广东省中医药管理局基金(2007095)
- 作品数：13 被引量：37H指数：4
- 相关作者：邓新国高杨何梅凤孙倩娜钟志强更多>>
- 相关机构：中山大学上海第二医科大学附属第九人民医院中国中医科学院眼科医院更多>>
- 发文基金：广东省中医药管理局基金国家教育部博士点基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 灵芝孢子油对N-甲基-N-亚硝酸脲诱导的大鼠视网膜损伤中Caspase-3表达的影响被引量：5
- 2009年
- 目的观察灵芝孢子油(ganoderma spore oil,GSO)对N-甲基-N亚硝酸脲(N-methyl-N-nitrosourea,MNU)诱导的视网膜外核层细胞损伤的作用及对Caspase-3时空表达的影响。方法50d♀SD大鼠随机分为正常对照(NC)组、MNU造模(MNU)组、二十二碳六烯酸处理(DHA)组和灵芝孢子油处理(GSO)组。各组分别于MNU造模前0h及造模后1d、3d、7d、10d处死大鼠取材,采用RT-PCR、免疫荧光技术检测视网膜中Caspase-3表达和分布的变化,TUNEL法检测视网膜细胞凋亡情况。结果①RT-PCR检测:与NC组比较,MNU组1d、3d、7d视网膜Caspase-3表达增强(P<0.01);GSO组和DHA组1d、3d低于MNU组(P<0.01),1dGSO组表达较DHA组低(P<0.01)。②免疫荧光检测:在3d,GSO组和DHA组Caspase-3表达水平低于MNU组,GSO组较DHA组稍弱。③TUNEL法检测:NC组在视网膜各层均未发现凋亡细胞,MNU造模后可见外核层细胞凋亡。GSO组和DHA组在1d、3d外核层细胞凋亡百分率少于对应的MNU组(P<0.01),3d GSO组低于DHA组(P<0.01)。结论灵芝孢子油可能通过下调视网膜Caspase-3的表达,阻抑MNU诱导的视网膜外核层光感受器细胞凋亡的作用。
- 高杨邓新国孙倩娜何梅凤钟志强
- 关键词：光感受器细胞凋亡灵芝孢子油二十二碳六烯酸
- 兔眼局部应用盐酸川芎嗪滴眼液的前房穿透性研究被引量：1
- 2007年
- 目的:探讨兔眼局部应用盐酸川芎嗪滴眼液后前房穿透性。方法:18只白兔随机分为6组,并于各组白兔结膜囊内滴入50μL盐酸川芎嗪滴眼液,分别于5、15、30、60、120、180min取房水,采用高效液相色谱法进行测定。色谱柱为DiamonsilCl8不锈钢柱(250mm×4.6mm,5μm);流动相为甲醇:水=62:38;流速:0.9mL/min;检测波长为280nm。结果:5、15、30、60、120、180min各组的房水浓度分别为(15.785±2.988)μg/mL,(11.900±1.743)μg/mL,(8.286±1.182)μg/mL,(2.745±0.807)μg/mL,(0.379±0.091)μg/mL,(0.049±0.038)μg/mL,其中5min为最高峰,然后逐渐下降,180min后房水浓度已降到很低。结论:盐酸川芎嗪滴眼液滴眼后房水穿透性良好,这一结果为盐酸川芎嗪滴眼液局部应用后治疗眼前部疾病提供了实验依据。
- 何梅凤邓新国吴伟王延东
- 关键词：盐酸川芎嗪房水高效液相色谱
- N-甲基-N亚硝脲诱导的大鼠视网膜损伤过程中光感受器间维生素A类结合蛋白和恢复蛋白的表达变化
- 2013年
- 观察N-甲基-N亚硝脲（MNu）诱导的大鼠视网膜损伤对光感受器间维生素A类结合蛋白（IRBP）和恢复蛋白（recoverin）在视网膜中的表达变化。方法雌性Sprague—Dawley大鼠30只随机分为正常对照组和MNU处理1、3、7、10d组，每组均为6只大鼠。不同时间MNU处理组大鼠按体重40mg／kg给予一次性腹腔注射MNU；正常对照组大鼠腹腔注射生理盐水5ml／kg。逆转录-聚合酶链反应（RT-PCR）和免疫荧光检测各组大鼠视网膜中IRBP和恢复蛋白的mRNA及蛋白表达。结果RT—PCR检测结果显示，与正常对照组比较，不同时间MNU处理组IRBP的mRNA表达水平随MNU作用时间增加而逐渐降低，差异均有统计学意义（P〈O．01）；恢复蛋白的mRNA表达水平随MNU作用时间增加而逐渐升高。MNU处理ld组恢复蛋白的mRNA表达水平与正常对照组比较，差异无统计学意义（P〉0．05）；MNU处理组3、7、10d组恢复蛋白的mRNA表达水平与正常对照组比较，差异均有统计学意义（P〈O．05）。免疫荧光显微镜观察结果显示，正常对照组大鼠视网膜IRBP主要表达在光感受器细胞内、外节；不同时间MNU处理组IRBP在视网膜各层均有表达并随MNU作用时间增加而逐渐降低。恢复蛋白阳性标记物主要见于视网膜内核层、内丛状层及节细胞层，随MNU作用时间增加恢复蛋白的表达逐渐增强。结论MNU可降低IRBP的表达，但增加恢复蛋白的表达。
- 高杨邓新国李娜
- 关键词：视网膜疾病病理生理学中毒载体蛋白质类
- 川芎嗪对过氧化氢诱导大鼠离体培养晶状体氧化损伤的抗氧化作用
- 2013年
- 目的探讨川芎嗪对过氧化氢诱导大鼠离体培养晶状体氧化损伤的抗氧化作用。方法 SD大鼠24只,随机分8组,即正常对照组、过氧化氢对照组、不同浓度川芎嗪组(0.125 mg/ml、0.25 mg/ml、0.5 mg/ml、1 mg/ml、2 mg/ml和4 mg/ml)。摘除大鼠眼球,取晶状体进行体外培养,24 h后取出晶状体,肉眼观察晶状体混浊程度,然后匀浆取上清液,通过黄嘌呤氧化酶反应法检测超氧化物歧化酶(SOD)活性;通过丙二醛可与硫代巴比妥酸缩合法检测丙二醛(MDA)含量。结果 SOD检测结果显示,与过氧化氢组比较,0.5 mg/ml、1 mg/ml和2 mg/ml的川芎嗪浓度可明显升高SOD活性,P<0.05或P<0.01。MDA检测结果显示,与过氧化氢组比较,各个浓度的川芎嗪均可降低晶状体MDA的含量,P<0.01。结论川芎嗪可抵抗过氧化氢所致的大鼠晶状体的氧化损伤,其机制可能与提高SOD活性和降低MDA含量有关。
- 张世华李娜邓新国
- 关键词：川芎嗪晶状体过氧化氢
- 不同MNU剂量诱导大鼠视网膜光感受器细胞损伤的视网膜电图和病理形态改变被引量：10
- 2008年
- 目的:探讨不同剂量N-甲基-N-亚硝脲(MNU)诱导的大鼠视网膜光感受器细胞损伤动物模型的眼电图和病理形态改变,寻找最适的MNU剂量。方法:50d龄雌性SD大鼠150只,随机分6组(每组25只大鼠),即30mg/kg、35mg/kg、40mg/kg、45mg/kg和50mg/kg MNU造模组和正常对照组,在造模后12h、1d、3d、7d和10d测定大鼠的眼电生理,并取眼球进行病理检查。结果:大鼠眼电生理结果显示,与正常组比较,30mg/kg和35mg/kg MNU组在各个时点对a波潜伏期和b波潜伏期的影响变化不大(P>0.05);a波振幅和b波振幅在第1、3d下降较为明显(P<0.05或P<0.01)。30mg/kg和35mg/kg MNU组在不同的时点:a波潜伏期、b波潜伏期、a波振幅和b波振幅明显高于40mg/kg、45mg/kg和50mg/kg MNU组(P<0.05或P<0.01)。45mg/kg和50mg/kg MNU组在不同的时点绝大多数呈现熄灭型电生理的表现。病理结果显示,在不同的时点,30mg/kg和35mg/kg MNU对大鼠视网膜光感受器细胞的损伤程度较轻,明显低于40mg/kg、45mg/kg和50mg/kg MNU对大鼠视网膜外核层的损伤(P<0.05或P<0.01)。损害程度为50mg/kg>45mg/kg>40mg/kg。结论:对大鼠视网膜光感受器细胞的病理和功能损害,30mg/kg和35mg/kg MNU组损害较轻,40mg/kg、45mg/kg和50mg/kg MNU组损害较重,40mg/kg MNU是引起大鼠视网膜光感受器细胞最大损害的最低剂量。
- 邓新国葛坚何梅凤高杨钟志强
- 关键词：光感受器视网膜视网膜电图
- 干眼症患者435例临床症状分析被引量：14
- 2008年
- 目的分析不同类型干眼症患者的临床表现及其特点。方法收集2006年10月至2008年2月就诊于我科的435例(870眼)干眼症患者的资料,并进行相关检查,包括裂隙灯检查、角膜荧光素染色、泪膜破裂时间(breakuptime,BUT)检查和基础泪液分泌试验(Schirmer Ⅰtest,SⅠt)。结果435例干眼患者中,眼部不适症状中最多见者为眼部干涩312例和视疲劳308例,其次是眼痒265例,视物模糊/视力下降247例,眼红241例,异物感213例,畏光/流泪和眼痛均为197例,眼烧灼感112例,睫毛上粘有碎屑、球结膜出血和眼睑痉挛者少见。女性发病率多于男性。非-Sjgren综合征眼患者386例,平均年龄(34.70±12.84)岁。BUT≤5s者410例;角膜荧光素染色阳性患者427例;SⅠt≤5mm者335例,6mm≤SⅠt<10mm者83例。结论干眼症患者的临床症状具有多样性特点,尤以眼干涩、视疲劳、眼痒和视物模糊/视力下降最为多见;角膜荧光素染色检查、BUT、SⅠt检查是诊断干眼症的主要依据。
- 邓新国孙倩娜高杨
- 关键词：干眼症
- 葛根素抗rds小鼠视网膜光感受器细胞凋亡及其机制探讨被引量：4
- 2008年
- 目的观察葛根素对遗传性视网膜色素变性rds小鼠的治疗作用,并探讨其抗视网膜光感受器细胞凋亡的作用机制。方法rds新生小鼠随机分为两组,实验组和对照组。实验组小鼠从出生时开始,ip盐酸葛根素80mg/kg,每天2次,至生后35 d,对照组同时ip等量生理盐水。分别在用药后0、3、7、14、21、28、35 d取眼球,立即经10%中性甲醛固定,常规病理切片。另取眼球经2.5%戊二醛溶液固定,电镜观察。用TUNEL方法检测视网膜光感受器细胞的凋亡,用免疫组化方法测定Bcl-2在视网膜的表达。结果病理结果显示,经葛根素治疗后14、21、28、35 d,rds小鼠光感受器细胞层数与对照组比较,明显增加(P<0.01)。电镜结果显示,葛根素治疗组与对照组比较,在7、14、21、28、35 d可减轻rds小鼠光感受器细胞及其外段盘膜部位的线粒体、盘膜和外界膜的破坏。rds小鼠经葛根素药物治疗后3、7、14、21、28、35 d,光感受器细胞的凋亡率与对照组比较明显减少(P<0.01);在7、14、21、28、35 d,Bcl-2在视网膜光感受器细胞基质及其内外段的表达明显增强(P<0.01)。结论葛根素可减轻rds小鼠视网膜光感受器细胞的病变,其作用机制可能是通过上调视网膜光感受器细胞及其内外段Bcl-2的表达延缓rds小鼠视网膜光感受器细胞的凋亡。
- 邓新国胡世兴郭向明黎仕强肖学珊张清炯
- 关键词：葛根素RDS小鼠光感受器细胞凋亡BCL-2
- MNU诱导的视网膜光感受器细胞损伤过程中视网膜VEGF表达的变化被引量：2
- 2009年
- 目的:探讨N-甲基-N-亚硝脲(MNU)诱导的大鼠视网膜光感受器细胞损伤过程中视网膜血管内皮生长因子(VEGF)的表达变化。方法:50d龄雌性SD大鼠55只,随机分5组,正常组和造模组(分4个组),造模组40mg/kgMNU单次腹腔注射,在注射后1d、3d、7d和10d取眼球立即分离视网膜以提取总RNA,通过RT-PCR检测VEGF mRNA的表达情况;摘取眼球进行冰冻切片,免疫荧光技术检测VEGF蛋白质在视网膜中的表达以及分布的变化。结果:RT-PCR检测结果表明,与正常对照组比较,MNU造模后1d,VEGF mRNA的表达均较强,3dVEGF表达最高,P<0.01;7d和10d恢复正常,无明显差异,P>0.05。免疫荧光检测结果显示,VEGF蛋白质表达与RT-PCR检测结果基本一致,VEGF蛋白质在视网膜各层均有表达,造模后1d和3d,外核层损伤较重,外核层VEGF的表达明显增强。结论:MNU诱导的视网膜光感受器细胞损伤可使VEGF的表达增强,提示VEGF可能参与MNU诱导的视网膜光感受器细胞的损伤修复。
- 邓新国高杨何梅凤孙倩娜钟志强
- 关键词：N-甲基-N-亚硝脲光感受器
- 不同浓度川芎嗪对人翼状胬肉成纤维细胞的作用
- 2011年
- 目的观察川芎嗪对体外培养的人翼状胬肉成纤维细胞的抑制作用。方法收集眼科临床手术切除的人翼状胬肉标本，消化分离成纤维细胞，进行体外细胞培养。分别在pH为7．40和pH为600的条件进行，以无血清RPMI1640培养液配制终浓度为4．0mg／ml、2．0mg／ml、1．0mg／ml、0．5mg／ml和0．25mg／ml的川芎嗪药液，0.02％的丝裂霉素C（MMC）作为阳性对照组，pH为740和／或pH为6．00的RPMI1640培养液作正常对照组，对体外培养的胬肉成纤维细胞进行作用。通过光镜观察对细胞进行计数；四甲基偶氮唑盐（MTT）技术检测显示细胞存活率，间接免疫荧光技术检测细胞波形蛋白（Vimentin）的表达。结果细胞计数和MTT法检测结果显示，在pH为740的条件下，与正常1640培养液组比较，4．0mg／ml的川芎嗪对体外培养的人翼状胬肉成纤维细胞均有明显的抑制作用（P〈0．001）。在pH为6．00的条件下，与正常1640培养液组比较，不同浓度的川芎嗪和pH为6．00的1640培养液对人翼状胬肉成纤维细胞均有明显的抑制作用，与pH为6．00的1640培养液组比较，4．0mg／ml的川芎嗪对人翼状胬肉成纤维细胞的抑制作用明显强于其他浓度的川芎嗪，0.5mg／ml和0.25mg／ml的川芎嗪可明显促进人翼状胬肉成纤维细胞的生长（p〈0.001）。结论川芎嗪对人翼状胬肉成纤维细胞的生长具有双重作用，较高浓度的川芎嗪（4．0mg／ml）对人翼状胬肉成纤维细胞的生长有抑制作用。较低浓度的川芎嗪（0.5mg／ml、0.／ml）在pH为6．00的条件下对人翼状胬肉成纤维细胞的生长有保护作用。
- 孙倩娜邓新国高杨何梅凤李娜郭文军
- 关键词：川芎嗪翼状胬肉成纤维细胞
- 川芎嗪对大鼠离体培养晶状体SOD,CAT和MDA的影响被引量：1
- 2010年
- 目的:探索川芎嗪(tetramethylpyrazine,TMP)对大鼠离体培养晶状体抗氧化作用的SOD,CAT和MDA的影响。方法:取SD大鼠晶状体放入0,0.125,0.25,0.5,1,2,4g/L的TMP溶液的培养液进行离体培养24h后,观察晶状体形态变化,并作组织匀浆后采用黄嘌呤氧化酶反应法测定SOD活性,钼酸铵终止法测定CAT活性,硫代巴比妥酸法测定MDA含量。结果:与正常对照组比较,0.25,0.5,1和2g/L的TMP可明显提高大鼠晶状体中SOD的活性(P<0.01,P<0.01,P<0.01,P<0.05),而0.125和4g/L的TMP作用效果不明显。CAT检测结果显示,与正常对照组比较,0.5g/L的TMP可明显提高大鼠晶状体中CAT的活性(P<0.01),而0.125,0.25,1,2和4g/L的TMP作用效果不明显。与正常对照组比较,0.125,0.25,0.5,1和2g/L的TMP可明显降低大鼠晶状体中MDA的含量(P<0.01),4g/L的TMP作用效果不明显。结论:TMP对培养大鼠离体晶状体有提高SOD,CAT活性和降低MDA含量的作用。
- 朱月星邓新国高杨朱宇广
- 关键词：川芎嗪抗氧化作用
