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BrdU-labelled neurons regeneration after cerebral cortex injury in rats被引量：3: 2006年; ZHANG Yue-linQIU Shu-dongZHANG Peng-boSHI Wei; 关键词：神经发生

脑源性神经营养因子融合蛋白真核表达质粒的构建及表达被引量：1: 2009年; 目的构建以增强型绿色荧光蛋白(EGFP)为报告基因的脑源性神经营养因子(BDNF)融合蛋白真核表达质粒,并对其表达和定位进行研究。方法以人血白细胞DNA为模板,利用一对删除终止密码子的引物进行PCR获得BDNF基因片段,并将其与pEGFP-N1质粒载体连接,构建BDNF-EGFP融合蛋白真核表达质粒。以脂质体Lipo-fectamine2000转染Hela细胞,提取总RNA,通过RT-PCR方法检测BDNF-EGFP在转录水平的表达,Western blot及荧光显微镜进一步观察融合蛋白的表达定位。结果酶切和PCR鉴定证实BDNF基因片段正确克隆入载体质粒中,转染Hela细胞后,RT-PCR证实BDNF-EGFP融合蛋白在转录水平有表达,荧光显微镜观察显示BDNF-EGFP融合蛋白主要分布于细胞质中,Western blot结果显示Hela细胞培养液中有BDNF-EGFP融合蛋白存在。结论成功构建了BDNF-EGFP融合蛋白真核细胞表达质粒,BDNF-EGFP融合蛋白能够在Hela细胞中表达,主要位于细胞质中并可以分泌到细胞外。; 石秦东张蓬勃田玉梅张军峰陈新林刘勇; 关键词：脑源性神经营养因子绿色荧光蛋白融合蛋白 HELA细胞

大鼠脑皮质电凝损伤对室下区细胞增殖的影响被引量：1: 2006年; 作为已知的神经发生区，室下区邻近大脑皮质和一些具有重要功能的前脑神经核，室下区的神经发生为脑损伤后的神经修复带来了希望，有资料研究了单侧大脑皮质抽吸损伤和液体冲压伤对室下区的神经发生的影响。本实验的目的在于研究大鼠大脑皮质电凝伤后内源性神经干细胞的增殖性反应和增殖的时间过程。; 张越林邱曙东张蓬勃师蔚; 关键词：大脑皮质脑损伤后电凝内源性神经干细胞神经发生

Effects of ketamine-midazolam anesthesia on the expression of NMDA and AMPA receptor subunit in the peri-infarction of rat brain被引量：4: 2006年; 在神经原死亡的一个重要角色由局部缺血导致了的受体玩的 N-methyl-D-aspartate (NMDA ) 受体 andalpha-amino-3-hydroxy-5-methyl-4-isoxazole-propionic 酸(AMPA ) 的背景激活。ischemicneuron 损害上的静脉内的麻药的减轻的效果与他们对 NMDA 受体的影响有关。这研究被执行在仙子梗塞在 NMDA 和 AMPA 受体子单元表示上调查 ketamine-midazolam 麻醉的效果是化学家老鼠大脑并且探索它的潜在的机制 ofneuroprotection。三十只 Sprague Dawley (SD ) 老鼠在 ketamine/atropine (100/0.05 mg/kg ) 或 ketamine-midazolam/atropine (60/50/0.05 mg/kg ) 下面受到永久中间的服的动脉吸藏的方法 intraperitoneal 麻醉(n=15 各个) 。在局部缺血以后的 24 个小时，在每个组的 fiver ats 被注射 ketamine 或 ketamine-midazolamintraperitoneally 的上述剂量打死，梗塞尺寸被测量。在局部缺血以后的 24 和 72 个小时，在每个组的四只老鼠被注射 ketamine 或 ketamine-midazolamintraperitoneally 的上述剂量打死。在与 toluidine 蓝色染色大脑织物片以后，在仙子梗塞的熬过的神经原被观察。另外， NMDA 受体的表示水平 1 (NR1 ) ， NMDAreceptors 2A (NR2A ) ， NMDA 受体 2B (NR2B ) 和 AMPA (GluR1 子单元) 被灰度分析在免疫决定组织化学的染色的片。与 ketamine 麻醉相比结果， ketamine-midazolam 麻醉生产了更小的梗塞尺寸不仅[(24.1 ± 4 .6 )% 对(38.4 ± 4 .2 )% ， P < 0.05 ] ，而且更高的神经原密度(24 个小时：846 ± 1 6 对 756 ± 2 4， P < 0.05；72 hours:882 ± 2 2 对 785 ± 18， P < 0.05 ) 并且更低的 NR2A (24 个小时：123.0 ± 4 .9 对 95.0 ± 2 .5， P < 0.05；72hours：77.8 ± 4 .1 对 54.2 ± 3 .9， P < 0.05 ) 并且 NR2B (24 个小时：98.5 ± 2 .7 对 76.3 ± 2 .4， P < 0.05；72hours：67.2 ± 7.5 对 22.2 ± 2.6， P < 0.05 ) 在仙子梗塞追随者局部缺血的表示水平。结论 ketamine-midazolam 麻醉在上的保护的效果是大脑损害可以�; ZHANG Yue-linZHANG Peng-boQIU Shu-dongLI YongTIAN Ying-fangWANG Ying

EFFECTS OF CEREBRAL CORTICAL CONCIS ON CELL PROLIFERATION OF THE SUBVENTRICULAR ZONE IN ADULT RATS: 2006年; Objective To investigate the proliferative response and time course of endogenous neural stem/progenitor cells after cerebral cortical concis in the adult rats. Methods Eighty adult male Sprague-Dawley rats were used in this study. Cumulative BrdU labeling was employed to detect the proliferating cells. At 1d, 3d, 7d, 14d, and 21d after cerebral cortical concis, the rats were killed for BrdU immunohistochemical staining and cell counting in the injured ipsilateral SVZ. Results Little BrdU immunoreactivity cells was present in SVZ of the control rats from day 7 to day 21 after sham operation. The number of BrdU immunoreactivity cells in the injured ipsilateral SVZ increased at day 1 and peaked at day 7 after cerebral cortical concis. Conclusion After cerebral cortical concis of the adult rats, neural stem/progenitor cells in the injured ipsilateral SVZ markedly proliferated with a peak at day 7. This finding may be important for manipulating SVZ cells to promote the recovery from cerebral cortical concis.; 张越林邱曙东张篷勃师蔚; 关键词：NEUROGENESIS RAT

以EGFP为报告基因的增强子鉴定质粒载体的构建及鉴定被引量：5: 2007年; 目的构建以EGFP为报告基因的增强子鉴定质粒载体,并对其进行鉴定。方法以pEGFP-N1质粒为模板,PCR法扩增获得EGFP基因片段,并将其亚克隆入PGL3-promoter质粒骨架,得到以EGFP为报告基因的增强子鉴定质粒pEGFP-enhancer。人工合成不同拷贝的缺氧反应元件(HRE)增强子序列,插入到pEGFP-enhancer多克隆位点获得重组质粒pEGFP-HRE、pEGFP-5HR,以脂质体Lipofectamine 2000转染Hela细胞,常氧与缺氧处理后以荧光显微镜及流式细胞仪观察EGFP荧光表达。结果构建的不同拷贝HRE的增强子鉴定质粒pEGFP-HRE、pEGFP-5HRE转染Hela细胞后,常氧处理绿色荧光表达无差异,缺氧处理后随HRE拷贝数增加绿色荧光表达强度增加。结论成功构建了增强子表达质粒pEGFP-enhancer,通过EGFP的表达强度可以反应增强子活性。; 石秦东张蓬勃康前雁陈新林田玉梅刘建新刘勇; 关键词：增强子绿色荧光蛋白缺氧反应元件 HELA细胞

局灶性脑缺血后室管膜 /室下区细胞迁移到梗塞区周围并分化为神经元和星形胶质细胞(英文)被引量：25: 2005年; 目的研究局灶性脑缺血后室管膜/室下区细胞的迁移分化,揭示梗塞区周围新生细胞的来源.方法大脑中动脉阻塞前,将10μl 0.2%的荧光染料DiI注射于体质量250～350 g的雄性SD大鼠侧脑室以预标记室管膜/室下区细胞.脑缺血后,采用累积式的BrdU标记方法标记新生细胞并通过双重免疫荧光染色确定细胞分化.标记的细胞通过激光共聚焦显微镜观察.结果在非缺血对照大鼠,DiI标记细胞定居于室管膜/室下区.局灶性脑缺血后,DiI标记细胞出现于胼胝体,邻近的纹状体和皮质.此外,缺血14 d后,梗塞区周围纹状体和皮质内可见一些DiI/BrdU/GFAP或DiI/BrdU/NeuN三重标记阳性细胞.结论局灶性脑缺血后,室管膜/室下区细胞迁移到梗塞区周围并分化成神经元和星形胶质细胞,这一发现对于理解成体神经干细胞的起源和开发促进脑损伤后内源性神经发生的新措施具有重要意义.; 张蓬勃刘勇李捷康前雁田英芳陈新林赵建军石秦东宋土生钱亦华; 关键词：室管膜细胞神经发生局灶性脑缺血

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国家自然科学基金(30200291)

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