无明显变化。在白消安处理后28 d时,GDNF、PLZF、Nanog、GFRɑ1基因mRNA相对表达量均出现大幅度的升高,睾丸组织学切片观察显示随着给药剂量的增加,精子发生受到的损伤愈加严重。结论 Sertoli细胞早在白消安处理后第5天就对精原细胞的变化发生了反应,Sertoli细胞分泌GDNF的能力发生代偿性增加,进而刺激精原干细胞自我更新速度加快,体现在Nanog和PLZF水平提高,从而实现精子发生的重建。
- 安娜袁丽芳王善林李宗悦王峰朱宝长
- 关键词：白消安精原干细胞SERTOLI细胞睾丸小鼠
