国家大学生创新性实验计划(101071825)
- 作品数：1 被引量：6H指数：1
- 相关作者：曹向然高寰陈阳洋张铮周婷更多>>
- 相关机构：陕西师范大学西北濒危药材资源开发国家工程实验室更多>>
- 发文基金：陕西省科技攻关计划国家大学生创新性实验计划更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 三叶木通MSAP反应体系的优化及引物筛选被引量：6
- 2012年
- 目的研究三叶木通表观遗传多样性,建立并优化三叶木通甲基化敏感扩增多态性(methylation sensitive amplifiedpolymorphism,MSAP)反应体系。方法以三叶木通叶片为材料,利用正交试验建立三叶木通MSAP的预扩增和选择性扩增的最佳反应体系。结果建立的MSAP最佳反应体系为酶切反应:HpaII/MspI 10 U,EcoR I 10 U;预扩增反应:总体积20μL,连接产物2μL,E00、HM00各125 ng,dNTPs 0.312 5 mmol/L,Mg2+1.875 mmol/L,Taq DNA聚合酶2 U;选择性扩增反应:总体积20μL,稀释200倍的预扩增产物5μL,引物E-ACT、HM-CAT各50 ng,dNTPs 0.250 mmol/L,Mg2+1.250mmol/L,Taq DNA酶1 U。利用优化的体系,最终从MSAP的80对引物中筛选出有效引物6对。结论建立的MSAP反应体系可用于后续三叶木通DNA甲基化的相关研究。
- 高寰张铮周婷曹向然陈阳洋王喆之
- 关键词：三叶木通MSAP引物筛选
