国家自然科学基金(81260013)
- 作品数：8 被引量：36H指数：3
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- 相关机构：广西医科大学第一附属医院广西医科大学附属肿瘤医院更多>>
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- CD8^+T细胞在大鼠慢性支气管炎中表达及意义被引量：9
- 2015年
- 目的 CD8+T细胞在慢性阻塞性肺疾病患者气道中增多且持续存在,观察CD8+T细胞在烟草烟雾暴露及脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)诱导大鼠慢性支气管炎的膜性支气管表达以探讨CD8+T细胞在慢性支气管炎中的作用。方法18只健康雄性Wistar大鼠按随机数字表法分为3组:假吸烟组、慢性支气管炎组、N-乙酰半胱氨酸(acetylcysteine,NAC)组,假吸烟组经气道注入等渗盐水,慢性支气管炎大鼠模型采用2次气管内注入LPS及烟熏4周法制备,NAC组在慢性支气管炎组基础上予NAC(200 mg/kg)灌胃干预。各组大鼠取肺组织HE染色观察膜性支气管的病理形态并进行炎症病变病理评分,核因子-κB(nuclear factorκB,NF-κB)、Ⅰ类主要相容性复合体(major histocompatibility complex class I,MHC I)、CD8+T细胞和血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)免疫组化采用免疫组化SP法染色检测。结果假吸烟组、NAC组病理积分[1.17±2.40、4.66±2.25]均较慢性支气管炎组(10.83±3.31)明显降低(P<0.05),假吸烟组与NAC组病理积分差异无统计学意义(P>0.05)。慢性支气管炎组NF-κB、MHC I、CD8+T细胞、VEGF表达的中位数(4.84、2.48、5.35、5.02)较假吸烟组(1.18、1.25、1.33、1.18)、NAC组(2.18、1.46、2.35、2.02)明显升高(P<0.05),而假吸烟组与NAC组的差异无统计学意义(P>0.05)。慢性支气管炎组NF-κB、MHC I与CD8+T细胞呈正相关(r=0.670,P<0.01;r=0.701,P<0.01),CD8+T细胞与VEGF、小气道病理积分呈正相关(r=0.689,r=0.782)。结论 NAC可能通过抑制小气道上皮组织生成NF-κB、MHC I来减轻CD8+T细胞和VEGF的表达从而减轻小气道炎症。
- 刘积锋钟小宁何志义牙蕾蕾覃向林张建全陈罡
- 关键词：CD8+T细胞血管内皮生长因子慢性支气管炎
- 烟草烟雾提取物促进髓样树突状细胞共刺激分子的表达被引量：3
- 2014年
- 目的通过体外实验研究烟草烟雾提取物(CSE)对小鼠髓样树突状细胞(mDC)成熟的影响及可能的机制。方法小鼠骨髓来源的单个核细胞加入粒-单集落刺激因子(GM-CSF)、白细胞介素-4(IL-4)和含100 mL/L胎牛血清的RPMI1640培养液诱导出可供实验用的高纯度的未成熟DC(iDC),分空白对照组和CSE刺激组;CSE刺激组按15 mL/L的终浓度加入CSE,两组继续培养24 h,流式细胞检测技术检测mDC的共刺激分子CD40、CD80、CD86和MHC-Ⅱ的表达。结果空白对照组的mDC低表达CD40、CD80、CD86和MHC-Ⅱ;CSE刺激后mDC表达CD40、CD80和MHC-Ⅱ比空白对照组明显增加,差异有统计学意义(P<0.05)。结论烟草烟雾提取物促进小鼠骨髓来源的mDC的CD40、CD80和MHC-Ⅱ的表达。
- 牙蕾蕾刘积锋何志义白晶钟小宁
- 关键词：树突状细胞共刺激分子
- 红霉素可抑制弹性蛋白肽诱导的CD4^+T细胞向Th17细胞分化被引量：2
- 2015年
- 目的探讨红霉素对弹性蛋白肽暴露下CD4+T细胞向Th17细胞分化的影响。方法从小鼠脾脏经免疫磁珠分选出CD4+T细胞,随机分为空白对照组、弹性蛋白肽组和弹性蛋白肽加红霉素干预组。弹性蛋白肽组和弹性蛋白肽联合红霉素处理组加入终浓度30μg/mL的弹性蛋白肽,弹性蛋白肽联合红霉素处理组在弹性蛋白肽处理的基础上,另外加入100μg/mL的红霉素。3组细胞在无血清培养液培养24h,用流式细胞术检测Th17的百分比,荧光定量PCR检测维甲酸相关孤儿核受体γt(RORγt)mRNA表达,Western blot法检测核因子κB(p65)[NF-κB(p65)]及信号转导子和转录激活子3(STAT3)蛋白相对含量。结果弹性蛋白肽组CD4+IL-17+细胞的百分比为(11.32±2.34)%、对照组为(5.21±1.36)%;qRT-PCR发现RORγt mRNA表达比对照组明显增加,Western blot法检测发现NF-κB(p65)和STAT3蛋白表达比对照组增强。与弹性蛋白肽组比较,弹性蛋白肽联合红霉素处理组的CD4+IL-17+细胞的百分比、RORγt mRNA表达、NF-κB(p65)和STAT3蛋白表达明显减少。结论红霉素可抑制弹性蛋白肽诱导CD4+T细胞向Th17分化。
- 刘积锋钟小宁何志义覃向林牙蕾蕾张建全
- 关键词：红霉素CD4^+T细胞TH17细胞
- 红霉素对小鼠髓样树突状细胞表面免疫分子表达的影响
- 2014年
- 目的探讨红霉素体外对小鼠骨髓来源树突状细胞(DCs)的表面分子Ⅱ类组织相容性抗原(MHCⅡ)和共刺激分子表达的影响。方法用重组小鼠粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子(GM-CSF)和重组小鼠白细胞介素-4(IL-4)联合诱导培养小鼠骨髓来源的单个核细胞分化成未成熟DCs后随机分为对照组(A)和红霉素干预组(B),2组均予肿瘤坏死因子α(TNF-α)刺激,红霉素干预组同时按100μg/ml的终质量浓度加入红霉素干预,2组再培养24 h后用流式细胞仪检测技术检测DCs的MHCⅡ和共刺激分子表达。结果红霉素干预组的DCs表面分子MHCⅡ和共刺激分子CD40、CD80、CD86的表达水平明显低于对照组(P<0.05)。结论红霉素可下调小鼠骨髓来源DCs的MHCⅡ和共刺激分子CD40、CD80、CD86的表达。
- 覃向林钟小宁刘积锋何志义
- 关键词：红霉素树突状细胞表面分子共刺激分子
- 肺功能正常吸烟者和慢性阻塞性肺疾病患者肺动脉炎症和小气道炎症的相关性研究被引量：16
- 2014年
- 目的 研究肺功能正常吸烟者和慢性阻塞性肺疾病（慢阻肺）患者肺腺泡动脉炎症与小气道炎症的相关性.方法 选取广西医科大学第一附属医院心胸外科因周围型肺癌行肺叶切除术的33例患者,其中男30例,女3例,年龄（61±9）岁,分为A组（肺功能正常不吸烟组,10例）、B组（肺功能正常吸烟组,13例）、C组（吸烟慢阻肺稳定期组,10例）,取手术切除的远离肺癌病灶的正常肺组织,HE和维多利亚蓝＋范吉逊染色检测各组肺腺泡肌型动脉（MA）及小气道病理形态改变,测量MA管壁厚度并计算小气道病理积分,使用免疫组织化学方法检测淋巴细胞在MA和小气道的浸润水平,并分析MA炎症和小气道炎症的相关性.结果 3组患者MA管壁厚度分别为（119±11）、（139±25）和（172 ±28）μm,小气道病理积分分别为（49±10）、（101±34）和（163 ±36）分,B组和C组均明显高于A组,且C组明显高于B组（均P ＜0.05）.B组和C组CD3＋总T细胞、CD8＋ T细胞在MA内膜、中膜、外膜及小气道上皮层、固有层、外膜层浸润较A组均增加,以MA外膜及小气道外膜层CD8＋T细胞浸润为明显（均P＜0.05）;C组较A组CD4T细胞在小气道上皮层、固有层、外膜层表达也增高（均P＜0.05）,气道壁全层CD4/CD8＋降低（P＜0.01）,而CD4＋T细胞在3组MA各层比较差异均无统计学意义（均P ＞0.05）;B淋巴细胞在3组MA及小气道各层比较差异均无统计学意义（均P ＞0.05）.MA管壁CD3＋总T细胞、CD8＋T细胞浸润程度与小气道病理总积分呈正相关（r值分别为0.431、0.633,均P＜0.05）;CD3＋总T细胞、CD8＋T细胞在MA管壁浸润程度与其在小气道壁的浸润程度呈正相关（r值分别为0.655、0.725,均P＜0.01）;MA管壁及小气道壁CD8＋T细胞浸润程度与MA管壁厚度呈正相关（r值分别为0.589、0.556,均P＜0.01）.结论 肺功能正常吸烟者和慢阻肺患者肺动脉炎症和小气道炎症�
- 老启芳曾小良钟小宁张建全何志义
- 关键词：吸烟炎症
- CD40对烟草烟雾暴露肺气肿小鼠肺部CD8＋T细胞毒性功能的影响被引量：3
- 2016年
- 目的探讨CD40对烟草烟雾暴露肺气肿小鼠肺部CD8^＋T细胞毒性功能的影响。方法40只雄性C57小鼠按随机数字表法随机分为CD40^＋/＋对照组、CD40^＋/＋烟熏组、CD40^-/-对照组、CD40^-/-烟熏组4组，烟熏组采用烟草烟雾暴露24周建立小鼠肺气肿模型。各组肺组织分别采用HE染色观察肺部病理改变并计算肺泡平均内衬间隔；免疫组织化学法检测CD8^＋T细胞和穿孔素^＋、颗粒酶B^＋细胞百分比；实时荧光定量PCR（RT—PCR）检测穿孔素、颗粒酶B、白细胞介素（IL）-27mRNA表达；酶联免疫吸附（ELISA）法检测IL-27细胞因子水平。结果CD40^＋/＋烟熏组肺组织明显破坏，可见大量炎症细胞浸润；CD40^-/-烟熏组肺组织破坏及炎症细胞浸润程度较CD40^＋/＋烟熏组轻。CD40^＋/＋烟熏组肺泡平均内衬间隔显著高于CD40^＋/＋对照组、CD40^-/-对照组和CD40^-/-烟熏组[（37．2±3．6）比（24．0±3．4）、（22．5±2．4）、（29．9±1．7）μm]（均P〈0．05）；CD40。一烟熏组高于CINO“’对照组及CD40。一对照组（均P〈0．05）。CD40“’烟熏组CD8^＋、穿孔素^-、颗粒酶B^＋细胞百分比[（16．3±2．3）％、（11．4±2．1）％、（10．7±1．9）％]均显著高于CD40^＋/＋对照组[（8．3±1．6）％、（5．1±1．2）％、（4．6±1．0）％]、CD40^-/-对照组[（6．4±1．5）％、（4．3±1．0）％、（4．2±1．0）％]、CI40^-/-烟熏组[（8．6±1．7）％、（5．6±1．3）％、（5．5±1．3）％]（均P〈0．05）。CD40^＋/＋烟熏组穿孔素、颗粒酶B、IL-27mRNA相对表达量[（20．3士7．3）、（18．3±12．3）、（2．24-0．7）]均显著高于CIMO^＋/＋对照组[（9．4士4．8）、（10．6±3．8）、（1．3±0．6）]、CD40^-/-对照组[（8．1±3．1）、（7．7±3．5）、（1．1±0．5）]、CD40^-/-烟熏组[（12．94-6．2）、（10．4±4．6）、（1．5±0．4）]（均P〈0．05）。CD^�
- 王琴邓婷婷邝良鉴邱诗林梁毅钟小宁何志义张建全白晶李梅华
- 关键词：CD8阳性T淋巴细胞肺气肿小鼠
- 香烟烟雾提取物抑制树突状细胞诱导CD4^+T细胞分化为CD4^+CD25^+Foxp3^+调节性T细胞被引量：2
- 2016年
- 目的探讨香烟烟雾提取物(CSE)暴露及抑制CD40-CD40L路径对小鼠髓源性树突状细胞(BMDC)诱导CD4^+T细胞分化为CD4^+CD25^+Foxp3^+调节性T细胞(Treg)的影响。方法使用40 ng/m L重组小鼠粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子(rm GM-CSF)和10 ng/m L重组小鼠白细胞介素4(rm IL-4)联合诱导无特定病原体级健康雄性BALB/c小鼠骨髓来源的单个核细胞分化为树突状细胞(DC),流式细胞术检测小鼠BMDC表面CD40分子的表达,再采用免疫磁珠分选的方法从BALB/c小鼠脾脏细胞分离出CD4^+T细胞。将所培养出的小鼠BMDC与正常对照组小鼠脾脏细胞分选的CD4^+T细胞共培养,加入CSE及拮抗性CD40抗体,作用24 h;流式细胞术观察各组细胞CD4^+CD25^+Foxp3^+Treg的变化,液相芯片技术检测细胞上清液白细胞介素10(IL-10)、IL-6的水平。结果 BMDC与CD4^+T淋巴细胞共培养可以促进CD4^+CD25^+Foxp3^+Treg分化,经CSE刺激后,流式细胞术检测显示小鼠BMDC与CD4^+T细胞共培养后分化的CD4^+CD25^+Foxp3^+Treg数量降低,细胞上清液IL-10降低、IL-6的水平升高;而加入拮抗性CD40抗体细胞共培养组CD4^+CD25^+Foxp3^+Treg增加,液相芯片检测细胞上清液IL-10上升、IL-6的水平下降。结论 CSE减少CD4^+CD25^+Foxp3^+Treg数量,体外使用拮抗性抗CD40抗体阻断CD40-CD40L通路可以促进CD4^+T细胞分化为CD4^+CD25^+Foxp3^+Treg。
- 梁毅周广张龙举刘积锋钟小宁
- 关键词：香烟烟雾提取物树突状细胞
- CD40对烟草烟雾暴露小鼠肺组织Foxp3＋Treg细胞的影响被引量：2
- 2016年
- 目的观察烟草烟雾暴露下CD40对小鼠肺内叉头／翼状螺旋转录因子阳性调节性T细胞（Foxp3＋Treg）的影响。方法野生型与CD40-/-C57BL／6小鼠各20只，分别按随机数字表法分为两组，即：野生型对照组、野生型烟熏组与CD40-/-对照组、CD40-/-烟熏组，每组各10只。烟熏组香烟烟雾暴露24周建立小鼠肺气肿模型，HE染色观察小鼠肺组织的改变，计算肺泡平均内衬间隔（MLI）。免疫组化法观察肺组织中Foxp3＋细胞百分数，实时定量PCR与Western印迹法检测肺组织中Foxp3mRNA与蛋白的表达。酶联免疫吸附（ELISA）法检测各组小鼠肺组织中白细胞介素（IL）-10，IL-35水平。结果CD40-/-烟熏组MLI显著低于野生型烟熏组[（30．0±1．7）比（37．3±3．7）μm]，高于CD40-/-对照组[（23．2±2．5）±m]，野生型烟熏组显著高于野生型对照组[（22．2±1．7）±m]（均P〈0．05）。CD40-/-烟熏组肺组织中Foxp3＋细胞数量均显著高于野生型烟熏组和CD40-/-对照组[（16．89±0．75）％比（9．65±0．74）％和（13．58±0．51）％]，野生型烟熏组显著低于野生型对照组[（12．13±0．81）％]（均P〈0．05）。CD40-/-烟熏组肺组织中Foxp3的mRNA与蛋白表达量均显著高于野生型烟熏组和CD40-/-对照组，野生型烟熏组显著低于野生型对照组（均P〈0．05）。CD40-/-烟熏组肺组织匀浆中IL-10水平均显著高于野生型烟熏组和CD40-/-对照组[（231±25）比（80±31）和（183±29）ng／L]，野生型烟熏组显著低于野生型对照组[（192±37）ng／L]（均P〈0．05）。CD40-/-烟熏组肺组织匀浆中IL．35水平均显著高于CD40。一对照组、野生型对照组、野生型烟熏组[（2084-29）比（118±29）、（148±36）、（137±37）ng／L]（均P〈0．05）。结论敲除CD40基因可促进烟草烟雾暴露小鼠肺内Treg细胞分化，阻断CD40-/-CD40配体通路可能有助于改善烟草烟雾暴露所致的�
- 邓婷婷钟小宁王琴邝良鉴邱诗林梁毅何志义张建全白晶
- 关键词：肺气肿小鼠
