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小鼠胸膜间皮细胞培养方法的建立及其意义被引量：2: 2007年; 目的:分离出小鼠的胸膜间皮细胞组织,并对其进行原代培养,以观察胸膜间皮细胞的生长情况。方法:采用剪切组织块法建立小鼠胸膜间皮细胞培养体系,获取小鼠胸膜间皮细胞;用光镜与免疫组化染色法进行细胞鉴定。结果:含血清的培养基能培养出小鼠的胸膜间皮细胞,但剪切法成纤维细胞污染较少,且由于它培养后表型丧失快,基本不传代,并且培养难度较大,不易获得较高纯度胸膜间皮细胞;可直接取小鼠胸膜间皮组织进行抗角蛋白染色,角蛋白染色阳性纯度达几乎100%。结论:剪切组织块法用含血清的培养基即可培养出小鼠的胸膜间皮细胞,是低成本、简便易行的研究中医藏象理论模型鼠胸膜间皮细胞的培养体系。; 张宏方金志甲李军张瑛胥冰辛宝; 关键词：藏象超微结构小鼠

小鼠胸膜间皮细胞免疫相关基因表达谱与中医藏象理论相关性研究被引量：1: 2009年; 目的:研究小鼠胸膜间皮细胞(pleural mesothelial cell,PMC)免疫相关基因表达谱的状况。从而探索用现代免疫及基因芯片技术评价解释中医藏象理论的新方法。方法:取8只BALB/c小鼠胸膜组织块剪切成碎块,提取mRNA,经标记、杂交、清洗、芯片扫描、图象采集与数据分析等过程获得基因表达谱。结果:共筛选出小鼠胸膜间皮细胞免疫相关表达基因204条。其中主要有免疫应答及调节基因56条;炎性反应基因32条;非特异性免疫基因14条;T细胞增殖、活化、调节等相关基因23条,B细胞活化、分化、调节等相关基因9条;急性反应期基因5条;抗原加工与提呈基因4条;Ⅱ型超敏反应正向调节基因5条。结论:胸膜间皮细胞既表达免疫相关的正向调节基因亦表达负向免疫相关的调节基因。提示胸膜可能为一免疫协调器官,这对丰富中医藏象理论与肺气的实质将提供分子生物学的基础研究依据与新的思路。; 张宏方金志甲李军张瑛胥冰辛宝; 关键词：小鼠胸膜间皮细胞免疫相关基因藏象理论基因芯片

小鼠胸膜间皮细胞培养上清对脾细胞增殖反应的影响被引量：3: 2007年; 目的研究小鼠胸膜间皮细胞培养上清(MPMS)对脾细胞生长与功能的影响。方法取BALB/c小鼠胸膜组织块直接培养和用胰蛋白酶消化后培养胸膜间皮细胞。于培养的不同时间,取MPMS对ConA刺激脾细胞的增殖,采用3H-TdR掺入法测定。结果直接培养法收集的MPMS-A分别以1∶1及1∶10的比例稀释时,对脾细胞自发掺入3H-TdR的增殖均具有明显地抑制作用,与对照组(培基+脾细胞,MS)相比较差异显著(P<0.05-0.001);用胰蛋白酶消化收集的培养3 d的MPMS-B,在1∶1稀释度时,对小鼠脾细胞的增殖具有促进作用(P<0.05-0.01)。而培养3 d收集的MPMS-B,作1:10的比例稀释时,其对ConA刺激的脾细胞增殖反应具有促进作用,与对照组(MS+ConA)相比较差异显著(P<0.01)。结论胸膜细胞培养上清对脾细胞增殖呈双向作用影响,而抑制作用大于增强作用。可为研究中医藏像理论与免疫的关系提供基础研究依据。; 张宏方金志甲李军张瑛胥冰; 关键词：小鼠胸膜间皮细胞增殖反应 CONA

小鼠胸膜间皮细胞53条免疫相关高表达基因与中医肺气学说的相关性研究: 2009年; 目的:研究小鼠胸膜间皮细胞免疫相关基因表达谱的状况,从而探索用现代免疫及基因芯片技术评价解释中医肺气学说的新方法。方法:取8只BALB/c小鼠胸膜组织块剪切成碎块,提取mRNA,经标记、杂交、清洗、芯片扫描、图像采集与数据分析等过程获得基因表达谱。结果:共筛选出小鼠胸膜间皮细胞53条免疫相关高表达基因。其中主要有免疫应答高表达基因14条;炎性反应高表达基因6条;非特异性免疫应答高表达基因7条;免疫应答调节高表达基因4条;急性反应阶段高表达基因3条;抗原加工与提呈高表达基因2条;Ⅱ型超敏反应正向调节高表达基因2条。结论:从现代免疫学观点及正常小鼠胸膜间皮细胞基因芯片的研究来看,胸膜间皮细胞既表达免疫相关的正向调节基因,亦表达负向免疫相关的调节基因。这不仅可为现代免疫学增添新的内容,而且对丰富中医肺气学说,研究中医肺脏的实质乃至推动中医学理论的深入研究都将具有积极意义,为胸膜的其他后续研究构建一平台,为丰富中医肺气学说与肺气的实质提供分子生物学的基础研究依据;弥补这方面的研究空白。; 张宏方金志甲李军张瑛胥冰辛宝; 关键词：小鼠胸膜间皮细胞基因芯片

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陕西省科学技术研究发展计划项目(2003C248)