国家科技支撑计划(2006BAD01A19-3) 作品数:10 被引量:103 H指数:5 相关作者: 康俊梅 熊军波 杨青川 孙杰 云锦凤 更多>> 相关机构: 中国农业科学院北京畜牧兽医研究所 中国农业大学 甘肃农业大学 更多>> 发文基金: 国家科技支撑计划 中央级公益性科研院所基本科研业务费专项 江苏省科技攻关计划 更多>> 相关领域: 农业科学 生物学 更多>>
结缕草属植物杂交后代杂种真实性鉴定--SRAP分子标记 被引量:43 2009年 SRAP标记是基于PCR技术的一种新型分子标记。本研究通过SRAP分子标记技术对结缕草属植物种间杂交的5个组合37份杂交后代进行了真假杂种的鉴定,以为育种工作进一步开展奠定基础。首先筛选出在父本中能扩增出,而在母本中没有的特征带的引物,共筛选出9对引物对后代进行真实性鉴定。把父母本和后代一起进行PCR扩增、电泳,根据后代中是否能扩增出父本特征带而进行鉴定。结果表明,37个杂交后代中有32个后代具有父本特征带,被鉴定为真杂种。同时,从杂种扩增的谱带来看,条带清晰、稳定且后代出现了丰富的变异,主要表现为新谱带的出现或某些谱带的消失。据此认为,SRAP标记可以有效地对结缕草属杂交后代进行真实性鉴定和遗传分析,为杂交育种提供了理论依据。 薛丹丹 郭海林 郑轶琦 陈宣 刘建秀关键词:结缕草 SRAP标记 杂种鉴定 基于数字影像处理技术的结缕草秋季枯黄动态分析研究 被引量:3 2009年 本研究通过数码相机获取结缕草单株在秋季的株丛颜色变化图像,采用Sigmascan Pro 5.0图像分析软件,对4个结缕草材料的枯黄动态进行量化分析与比较。结果表明,用Sigmascan Pro 5.0进行结缕草单株秋季枯黄动态分析时,提取绿色像素点和黄色像素点的色相(H)和色饱和度(S)参数设置分别为H 32-107、S 10-100和H 10-32、S 25-100。参试的4个结缕草材料秋季枯黄由早到晚的顺序是:辽东结缕草、H2品系、青岛结缕草和胶东青结缕草,枯黄期与起源地的地理纬度有一定的相关性。与传统的目测评分法结果相比,数字影像处理测定结缕草枯黄率及动态变化为实测值,具有可重复性,结果更为准确。 贾蕴琪 曹致中 王赟文 孙洁峰 何勇关键词:结缕草 数字图像 枯黄 野牛草种子休眠原因分析 被引量:1 2010年 以"中坪一号"野牛草〔Buchloe dactyloide(Nutt.)Engelm〕为试验材料,通过硝酸钾、赤霉素引发试验、种子解剖、电镜扫描、能谱分析等手段,分析限制野牛草试验材料发芽率低下的原因。种子引发试验参照碱蓬(Suaeda glauce Bge.)种子解除休眠的赤霉素(GA3)和硝酸钾(KNO3)浓度,分设0.5%硝酸钾和20,40,60,100 mg/kg赤霉素等处理。结果表明:野牛草种子休眠类型属机械休眠与生理休眠同时存在,且生理休眠占主导地位的综合休眠;野牛草种球外部的颖苞对种子的强烈束缚引起了机械休眠,而生理后熟是野牛草种子生理休眠的直接原因;赤霉素对休眠程度较深的去颖苞种子引发效果最好,且以60mg/kg浓度为最佳。 孙杰 熊军波 刘永志 康俊梅 吕会刚 云锦凤 孙彦关键词:生理休眠 野牛草种子休眠原因分析 被引量:9 2009年 以"中坪一号"野牛草(Buchloe dactyloide(Nutt.)Engelm)为实验材料,通过硝酸钾、赤霉素引发实验、种子解剖、电镜扫描、能谱分析等手段,分析限制野牛草试验材料发芽率低下的原因。种子引发试验参照碱蓬(SuaedaglaucaBge.)种子解除休眠的赤霉素(GA3)和硝酸钾(KNO3)浓度,分设0.5%硝酸钾和20 mg/kg4、0 mg/kg、60mg/kg、100 mg/kg赤霉素等处理。结果表明:野牛草种子休眠类型属机械休眠与生理休眠同时存在,且生理休眠占主导地位的综合休眠;野牛草种球外部的颖苞对种子的强烈束缚引起了机械休眠,而生理后熟是野牛草种子生理休眠的直接原因;赤霉素对休眠程度较深的去颖苞种子引发效果最好,且以60 mg/Kg浓度为最佳。 孙杰 熊军波 刘永志 康俊梅 吕会刚 云锦凤 孙彦关键词:生理休眠 野牛草种子蛋白质双向电泳体系的优化 被引量:3 2010年 通过对野牛草种子蛋白双向电泳蛋白样品制备方法、等电聚焦程序以及固化胶条pH范围优化筛选,构建了适合其植物种子蛋白组研究的电泳体系。实验结果表明,使用Trizol法制备样品,可得到高纯度种子蛋白,结合使用pH4~7IPG胶条,以及优化的聚焦程序Ⅲ,能获得高分辨率、重复性好的蛋白质2-DE图谱。图像分析表明,银染后可以检测到600个以上蛋白点,其等电点主要分布于pH4~7区域,分子量主要分布于10~120kDa之间。 孙杰 康俊梅 熊军波 张琼琳 云锦凤关键词:蛋白组 双向电泳 低温胁迫对野牛草幼苗渗透调节物与根系活力的影响 被引量:16 2010年 以暖季型草坪草"中坪一号"野牛草为材料,研究低温胁迫对其幼苗渗透调节物与根系活力的影响。结果表明,渗透调节物与野牛草幼苗低温调节机制密切相关。在低温胁迫下,可溶性糖、可溶性蛋白质、游离脯氨酸含量呈上升的趋势。随着低温处理时间的延长,可溶性糖含量的增加趋于平缓;可溶性蛋白质含量受低温影响较大,随低温胁迫强度的增大,叶片中可溶性蛋白质含量明显增加;游离脯氨酸含量的变化较敏感,低温处理初期,脯氨酸含量急剧上升,随着处理时间延长脯氨酸含量又缓慢降低,但整个过程中脯氨酸含量保持在较高水平;低温胁迫对野牛草幼苗根系活力的影响较显著,随着低温胁迫时间的延长,根系活力急剧降低,说明根系对维持植物正常生长发育的重要性,或可作为植物抗寒性鉴定的一项重要指标。 康俊梅 李燕 沈静 熊军波 杨青川关键词:低温胁迫 野牛草 渗透调节物 根系活力 利用双向电泳技术分离野牛草叶片蛋白的方法研究 被引量:3 2010年 制备野牛草叶片蛋白质样品,对双向电泳条件等技术环节进行优化,以期获得高分辨率、重复性好的蛋白质双向电泳图谱,建立适应野牛草叶片蛋白组学研究的技术平台,并对其蛋白组进行初步分析。采用TCA/acetone沉淀法和Trizol沉淀法分别提取野牛草叶片蛋白,通过不同聚焦时间分离,最终经硝酸银染色,以Imagemaster 2D Platinum V 5.0图像分析软件对所得的双向电泳图谱进行分析比较。对获得的最佳图谱进行蛋白点分布分析,选择最适合的胶条pH值。结果表明:Trizol沉淀法提取蛋白样品,总聚焦伏时数在8-10万V.h间,为最适合条件,获得图谱背景清晰,纵横纹少,蛋白点分离较完全,在pH3-10胶条凝胶可检测到的蛋白质点达到800个。对蛋白点pH分布范围分析表明,85%蛋白点分布在pH4-7之间,选择pH4-7的IPG胶条,能检测到1 000个以上的蛋白点。以Trizol沉淀法结合优化的双向电泳参数对野牛草叶蛋白组进行双向电泳分离,获得了高分辨率、高重复性的双向凝胶电泳图谱,可用于野牛草差异蛋白质组学研究。 康俊梅 熊军波 孙彦 李燕 沈静 杨青川关键词:野牛草 蛋白质组 双向电泳 海滨雀稗栽培品种的形态特征与AFLP分子标记分析 被引量:12 2011年 为解决海滨雀稗(Paspalumvaginatum)大面积营养扩繁过程中品种纯度问题,本研究利用AFLP分子标记技术,结合形态学特征,对海滨雀稗品种"Salam","SeaSpray","SeaDwarf","SeaIsle 2000"和一个"SeaDwarf"粗茎变异株系进行遗传差异分析,旨在探讨海滨雀稗品种的快速鉴别方法。结果表明:海滨雀稗的形态学遗传距离与AFLP分子标记相似系数的聚类结果一致,均表明Salam和SeaSpray之间的遗传差异较小,可以聚为一类,SeaD-warf和SeaIsle2000的亲缘关系较近,可以聚为另一类。另外,SeaDwarf粗茎变异株系与SeaDwarf之间的AFLP分子标记的遗传相似系数为0.5281,形态学遗传距离是4.8570,均表明二者之间遗传差异较大,无论是形态特征、还是AFLP分子标记均证实SeaDwarf粗茎株系确实已经变异。因此,AFLP分子标记的方法可用于海滨雀稗品种或者突变体的辅助鉴定。 贺小霞 刘一明 王兆龙关键词:海滨雀稗 AFLP分子标记 紫花苜蓿柠檬酸合成酶基因的克隆及对烟草的转化 被引量:10 2010年 柠檬酸合成酶是调节植物体内有机酸的活性酶之一,增加植物体内的柠檬酸可以提高植物对土壤中磷的吸收以及抗铝毒性。通过从紫花苜蓿(Medicago sativaL.)中克隆柠檬酸合成酶基因(MsCS),以期获得该基因全长,并为将来研究紫花苜蓿耐铝性以及对磷的吸收方向提供基础。首先利用cDNA末端快速扩增方法(RACE),克隆获得MsCS的cDNA全序列,然后利用pBI121构建植物超表达载体pBI-MsCS,通过农杆菌介导的叶盘法转化烟草(Nicotiana tabacumL.)。结果显示:该基因序列全长为2031 bp,开放阅读框1551 bp,编码517个氨基酸,与其他物种的柠檬酸合成酶具有高度的同源性。获得17株卡那抗性植株。经PCR检测有6株为阳性植株,初步表明该基因已整合到烟草的基因组中。 靳苗苗 杨青川 金洪 康俊梅 龙瑞才关键词:紫花苜蓿 基因克隆 ^(60)Coγ射线辐照野牛草干种子的细胞学效应 被引量:4 2009年 通过5种不同剂量的60Coγ射线对野牛草(Buchloe dactyloides(Nutt)Engelm.)种子的辐射诱变效应研究表明,γ射线辐照能抑制野牛草根尖细胞的有丝分裂。随γ射线辐射剂量的增加,根尖细胞有丝分裂指数呈下降趋势。γ射线辐照能诱发根尖细胞的染色体畸变和核畸变,产生桥、染色体断片、粘连染色体、游离染色体、落后染色体、单微核、双微核、多微核、小核等多种畸变类型。在0~2000 Gy范围内,随剂量的增加各种畸变率不断提高,至2000 Gy辐照剂量时,各畸变率达到最大。 李健 王健 赵智同 张蕴薇关键词:野牛草 Γ射线 染色体畸变