国家自然科学基金(81071181)
- 作品数：3 被引量：2H指数：1
- 相关作者：郭睿李彪张敏薛丽喆苗莹更多>>
- 相关机构：上海交通大学医学院附属瑞金医院更多>>
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- 131I辐射正反馈调控杆状病毒介导hNIS基因在脑胶质瘤治疗中的实验研究
- 目的拟用对辐射敏感的早期生长反应(Egr1)启动子来启动人钠碘同向转运体(hNIS)表达,hNIS表达增加促进碘摄取,进而刺激hNIS表达,达到增加碘摄取的目的,形成一正反馈环,提高肿瘤治疗疗效。方法制备对辐射敏感的
- 郭睿徐昊平李彪
- 早期生长反应基因1启动子介导肿瘤基因-放疗的研究进展被引量：1
- 2010年
- 早期生长反应基因1（Egr-1）启动子为Egr-1上游的顺式作用元件,其活性受电离辐射、自由基等诱导剂的调控.Egr-1与治疗基因结合（如肿瘤坏死因子α基因、自杀基因等）构成基因-放射治疗体系,利用辐射在肿瘤局部从时间、空间调控治疗基因的表达,使表达产物局限于肿瘤局部发挥肿瘤杀伤效应,并降低了不良反应.放射治疗与基因治疗的结合为肿瘤治疗提供了新方法.
- 郭睿李彪
- 关键词：基因表达调控放射疗法早期生长反应基因1
- 杆状病毒介导NIS治疗人脑胶质瘤的实验研究:188Re与131I的比较
- 目的比较hNIS介导的~(188)Re与~(131)I在杆状病毒感染的人脑胶质瘤细胞中摄取的区别。方法进行杆状病毒载体构建及病毒包装。以杆状病毒为载体,进行CMV启动的hNIS基因表达。病毒感染人脑胶质瘤U87细胞系并表...
- 郭睿徐昊平李彪
- 双启动子杆状病毒介导131I肿瘤靶向治疗的实验研究
- 2014年
- 目的构建由人端粒酶逆转录酶（hTERT）启动子调控的N1S基因以及由早期生长应答因子1（Egr1）启动子调控的人纤溶酶原Kringle5（K5）基因的双启动子重组杆状病毒载体，探讨同时靶向肿瘤细胞与血管内皮细胞的基因治疗模式的可行性。方法将hTERT启动子和N1S基因片段以及Egr1启动子和麟基因片段分别亚克隆至杆状病毒载体，经草地贪夜蛾卵巢细胞（Sf9）包装并扩增得到重组杆状病毒（Bac—hTERT-N1S—Egr1-K5），同时将CMV启动子调控的重组杆状病毒（Bac—CMV-NIS—Egr1-K5）以及不含NIS基因或不含硒基因的重组杆状病毒（Bac—hTERT-O—Egrl-K5、Bac-hTERT-NIS—Egr1-0）作为对照组。采用荧光定量PCR及Westernblot分析NISmRNA和蛋白在人宫颈癌细胞HeLa中的靶向表达，以及131I辐射对K5mRNA和蛋白的表达调控。通过摄碘实验、NaClO4抑制实验以及细胞增殖抑制实验验证NIS蛋白的功能及由其介导的131I抑瘤作用。通过细胞凋亡实验评估K5蛋白对人脐静脉内皮细胞（HUVEC）的促凋亡作用。统计学检验采用方差分析。结果成功构建重组杆状病毒Bac—hTERT-NIS—Egr1-K5。荧光定量PCR及Westernblot显示肿瘤特异性启动子hTERT介导的NIS基因仅在HeLa细胞中有表达，而在正常肺纤维细胞MRC5中无表达。131I可以调控辐射敏感启动子Egr1下游您基因的转录和翻译。细胞摄碘实验显示Bac-hTERT-NIS—Egr1-K5感染的HeLa细胞摄碘增加了5．6倍，与未加NaClO4组比，其摄碘能被NaClO4显著抑制（F=199．296，P〈0．05）。131I对Bac—hTERT-NIS—Egr1-K5感染的HeLa细胞的抑制效果明显，细胞存活率仅为38．3％。Bac—hTERT-NIS—Egrl一K5感染的HUVEC细胞在131I照射下的凋亡率（30．8％）显著高于Bac．hTERT-NIS—Egr1-0组和未加病毒组（11．2％和10．9％，F=19．926、45．409，均P〈0．05）。结论重组杆状病毒Bac-hTERT-NIS—Egrl．K5可使NIS基因在肿瘤细胞�
- 张敏郭睿石朔苗莹徐昊平李彪
- 关键词：末端转移酶钠碘转运体碘放射性同位素
- 人端粒酶反转录酶启动子调控人钠碘同向转运体基因肿瘤靶向治疗的实验研究被引量：1
- 2012年
- 目的:探讨肿瘤特异性人端粒酶反转录酶(hTERT)启动子调控的人钠碘同向转运体(hNIS)的特异性抗肿瘤作用。方法:将质粒pcDNA3.1-CMV-hNIS中的hNIS cDNA亚克隆至含hTERT核心启动子的质粒载体pGL3-hTERT-luc中,以构建质粒pGL3-hTERT-hNIS,并以质粒pGL3-hTERT-luc及pcDNA3.1-CMV-hNIS分别作为阴性对照及阳性对照,然后采用脂质体将其转染至人胚肺成纤维细胞MRC-5及肿瘤细胞HeLa、A549和U87中,采用荧光定量聚合酶链反应(PCR)检测hNIS mRNA水平;免疫细胞化学法及流式细胞术(FCM)检测hNIS蛋白的表达情况;摄碘实验验证hNIS蛋白的功能;同时采用MTT观察131I的细胞杀伤作用。结果:成功构建质粒pGL3-hTERT-hNIS,转染4种细胞后,3种肿瘤细胞的hNIS mRNA水平明显高于MRC-5细胞(P<0.05)。3种肿瘤细胞均可表达hNIS蛋白,而MRC-5细胞不表达。与Na125I孵育30 min时HeLa、A549和U87细胞的摄碘量分别是阴性对照组的25倍、20倍和18倍。131I照射7 h后,3种肿瘤细胞的相对存活率显著下降(P<0.05)。结论:hTERT启动子调控hNIS基因在肿瘤细胞中特异性表达,这些细胞可特异性摄碘并被其有效杀伤,为行进一步体内实验奠定基础。
- 薛丽喆张敏郭睿李彪
- 关键词：核心启动子
