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来氟米特对被动型Heymann肾炎大鼠肾组织WT-1表达的影响被引量：14: 2007年; 目的通过被动型Heymann肾炎(PHN)大鼠模型,观察来氟米特对肾组织Wilms瘤抑癌因子(WT-1)表达及蛋白尿的影响。方法Wistar大鼠随机分为PHN组、来氟米特组和对照组。尾静脉注射抗FX1A血清,建立PHN模型。于实验第4、8、12周末,BCA法检测24h尿蛋白含量,光镜、电镜观察肾组织病变,WesternBlot检测肾组织WT-1蛋白表达。结果与对照组比较,PHN组从第4周末起,来氟米特组从第8周末起,24h尿蛋白均增多(P<0.01);来氟米特组24h尿蛋白均低于同时间点的PHN组(P<0.01)。光镜、电镜检查来氟米特组肾脏病变程度轻于PHN组。第4周末PHN组和来氟米特组WT-1表达均明显低于对照组(P<0.01);PHN组WT-1表达渐减少,来氟米特组WT-1表达渐增多;12周末来氟米特组WT-1表达多于PHN组(P<0.01),但仍低于对照组。结论来氟米特可能是通过上调足细胞WT-1表达,维持足细胞功能,对PHN起到治疗作用。; 何雪晴邢昌赢庄凌郑东辉赵秀芬钱军; 关键词：来氟米特 HEYMANN肾炎

γ-干扰素和脂多糖刺激系膜细胞中诱导型一氧化氮合酶的表达被引量：1: 2006年; 目的观察γ-干扰素和脂多糖对原代培养的系膜细胞产生一氧化氮的影响。方法培养小鼠原代系膜细胞,分别加入γ-干扰素和/或脂多糖刺激,24h后应用实时荧光定量PCR方法,测定诱导型一氧化氮合酶(iNOS)mRNA水平的表达变化。结果γ-干扰素和/或脂多糖处理系膜细胞后,iNOSmRNA水平的表达增多。结论γ-干扰素和/或脂多糖能够上调系膜细胞中iNOS的表达,可能在肾脏疾病中起着一定的作用。; 于波邢昌赢管又飞; 关键词：一氧化氮合酶 Γ-干扰素脂多糖肾小球系膜细胞

来氟米特对血管紧张素Ⅱ诱导的大鼠足细胞Nephrin表达的影响被引量：2: 2009年; 目的观察来氟米特对血管紧张素Ⅱ诱导的大鼠足细胞相关蛋白nephrin表达的影响及机制。方法体外培养大鼠足细胞,间接免疫荧光法鉴定nephrin、WT-1表达阳性的细胞为足细胞,建立AngⅡ足细胞损伤,RT-PCR法检测来氟米特治疗后nephrin mRNA表达变化。结果Nephrin沿胞膜、细胞骨架、胞核分布,WT-1位于细胞核,ANGⅡ刺激足细胞后nephrin表达呈剂量及时间依赖性降低,来氟米特纠正这一下调作用,呈剂量依赖性。结论AngⅡ下调大鼠足细胞nephrin表达导致足细胞损害,来氟米特阻断这一损害。; 高雪艳高雪艳邢昌赢孙彬赵秀芬; 关键词：足细胞来氟米特 NEPHRIN

来氟米特对大鼠Masugi肾炎的治疗作用被引量：5: 2008年; 目的探讨来氟米特对大鼠抗肾小球基底膜肾炎(Masugi肾炎)的治疗作用及其机制。方法SD大鼠尾静脉注射兔抗大鼠Masugi肾炎抗血清,建立Masugi肾炎模型;用BCA法测量24h尿蛋白变化,光镜、电镜观察肾脏病理改变,免疫荧光法检测IgG变化,并用半定量Western blot的方法观察Wilms瘤抑癌因子(WT-1)蛋白表达水平。结果成功复制大鼠Masugi肾炎模型,来氟米特能减轻Masugi肾炎大鼠蛋白尿、肾脏病变程度,增加病变大鼠足细胞WT-1蛋白水平的表达。结论来氟米特对Masugi肾炎有一定治疗作用,可能机制是通过增加病变大鼠足细胞WT-1蛋白水平表达及减少免疫复合物沉积实现。; 濮雪华邢昌赢朱璇赵秀芬钱军; 关键词：来氟米特肾小球基底膜 MASUGI肾炎

大鼠糖皮质激素受体基因腺病毒载体的构建及在肾系膜细胞中的表达被引量：1: 2008年; 目的利用AdEasy系统构建大鼠糖皮质激素受体(GR)基因重组腺病毒载体,转染大鼠肾小球系膜细胞(GMC),并通过Western Blot法检测GR蛋白的表达。方法将质粒pcDNA1 Neo-Rat GR扩增、凝胶回收获得的Rat GR cDNA双酶切片段,插入腺病毒穿梭载体质粒pShuttle-CMV的巨细胞病毒(CMV)启动子下游,构建重组穿梭载体pShuttle-CMV-Rat GR,线性化后与骨架载体AdEasy-1在细菌BJ5183内经同源重组得到腺病毒重组质粒pAd-Rat GR,经人胚肾293A细胞包装后得到复制缺陷型重组腺病毒Ad-Rat GR;用包装后的病毒上清转染大鼠GMC,提取细胞中总蛋白,通过Western Blot方法检测GR蛋白的表达。结果连接、重组后通过酶切和测序法筛选出pAd-Rat GR重组质粒,经人胚肾293细胞包装,48h后观察到增强型绿色荧光蛋白(EGFP)明显表达,氯化铯梯度离心纯化最终获得1×109PFU/ml滴度的重组病毒;用该滴度的Ad-Rat GR,转染大鼠GMC 48h后提取细胞总蛋白,Western Blot检测GR蛋白有明显表达。结论构建的大鼠GR基因腺病毒载体能够在大鼠GMC中表达GR蛋白,并有上调作用。; 朱璇邢昌赢朱含章濮雪华; 关键词：糖皮质激素受体腺病毒载体肾小球系膜细胞转染

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江苏省自然科学基金(BK2003109)